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1、Dbn1在小鼠脑发育过程中表达与定位的研究作者:刘建军,蔡文琴,刘运来,秦茂林单位:第三军医大学基础医学部:1神经生物学教研室,2组织与胚胎学教研室,重庆市神经科学研究所,重庆 提 要:目的 探索小鼠发育调节脑蛋白Dbn1在脑发育中的功能,检测在小鼠脑发育不同阶段的表达模式和定位。方法 运用免疫组化和Westernblot方法,检测小鼠脑发育不同阶段(E14,P1和P7d)以及成年(adult),Dbn1蛋白的表达模式和细胞内定位。结果 Westernblot方法检测小鼠各发育阶段全脑的Dbn1蛋白表达模式为:在胚胎14d时即有很高的表达,P1有所降低,P7期又有增加,成年时最低。免
2、疫组化进一步显示:在E14时,Dbn1主要表达在大脑皮层,海马和室管膜区域,阳性信号弥散分布在细胞内;在P1期,Dbn1主要表达在海马,室管膜两侧,阳性信号在细胞内定位趋向于细胞周围及突起;P7期,Dbn1主要表达在大脑皮层,海马和神经元核团,阳性信号在细胞内的定位集中在细胞的突起;在成年2个月期,Dbn1的表达明显减弱,仅少量表达在某些神经核团,细胞内定位不十分明显。结论 在小鼠发育过程中,Dbn1蛋白在脑内的表达为胚胎期最高随后降低,成年后表达甚微;而随着细胞的分化成熟,其在胞内的定位呈现出从细胞质向细胞突起集中的趋势,提示Dbn1在调节神经系统发育中有重要的作用,可能参与神经元的
3、发育和迁移以及神经网络的建立的调节。 关键词:Dbn1;表达;神经系统;发育 中图法分类号:Q344.13;Q343.17 文献标识码:AExpressionandlocalizationofDbn1inthedevelopmentalmousebrainLIUJian-jun1,CAIWen-qin1,LIUYun-lai2,QINMao-lin2(1DepartmentalofNeurobiology,2DepartmentalofHistologyandEmbryology,CollegeofMedicine,ThirdMilitaryMedicalUniversity,
4、Chongqing400038,China) Abstract:Objective Todetecttheexpressionchangesandlocationofthemousedevelopmentalregulationbrainprotein(Dbn1)inthedevelopmentalmousebrain.Methods MonoclonalantibodiesagainstdrebrinproteinwereusedtoassessDbn1byimmunohistochemistryandWesternblo.tThepaternalexpressionofDbn1i
5、ndevelopmentalmousebrain(E14,P1,P7andadult)wasinitiallyinvestigatedbyWesternblo.tDbn1wasshownatvariousdevelopmentalstages(E14,P1andP7)aswellasinadultindifferentbrainareaofdevelopmentalmousebrainbyimmunohistochemica.lResults Dbn1proteinwasdetectedindevelopmentalbrainbutalittleinadultbrainbyWester
6、nblot,highatE14,decreasedatP1,graduallyincreasedatP7andlowestina-dul.tImmunohistochemistryconfirmedasfollows:Dbn1expressedmostlyincortex,hippocampusandependymaareasatE14,andthepositivesignalwasdistributedatcellsborder;TheexpressionofDbn1wasdecreasedatP1,mainlydistributedatthevergeofcellsordendri
7、tes;ThepeakxpressionofDbn1appearedatP7,Dbn1locatedatnucleusofhippocampusandcortex,andthepositivesignallocatedwithincytoplasmanddendrites;OnlyalittlepositiveDbn1cellswerefoundinadultmousebrain.Conclusion Dnb1maybeinvolvedinre