钠尿肽受体a(npr-a)在小鼠眼球发育过程中的表达

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1、EXPRESSIONOFNPR．AINDEVELOPINGEYEOFMOUSEADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineByLidinjuSupervisor：ProfDengJinbo．May,2014关于学位论文独创声明和学术诚信承痞删燮剃本人向河南大学提出硕士学位申请。本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下独立完成

2、的，对所研究的课题有新的见解。据我所知，除文中特别加以说明、标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人．已经发表或撰写过的研究成果，也不包括其他人为获得任何教育、科研机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。在此本人郑重承诺：所呈交的学位论文不存在舞弊作伪行为，文责自负。学位申请人(学位论文作者)签名：201忙歹月f11日关于学位论文著作权使用授权书本人经河南大学审核批准授予硕士学位。作为学位论文的作者，本人完全了解并同意河南大学有关保留、使用学位论文的要求，即河南大学有

3、权向国家图书馆、科研信息机构、数据收集机构和本校图书馆等提供学位论文(纸质文本和电子文本)以供公众检索、查阅。本人授权河南大学出于宣扬、展览学校学术发展和进行学术交流等目的，可以采取影印、缩印、扫描和拷贝等复制手段保存、汇编学位论文(纸质文本和电子文本)。(涉及保密内容的学位论文在解密后适用本授权书)学位获得者(学位论文作者)签名：201学位论文指导教师签名：摘要NPRoA(natriureticpeptidereceptorA，NPR-A)是钠尿肽家族中的重要一员，其本身也是鸟苷酸环化酶耦联受体，通过与钠尿肽结合，升高细胞内cGMP水

4、平来介导钠尿肽的生理学效应。以往对于钠尿肽系统的研究主要集中在心血管系统和中枢神经系统，最近在眼中也发现有大量钠尿肽的表达，并发挥着重要的作用。首先，视网膜作为中枢神经系统的一部分，广泛表达钠尿肽，并且其在神经信号的传递中发挥着重要的作用。其次，在眼中的其它部位，如房水、睫状体等也有广泛的表达，并具有调节眼内压，控制青光眼等疾病的进展功能。但目前对钠尿肽及其受体在眼中的定位及作用仍存在很多争议，尤其是在眼角膜和晶状体内的研究成果十分有限。此外，以往研究总是集中在成年眼球，对胚胎期眼的研究在国内还尚未有系统的文献报道。本实验试图利用免疫组

5、织化学法来检测NPR-A在胚胎期至成年小鼠眼角膜、晶状体和视网膜中的表达，并探讨其在维持眼的发育和视觉形成中的重要意义，从而加深对钠尿肽系统的了解，也为视网膜疾病的治疗提供新的资料!目的：检测NPR-A在各年龄点小鼠角膜、晶状体以及视网膜中的表达，并探讨以下三个方面的内容：①NPR．A在角膜发育，以及对维持角膜上皮细胞修复中的重要意义。②NPR．A在晶状体发育、晶状体上皮细胞的增殖以及晶状体的通透性中的重要调节功能。③NPR．A在视网膜神经元发育及维持Miiller细胞的功能活动中的重要调节作用。方法：本课题应用石蜡切片免疫组织化学染色

6、、墨汁灌流、铺片免疫荧光染色等技术对胚胎期和出生后小鼠角膜、晶状体、视网膜进行形态学观察，并对视网膜NPR．A阳性细胞突起的密度进行测量。结果：1．NPR-A在角膜中的表达在胚胎期，NPR-A开始出现小鼠角膜上皮细胞中，并持续高表达至成年，而角膜基质层的纤维细胞和内皮细胞中的表达随年龄的增长而逐渐减弱。在E16，NPR．A开始表达在角膜上皮细胞中，出生后进一步增强，P14达到高峰，之后持续高表达。另外，NPR．A也于E16在角膜基质和内皮细胞开始表达，P5时NPR-A表达进一步增强，且广泛的分布在成纤维细胞和内皮细胞中。P14之后，NP

7、R-A的表达却显著减少，仅稀疏的分散在纤维细胞和内皮细胞的表面。2．NPR．A在晶状体内的表达从PO开始NPR．A开始高表达在晶状体前囊上皮细胞膜上，随着日龄增加，中部上皮细胞NPR．A表达减弱，至P90，免疫阳性细胞主要集中在赤道附近的上皮细胞膜中。此外，NPR．A也高表达于由后上皮细胞生成的初级纤维中，在E16开始出现，PO，大量表达在初级纤维细胞上。但在P7以后，NPR．A从中心向外周逐渐减少，至P90消失。同时NPR．A阳性纤维细胞形态也发生着改变，P0，纤维细胞围绕前极呈现较大、不规则的多边形结构，P3，周围细胞体逐渐增大、延

8、长成梭形，P7，胞体变狭长呈丝状，并以同心圆结构排列。3．NPR．A在视网膜中的表达NPR—A广泛存在于视网膜神经元中。例如，在外核层，NPR．A于P7开始高表达在视锥、视杆细胞内、外侧突起上，在P14减弱