医学毕业论文lmo3mrna在小鼠脑发育过程中的表达

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1、鼠脑发育过程中的表达姓名:2014年6月25日LMO3mRNA在小鼠脑发育过程中的表达作者:惠玲,蔡文琴,纪华,吕同德,杨金升,赵治华【关键词】LM03;原位杂交组织化学;小鼠;脑【Abstract】AIM:ToexaminethelocalizationofneuronalspecifictranscriptionfactorLM03mRNAinthedevelopmentofcentralnervoussystem(CNS)ofthemice.METHODS:RealtimefluorescencequantitativeRTPCR(FQRTPCR)andinsituh

2、ybridizationhistochemicalstainingmethodwithdigoxinlabeledcRNAprobewereusedtodetecttheexpressionofLM03mRNA.RESULTS:TheFQRTPCRshowedthattheexpressionofLM03mRNAwasthehighestduringpregnancy,thenitdecreasedsignificantlyafterbirthandalmostremainedthesameleveluntiladult.LMO3mRNAexpressionwasexten

3、siveinbrainatearlyembryonicstages(E10.511.5d),butnotdetectedatotherpartsofembryo.Thehighlevelinbrainwasstillseenovermid(E15.5d)andlate(E17.5P0d)embryonicbrainandshowedlessdifferentsignal.Duringpostnataldevelopment,LM03mRNAwasfoundgraduallyregionalizedandshowedthedifferenceofsignalindiffere

4、ntpartsofbrain.LM03mRNAexpressionofP14P60dwasstillextensivealthoughtheextentwasgraduallymoreregionalthanthatofP7d.ThesignalofLM03mRNAwasmainlylocatedindifferentnucleusclonyandshoweddifferentintensity.CONCLUSION:LM03playsaroleinbraindevelopmentduringembryonicperiodandpostnataldifferentiatio

5、nandspecificationofspecificbrainregions.【Keywords】LM03;insituhybridizationhistochemistry;mice;brain【摘要】目的:研究不同发育时期小鼠脑内LM03的表达.方法:采用以SYBRGreenI为荧光染料的定量RTPCR及以地高辛标记的cRNA为探针的原位杂交组织化学法检测LMO3基因在小鼠脑发育过程中的表达.结果:FQRTPCR结果表明,LMO3在出生前高表达,P7d后表达水平急剧K降,至成年都维持在一个较低的水平.LM03mRNA在小鼠胚胎期E10.5d即有表达,但仅限于整个脑泡组

6、织内,胚体其他区域均为阴性;E11.5d脑区信号逐渐加强,无核团及脑区的特异性,胚体其他部分仍为阴性;E15.5〜POd期LM03阳性信号在儿乎所有观察的脑区均有广泛而较强的着色;P7dLMO3阳性信号较出生前变弱,分布逐渐集屮;P14〜P60dLMO3mRNA表达范围较P7d逐渐缩小,但仍有广泛表达,阳性信号主要集中于不同核团,表达有强弱之分.结论:LMO3基因可能与小鼠出生前脑的发育以及出生后特定脑区神经元的特化及特性维持有关.【关键词】LMO3;原位杂交组织化学;小鼠;脑0引言多巴胺相关转录因子DAT1(GenBank登录号:AF258348)又称LMO3,是我们获得

7、的星形胶质细胞在DA作用下发生反应性变化时上调表达的基因之一[1].LMO家族由4个成员组成,即LMO1〜LMO4.我们以往的研究址实LMO3mRNA在成年大鼠和小鼠的中枢神经系统(CNS)中分布广泛,提示LMO3基因在CNS有重要作用[2].木试验采用实时荧光定量RTPCR方法及原位杂交组织化学的方法对LMO3mRNA在小鼠脑发育过程中的表达变化进行了研宂,以探讨LMO3在神经系统发育中的作用.1材料和方法1.1材料成年昆明种雌雄小鼠由本院实验动物中心提供.于每円18:00按雌雄1:1合笼,次日晨取出,检査雌鼠的

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