苦蘵多糖的提取及体外抗氧化活性的研究

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1、苦蘵多糖的提取及体外抗氧化活性的研究【摘要】目的研究苦蘵多糖的醇沉条件及其体外抗氧化活性。方法经超声提取，除脂，除蛋白等工艺得到苦蘵粗多糖，并考察了醇沉条件(醇沉比、温度、pH、时间、浓缩比)对多糖沉淀的影响。采用体外实验研究了苦蘵多糖对·OH和DPPH的清除作用及对大鼠肝匀浆脂质过氧化的抑制作用。结果在最佳的醇沉条件(浓缩比4∶1,温度-20℃，醇沉时间1h，醇沉比为1∶4，pH为7)下，多糖提取率为%。多糖对大鼠肝匀浆脂质过氧化的抑制率可达80%,对·OH和DPPH也都有很好的清除作用。结论苦蘵果实

2、中多糖有良好的体外抗氧化活性。【关键词】苦蘵多糖抗氧化Abstract:ObjectiveTostudytheantioxidantactivitiesofpolysaccharideextractedfromPhysalispubescensL..MethodsPolysaccharidewasextractedfromPhysalispubescensL.fruitbyultrasonicmethod,thecontentwasdeterminedbyspectrophotometry,theinv

3、itroscavengingactivitiesofpolysaccharideonhydroxylradicalandDPPH,anditsprotectiveeffectsonlipidperoxidationofliverhomogenateinratswereinvestigatedinthishadstrongscavengingeffectonhydroxylradicalandDPPH,itseffectonsuperoxideradicalwasweek,anditshowedsigni

4、ficantprotectiveeffectonlipidperoxidationofliverhomogenateinTheseresultssuggestthatthepolysaccharideextractedfromPhysalispubescensL.hasgoodantioxidantactivitiesinvitro.Keywords:PhysalispubescensL.;Polysaccharide;Antioxidationproperty苦蘵,别名：蘵、黄蒢(《尔雅》)，小苦耽(

5、《本草拾遗》)，灯笼泡草(《广东医学》祖国医学版(2)：)，响铃草、响泡子(《湖南药物志》)，绿灯、野绿灯(《上海常用中草药》)。茄科酸浆属植物，拉丁名：PhysalispubescensL.以果、根或全草入药，性味苦、寒。功用主治：清热解毒，利尿消肿，消肿散结，凉血止血。现代研究报道，其化学成分为酸浆果红素，即玉蜀黍黄素二棕榈酸酯［1］。但对其多糖的研究国内外未见报道，为深入开发这一丰富自然资源，本实验对其多糖进行了提取、纯化及抗氧化的研究，为苦蘵的中药现代化奠定了一定的理论基础。　1材料与方法试剂与

6、仪器DPPH试剂美国Sigma公司，2-硫代巴比妥酸上海国药集团化学试剂有限公司，其他试剂均为国产分析纯；5810R型冷冻离心机德国Eppendorf公司，723型可见分光光度计山东高密彩虹分析仪器有限公司，RE-52AA型旋转蒸发器上海雅荣生化设备仪器有限公司，BP221S型电子天平德国赛多利斯。多糖的提取及初步分离纯化称取苦蘵鲜果1000g烘干，加一定量的水60W超声min，000r/min离心min，上清液抽滤后浓缩，用醋酸乙酯加热回流1h进行除脂脱色［2］，再用Sevage法［3］去除蛋白得粗多

7、糖。醇沉条件的研究浓缩比将粗多糖溶液浓缩后，分别加入4倍体积95%的乙醇，4℃下醇沉1h。多糖用一定量的蒸馏水溶解后测定含量。温度取3份粗糖溶液分别加入4倍体积的95%乙醇，然后置于-20℃，4℃，室温进行醇沉。溶解后分别测其多糖含量。醇沉比取5份粗糖液分别以1∶1,1∶2，1∶3，1∶4，1∶5比例加入乙醇。在4℃醇沉1h。溶解后测多糖含量。醇沉时间［4］分别选择4，8，12，16，18，20，2h进行多糖含量检测，其他条件均按摸索的最佳条件设置。pH分别选择pH为4，5，6，7，8，9,6个值进行多

8、糖含量检测，其他条件均按摸索的最佳条件设置。体外抗氧化的研究对·OH的抑制作用［5］采用亚铁离子催化过氧化氢产生·OH，由于·OH可特异地使番红褪色，根据褪色程度用比色法来测量·OH的含量。ml体系中包含150mmol/L,pH=的磷酸缓冲溶液，260μg/ml番红花红，/L乙二胺四乙酸二钠(Fe2+﹣EDTA),1%，各浓度糖液。对肝脂质过氧化的抑制［6］过氧化脂质的二级分解产物丙二醛能与硫代巴比妥酸反应生成红色产物，在53nm处有最大吸