脑出血患者血肿周围组织t细胞免疫球蛋白黏蛋白分子－3的表达及意义

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1、脑出血患者血肿周围组织T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子一3的表达及意义哈尔滨市呼兰区屮医医院150500摘要：目的：观察脑出血血肿周围组织T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子（TIM）-3的表达，并探讨其在脑出血发病屮的意义。方法：行血肿清除术的脑出血患者48例按发病距手术取材时间分为小于6小时组，6-24小时组，24-72小时组和大于72小时组，每组12例.另选取远离血肿的脑组织12例作为对照组。免疫组织化学染色法检测TIM-3蛋白的表达，RT-PCR法检测TIM-3的表达。结果：与对照组相比，小于6小时组血肿周围组织屮TIM-

2、3的表达无统计学差异。与对照组相比，其他各实验组血肿周围组织屮TIM-3的表达均具有统计学差异24-72小时组血肿周围组织屮TIM-3的表达显著高于其他各实验组RT-PCR法检测血肿周围组织TIM-3的表达表现出相同的趋势。结论：脑出血血肿周围脑组织TIM-3的表达在发病6小时后增高，24-72小时达最高，72小时后降低。TIM-3参与脑出血后的病理过程，可能与炎症反应有关。关键词：脑出血；T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子多种机制参与脑出血后的炎症反应及组织损伤。细胞免疫球蛋白黏蛋白分子TIM-3与多种炎症性疾病的发病有

3、关，本文拟研究脑出血血肿周围组织TIM-3的表达及其意义。1材料与方法1.1实验分组2013年1月至2014年12月我院祌经外科收治的脑出血行血肿清除术患者48例。按发病距手术取血肿旁1厘米左右脑组织时间分为4个实验4组，分别为小于6小时组，大于6小时小于24小时组，大于24小时组且小于72小时组，每组12例。另选取远离血肿的脑组织B例作为对照组。均符合诊断标准。1.2主要试剂RT-PCR试剂盒，湖南晶科生物科技有限公司；PCR引物，上海生工生物工程有限公司；TRIZOL,北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司；SP试剂

4、盒，北京北瑞达医药科技有限公司；DAB显色剂，上海宝曼生物科技冇限公司。1.3取材将每块脑组织分两份，一份以液氮冻存，一份以10%甲醛固定液中固定，石蜡包埋。1.4TIM-3蛋白和mRNA测定免疫组织化学染色检测TIM-3蛋白表达。光镜学检查，细胞形态完整，胞质中棕黄色颗粒状物质为TIM-3;阳性细胞。在高倍镜下随机选取20个视野计数阳性细胞，取其平均值为该样本的阳性细胞数。RT-PCR法检测TIM-3mRNA的表达。1.5统计学方法釆用统计学软件进行单因素方差分析。2结果2.1各组TIM-3；的表达小于6小时组血

5、肿周围组织中TIM-3表达与对照组无统计学差异其他各实验组TIM-3的表达与对照组均具奋统计学差异。大于24小时II小于72小吋组血肿周围组织中TIM-3；的表达显著高于其他各实验组。3讨论脑出血后血肿对周围组织产生明显的压迫，血肿周围组织随之发生一系列变化，凝血酶释放导致各类炎性因子的释放，导致患者细胞的死亡，这些问题都在脑出血后发生，TIM-3可以起到免疫作用，其能附着在各类细胞的表面，对人体的免疫功能进行调节。也冇相关的研究表明，脑出血发生6小吋后，脑周围组织的干扰素的含量会上升，会导致大量细胞因子的分泌，导

6、致大量的脑出血。通过本次的研究，也可以发现，TIM-3可以有效的控制脑出血的量，防止脑出血后对患者的机体产生严重的损伤，而£L还能排除其他的细胞，保护T细胞［1］。脑出血疾病严重后，会导致人体的代谢紊乱，而且还会导致机体免疫防护功能受到损害，患者要接受相砬的营养支持，防止患者治疗中出现营养不良的问题，也促进了患者的预后，提高T细胞增生的效果，维持肠道上皮细胞的完整性。细胞粘附分子都是跨膜糖蛋白，分子结构由三部分组成：①胞外区，肽链的N端部分，带有糖链，负责与配体的识别；②跨膜区，多为一次跨膜；③胞质区，肽链的C端部

7、分，一般较小，或与质膜下的骨架成分直接相连，或与胞内的化学信号分子相连，以活化信号转导途径［2】。多数细胞粘附分子的作用依赖于二价阳离子，如Ca2+，Mg2+。细胞粘附分子的作用机制有三种模式（图11-16）:两相邻细胞表面的同种CAM分子间的相互识别与结合（亲冋性粘附）；两相邻细胞表面的不同种CAM分子间的相互识别与结合（亲异性粘附）；两相邻细胞表面的相同CAM分子借细胞外的连接分子相互识别与结合。本文结果表明，脑出血后患者无论是体液免疫还是细胞免疫均发生不冋程度的改变，表现为辅助性T细胞活性下降，CD4/CD8

8、比值下降，补体C3水平较正常组降低，免疫球蛋A的IgE和IgMI水平较正常对照增高，提示脑出血患者存在急性炎症的过程，是炎症后的免疫反应。一些研究表明，中枢神经系统损伤可导致神经-内分泌-免疫紊乱，皮质醇浓度升高，血清抑制因子和抑制细胞出现，产生免疫抑制效应，影响非特异性免疫系统及特异性免疫系统功能，使免疫功能大大降低。动物实验证实，脑出血后存在炎症反应，且