免疫原和抗血清制备

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1、免疫原和抗血清制备——陈雪丽陈春婉冯慧婷侯纯蓉兰州大学2010级医学检验二班案例一常州狂犬疫苗造假事件该公司2008年生产的4个批次人用狂犬疫苗效价低于国家标准，可能导致疫苗接种后免疫抗体水平低，无法充分发挥疫苗应有的预防保护作用，属于不合格产品。什么是疫苗？抗原？抗体？作用？疫苗病原微生物及其代谢产物预防疾病用于人工主动免疫的生物制剂人工减毒、灭活、利用基因工程等经过特殊处理的抗原Avaccineisabiologicalpreparationthatimprovesimmunitytoaparticulardisease.Avaccinetypicallycontainsanagentth

2、atresemblesadisease-causingmicroorganismandisoftenmadefromweakenedorkilledformsofthemicrobe,itstoxinsoroneofitssurfaceproteins.Theagentstimulatesthebody'simmunesystemtorecognizetheagentasforeign,destroyit,and"remember"it,sothattheimmunesystemcanmoreeasilyrecognizeanddestroyanyofthesemicroorganismsth

3、atitlaterencounters.疫苗的分类传统新型传统新型传统新型类毒素重组抗原疫苗重组载体疫苗DNA疫苗减毒活疫苗灭活疫苗亚单位疫苗合成肽疫苗基因工程疫苗免疫原性强的病原微生物，如伤寒、霍乱等，理化方法灭活人工诱导变异或从自然界中筛选的毒力高度减弱的病原微生物用0.3%-0.4%甲醛处理，丧失毒性的外毒素去除有害成分，保留免疫原性成分，脑膜炎球菌荚膜疫苗将具有免疫原性的多肽抗原或氨基酸序列与适当载体或佐剂结合成的疫苗采用DNA重组技术制备的只含保护性抗原组分的基因工程疫苗将编码病原体免疫原性的基因插入减毒的病毒或细菌，接种到人体将编码抗原的基因转入真核表达载体后注入人体，它需要人体细

4、胞来利用这段基因自己表达抗原疫苗大致可以分为六大类：灭活疫苗，是被彻底杀死的病原，相当于把反动分子枪毙以后曝尸示众，由于是已经死掉的阶级敌人，往往导致革命队伍警惕性不很高，常需要反复刺激；减毒活疫苗，其实就是可以改造好的黑五类后代，经过教育改造，已经减弱或丧失了危害性，进入人体后现身说法介绍反革命分子的长相，并且可以繁殖供长期围观，效果很好，但也存在突然又反叛的危险，所以在筛选确认时耗费时间极长；类毒素疫苗，是处理后的细菌外毒素，相当于阶级敌人的便便经过消毒后给革命群众作为识别特征；亚单位疫苗，是除去其他成分后提取病原体中有效免疫原所得，如多糖类疫苗等，相当于将谋逆贼子砍头后传首九边以供识别；

5、上述种种，均直接来源于病原，真正像照片的，其实是基因重组疫苗和DNA疫苗，它们都是对病原体照相——找到编码免疫原的基因——这段基因相当于底片，在基因重组疫苗中，该基因被插入表达系统——比如把乙肝的HBS抗原基因植入酵母菌当中，酵母菌就是冲片机，表达出的抗原相当于冲印好的照片，经过纯化制成疫苗；DNA疫苗则是将编码抗原的基因转入真核表达载体后注入人体，它需要人体细胞来利用这段基因自己表达抗原------相当于上级只发放底片，得自己冲洗。免疫原疫苗抗原抗原诱导机体产生免疫应答（免疫原性）与免疫应答产物结合（抗原性）疫苗经过特殊处理诱导机体产生免疫应答免疫原诱导机体产生免疫应答抗原半抗原仅具有抗原性

6、疫苗都是免疫原？免疫原都是疫苗？免疫原都是抗原？抗原都是免疫原？疫苗免疫原抗原合格疫苗？安全性有效性专一性可获得性适合大批量生产易保存经济如何制备？疫苗的制造过程，大体上可以分成4部分：1.筛选种毒；2.扩繁病原；3.处理纯化；4.验证批签。如何制备？颗粒性抗原的制备（细胞、细菌、寄生虫等）灭活疫苗细胞抗原（绵羊红细胞）经生理盐水等溶液洗净，配制成一定浓度；细菌抗原纯菌增菌后处理制备菌体(O)抗原置于100℃水浴2-2.5h去除鞭毛(H)抗原；制备H抗原，菌液用0.3%-0.5%甲醛处理；制备细菌毒素抗原，杀菌后用0.5%-1%氯化钙处理。可溶性抗原亚单位疫苗包括：蛋白质、核酸、多糖、脂蛋白等

7、来源：组织和细胞步骤：提取和纯化粗提组织、细胞破碎，取上清组织匀浆：必须为新鲜或低温保存高速组织捣碎机法；研磨法（脑、胰腺）2.细胞破碎：冻融法，缓慢融化，适用于细胞超声破碎法，间歇进行，适用于细胞酶法，不易破坏内含物成分，适用于微生物表面活性剂处理法，多用于细菌提取核酸纯化（以蛋白为例）超速离心法差速离心法分离大小和密度差异较大的颗粒差速离心法原理示意图纯化密度梯度离心法将样品放在惰性介质（梯度