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1、P38MAPK信号通路与腰椎间盘退变关系的实验分析湛川刘宝帅赵玉龙荣延龙张远石中国医科大学附属第四医院骨科辽宁沈阳110032自然科学基金项目名称:周期性压应力通过Mapk通路影响椎间盘退变的机制的研究项目编号:2013010015—401作者简介:湛川，中国医大四院，东南大学医学院，学士，副教授，副主任医师，骨科副主任【摘要】目的分析探讨P38MAPK信号通路与腰椎间盘退变的关系，为患者的临床治疗提供可供参考的依据.方法选择我院收治腰椎间盘退变患者40例作为木次研究的实验组，收治时间在2013年2月至2014
2、年2月期间，另选择同时期我院收治的40例腰椎骨折患者作为对照组，两组患者均进行免疫组织化学技术定位检测、WesternBlot技术定量检测，分析P38MAPK表达量的灰度值.结果对照组P38MAPK蛋白表达图像的灰度值为(0.8561±0.0274)，实验组中纤维环完整组P38MAPK蛋白表达图像的灰度值为(0.1623±0.0133),纤维环破裂组P38MAPK蛋白表达图像的灰度值为(0.3567±0.0135),三组之间具有明显的统计学差异(P<0.05),对照组的
3、蛋白含量少于纤维环完整组、纤维环破裂组.结论P38MAPK的表达含量和腰椎间盘退变程度呈正比的关系,腰椎间盘退变程度越严重，髓核细胞中的P38MAPK表达含量越高.【关键词】P38MAPK;腰椎间盘退变；关系；分析【中图分类号】R473.7【文献标识码】B【文章编号】1008—(5315(2015)12—0259—02木文为进一步探究P38MAPK信号通路与腰椎间盘退变的关系，特选择了我院收治的40例腰椎间盘退变患者作为实验组,另选择40例腰椎间盘骨折患者作为对照组，现将报告整理完毕，只体陈述如下.1研究资料和
4、方法1.1研究资料选择我院收治腰椎间盘退变患者40例作为木次研究的实验组，收治吋间在2013年2月至2014年2月期间，另选择同时期我院收治的40例腰椎骨折患者作为对照组.实验组患者的年龄范围在29-73岁之间,平均年龄为(41.09±7.52)岁，男性患者数量和女性患者数量的分布比值为24:16,其中有13例III级患者、16例IV级患者及11例V级患者.按照Spengler分型标准，纤维环完整组和纤维环破裂组各占20例.对照组患者的的年龄范围在29—73岁之间，平均年龄为(41.09&plus
5、mn;7.52)岁，男性患者数量和女性患者数量的分布比值为23:17.其中有13例III级患者、17例IV级患者及10例V级患者.纳入标准:实验组和对照组均经CT、X线及MRI检验确诊为腰椎间盘突出症及腰椎骨折患者;均经腰后路手术治疗II疗效欠佳患者;对本次研究S的和方法知情了解者.排除标准:伴有艽他病史、病变患者;血液系统、精神系统异常者;脊柱结核、脊柱肿瘤患者.经确认，实验组和对照组患者的年龄等研究资料无明显差异(P〉0.05)，差异不存在统计学意义，两组的数据资料可用于研究对比中.1.2方法两组患者均进行
6、免疫组织化学技术定位检测、WesternBlot技术定量检测，分析P38MAPK表达量的灰度值.免疫组织化学技术定位检测:将石蜡切片放入至二甲苯脱蜡中脱蜡，梯度洒精水化后，放入浓度为3%的过氧化氢液中孵育，并使用蒸馏水冲洗3分钟.加入枸橼酸盐缓冲液于压力锅中，浸没整张切片,使用人火加热，直至沸腾，进行高温高压组织抗原修复,加热至喷气后，使用自来水冲淋冷却，取出切片，使用PBS冲洗[1].WesternBlot技术定量检测:将标本组织剪切成细小的碎片,并加入15Oul的裂解液，充分裂解后，离心5分钟，收集上清备用
7、,取一块96孔板的板块,并加入2Oul不同样品的蛋白裂解液,用加样枪吹打均匀后，在37摄氏度的环境下放置60分钟[2].1.3观察指标对实验组和对照组患者的P38MAPK蛋白表达图像的灰度值进行观察,P38MAPK蛋白表达图像的灰度值越高，P38蛋白含量越高.1.4数据处理对实验组和对照组患者的P38MAPK蛋白表达图像的灰度值使用SPSS18.0软件进行数据处理，以95%作为可信区间,P38MAPK蛋白表达图像的灰度值使用计量资料表示，采用t检验，若两组数据间的P值小于0.05,代表组间的差异具有统计学意义.
8、2结果本研究统计结果表明，对照组P38MAPK蛋白表达图像的灰度值为(0.8561±0.0274),实验组中纤维环完整组P38MAPK蛋白表达图像的灰度值为(0.1623±0.0133),纤维环破裂组P38MAPK蛋白表达图像的灰度值为(0.3567±0.0135),三组之间的具有明显的统计学差异(P<0.05),对照组的蛋白含量少于纤维环完整
