体外培养的人agm区基质细胞表达多种造血生长因子

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1、体外培养的人AGM区基质细胞表达多种造血生长因子.L.编辑。作者：陈惠芹，张绪超，唐新意2，吴北燕，黄绍良【摘要】本研究检测人胚胎主动脉－性腺－中肾（AGM）区基质细胞表达的造血生长因子，为探讨AGM区基质细胞在胚胎造血发生中的作用及其造血支持作用提供基础资料。采用RT-PCR方法在mRNA水平分析IL-6、SCF、Flt3-L、OSM、IL-3、TPO、M-CSF、LIF等因子在人AGM区基质细胞（hAGMS1-S5）的表达情况，应用ELISA法测定IL-6、SCF、Flt3-L在hAGMS1-S5细

2、胞培养上清液中的分泌水平，并将脐血CD34＋细胞与hAGMS1-S5饲养层细胞共培养14天后行造血细胞集落培养以进一步检测人AGM区基质细胞的造血支持作用。结果表明：hAGMS1-S5均表达IL-6、SCF、Flt3-L、OSM等造血生长因子mRNA，不表达IL-3、TPO、M-CSF、LIF等因子mRNA。在hAGMS1-S5细胞培养上清液中可测得分泌的SCF、Flt3-L、IL-6等因子，hAGMS1-S5组间比较各因子水平无显著性差异（P>0.05）。集落培养结果表明，hAGMS1-S5对C

3、FU-GM、BFU-E、CFU-Mix均有不同程度的扩增作用，hAGMS1-S5的造血支持作用组间比较亦显示有显著性差异（P<0.05），其中hAGMS3、S4优于S1、S2及S5。结论：人AGM区基质细胞表达SCF、Flt3-L、IL-6、OSM等多种造血生长因子，这可能与AGM区基质细胞支持造血细胞原始发生和体外维持造血干细胞功能相关。【关键词】主动脉－性腺－中肾区；基质细胞；造血生长因子　　HematopoieticGroanAorta-Gonad-Mesonephros(AGM)-Deri

4、vedStromalCellsinvitro　　　AbstractThisstudyedtoinvestigatethehematopoieticgroanaorta-gonad-mesonephros(AGM)-derivedstromalcellsinvitroinordertoprovidethebasicdataforelucidatingtheroleofAGM-derived-stromalcellsinembryo-hematopoiesisanditshematopoieticsuppo

5、itiveeffect.RT-PCRanaorta-gonad-mesonephros-derivedstromalcells(hAGMS1-S5)atmRNAlevel.IL-6,SCFandFlt3-LlevelsalcellsbyELISAassay.UmbilicalcordbloodCD34＋cellsatopoieticcellsethylcellulosesemisolidmedium.Theresultsshoanaorta-gonad-mesonephros-derivedstroma

6、lcellsS1-S5expressedIL-6,SCF,Flt3-LandOSMmRNA,butdidnotexpressIL-3,TPO,M-CSFandLIFmRNA.InthesupernatantofhAGMS1-S5cells,IL-6,SCFandFlt3-LcouldbedetectedbyELISAassayatdifferentlevels,bilicalcordbloodCD34＋cells,hAGMS1-S5couldsupporttheexpansionofCFU-GM,BFU

7、-E,andCFU-Mix.ThesupportiveeffectsofhAGMS1-S5atopoieticgroanaorta-gonad-mesonephros-derivedstromalcellsprovidedasolidfoundationtoelucidatethemechanismofhematopoiesisandthehematopoieticsupportiveeffectofthesestromalcells.　　Keyesonephros;stromalcell;hemato

8、poieticgroesonephros，AGM）区是哺乳动物胚胎期永久造血（definitivehematopoiesis）的起源部位，该区的造血干细胞（hematopoieticstemcell，HSC）具有向粒系、红系、淋巴系等造血各系分化的能力［1-3］。作为多潜能HSC出现的最早部位，AGM区具有胚胎造血发生发育所需的重要微环境，正成为国际上造血发生、分化机制研究中的热点。本研究首次对体外培养中的人胚胎AGM区基质细胞表达的造血生