mmp—12与腰椎间盘退变关系的研究

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1、中国医科大学硕士学位论文MMP—12与腰椎间盘退变关系的研究姓名：李振华申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：谢林20080501●英文缩略语缩略词删P12删PsRT-PCR13——actinmRNA英文全称中文全称Matrixmetalloproteinases12基质金属蛋白酶12Matrixmetal10proteinases基质金属蛋白酶Reversetranscription—polymerase逆转录～聚合酶链反应B—actinB一肌动蛋白messengerRNA(ribonucleicacid)信使RNA，信使核糖核酸8中国医科大学研究生

2、学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名：互!尘±§日期：兰盔：￡：兰中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国

3、医科大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，以采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：互查丛!主指导教师签名：垂跹面生．日期：兰竺[：工：姿-中文结构式摘要·MMP一12与腰椎间盘退变关系的研究刖吾腰椎间盘退变被认为是临床上腰间盘突出症，腰椎管狭窄，慢性下腰痛等疾病的病理基础。椎间盘退变的机制较为复杂，目前研究认为椎间盘退变主

4、要表现在细胞和细胞外基质成分的变化，而后者是椎间盘力学特性丧失的直接原因。总之退变的实质就是椎间盘细胞外基质的降解及基质与细胞粘附功能消退导致的细胞凋亡。基质金属蛋白酶(MMPs)属蛋白水解酶类，是降解细胞外基质(ECM)的关键酶。人类间盘组织的蛋白质成分与相对应软骨基质成分中的蛋白质结构具有相同的N未端，提示MMPs可能在间盘基质退变中发挥作用。然而，删P_12在椎间盘退变中的作用研究尚少，本次实验采用免疫组织化学S-P法和逆转录一聚合酶链式反应(R卜PCR)法检测人腰椎间盘细胞删P一12蛋白表达，研究删P_12与人腰椎间盘退变的关系。实验对象实验所用

5、间盘取自术中(2007年1月至2007年12月在中国医科大学附属第一医院骨科手术治疗患者)，共35例。其中：对照组：无椎间盘突出症手术患者的腰椎间盘5例(胸腰椎骨折前路手术术前经MRI证实无腰椎间盘退行性改变。)退变组：根据术中情况及MRI所示分为：突出型：术中及MRI示纤维环未全破裂，因压力而突出14例脱出型：术中及MRI示纤维环全层破裂，髓核组织未游离10例游离型：术中及MRI示纤维环全层破裂，髓核组织游离6例实验方法分别为对照组、实验组(突出型、脱出型、游离型)，用PBS液代替一抗做阴性对照，分别行取材、固定、包埋、制片，苏木素复染和删P_12的免

6、疫组化染色及常规HE染色，在显微镜下观察阳性细胞表达情况，测量阳性细胞率；用逆转录一聚合酶链式反应(RT_呻CR)法检测肛12基因mRNA转录水平，所有资料采取X2检验及T检验。实验结果HE染色组织学观察在退变间盘中，各标本均表现出一定的退变特征，细胞数量减少，失去原有软骨细胞形态。免疫组织化学S—P法检测椎间盘细胞MMP一12的蛋白表达，在对照组中，多数样本MMP—12阳性细胞率低；在退变问盘中，多数样本MMP一12阳性率较高。MMP一12基因mRNA转录水平在对照组中均较低；退变组中均有较强表达。X2检验及T检验分析证实组间差异有统计学意义(P<0．

7、01)讨论椎间盘退变是引起下腰痛的重要原因之一，椎间盘退变是一个复杂的生理过程，其发生机制尚未完全阐明，椎间盘退变的特征性改变是髓核中蛋白聚糖含量下降及伴随的水分丢失。髓核呈凝胶状，疏松的纤维网架上布满蛋白多糖基质，纤维环主要是胶原成分，软骨终板的细胞为典型的软骨细胞。椎间盘的退变是与年龄相关的自然老化过程，表现在细胞和基质成分的变化，其中基质成分的变化是力学特征丧失的直接原因。椎间盘细胞营养活性降低，影响细胞的代谢和生物合成，基质合成与降解之间的平衡被打破导致椎间盘退变。基质金属蛋白酶(MMPs)是降解细胞外基质(ECM)的关键酶。目前国内外研究结果提

8、示MMP一12在许多生物过程中发挥重要作用，参与正常或病理条件下的组织重塑口21