热休克蛋白70调节突触融合蛋白1在哮喘中的表达与意义

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1、安徽医科大学硕士学位论文中英文缩略词对照表英文缩写英文全名中文全名APammoniumpersulfate过硫酸铵DABdiaminobenzidine二氨基联苯胺DEPCdiethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯DXMdexamethason地塞米松EBEthidiumbromide溴化乙锭ECFeosinophilchemotacticfactor嗜酸性粒细胞趋化因子ECPEosinophilcationicprotein嗜酸性粒细胞阳离子蛋白ECLenhancedchemiluminescence化学发光增强剂GRGlucocorticoidrece

2、ptor糖皮质激素受体HSP70heatshockprotein70热休克蛋白70ILinterleukin白介素LTleukotriene白三烯OVAovalbumin卵蛋白PAFPlatelet-activatingfactor血小板活化因子PBSPhosphatebuffersaline磷酸盐缓冲液PCRPolymerasechainreaction聚合酶链式反应PMSFphenylmethylsulfonylfluoride苯甲基磺酰氟PVDFpolyvinylidenefluoride氟化聚偏乙烯SDSSodiumdodecylsulfate十二烷基硫酸钠

3、SYX1syntaxin1突触融合蛋白1TEMEDn,n,n’n’-tetramethylethyleneN,n,n’,n’-四甲基乙烯TrisHydroxymethyl-aminomethane三甲羟基氨基甲烷1安徽医科大学硕士学位论文热休克蛋白70调节突触融合蛋白1在哮喘中的表达及意义摘要目的探讨热休克蛋白70（heatshockprotein70,HSP70）、突触融合蛋白1（syntaxin1,SYX1）在哮喘病理生理过程中表达的变化及二者的相互作用；同时探讨地塞米松（Dexamethason，DXM）对哮喘模型大鼠肺组织中HSP70、SYX1表达的影响。方

4、法30只健康Wistar大鼠按随机原则分为对照组，哮喘组，哮喘+地塞米松组，每组10只。通过卵清蛋白（ovalbumin，OVA）致敏、激发建立哮喘大鼠模型，采用免疫组织化学、逆转录PCR及蛋白免疫印迹检测三组间HSP70及SYX1基因和蛋白表达水平，免疫共沉淀技术检测HSP70与SYX1的相互关系。结果1.成功复制大鼠哮喘模型，哮喘组大鼠激发后开始烦躁不安，呼吸急促，腹式呼吸，哮鸣音，腹肌收缩和跌倒。对照组大鼠无明显上述表现，DXM组上述表现轻微。支气管肺组织切片HE染色显示哮喘组大鼠支气管、细支气管上皮下和小血管周围可见明显的炎症细胞浸润，气管上皮结构紊乱，部分

5、脱落，管腔内渗出增加，粘膜及粘膜下可见淋巴细胞，嗜酸性粒细胞为主的大量炎性细胞浸润；对照组大鼠气道粘膜未见明显水肿，粘膜结构完整，偶见少量炎症细胞浸润；地塞米松治疗组肺部炎症改变较哮喘组有所减轻。2.通过免疫组化检测，光镜下见HSP70表达部位主要位于支气管上皮细胞，部分肺泡上皮细胞及炎症细胞，SYX1阳性细胞主要表达于支气管上皮细胞靠近支气管腔的包膜处。3.与对照组比较，哮喘组HSP70及SYX1基因和蛋白表达水平均显著增加，差异有统计学意义（P＜0.05，P＜0.05）；与哮喘组比较，哮喘组+地塞米松组HSP70及2安徽医科大学硕士学位论文SYX1基因与蛋白表达

6、水平均显著降低，差异有统计学意义（P＜0.05，P＜0.05），但与正常对照组比较，差异均无统计学意义（P＞0.05，P＞0.05）。免疫共沉淀结果显示在哮喘大鼠肺组织中HSP70与SYX1存在相互作用。结论HSP70及SYX1在哮喘肺组织中表达水平均显著增高，HSP70通过调节SYX1表达水平及相互作用共同参与哮喘的发病机制，且其表达受地塞米松的抑制，为临床寻找药物干预新的靶点提供了理论依据。关键词热休克蛋白70突触融合蛋白1哮喘地塞米松免疫共沉淀3安徽医科大学硕士学位论文theModulationofHeatShockProtein70ontheExpresso

7、nofSyntaxin1inAsthmaticModelAbstractPurposeToinvestigatetherelationshipbetweenheatshockprotein70(HSP70)andsyntaxin1(SYX1)inbronchopulmarytissuesinasthmaticratmodelanditsclinicalsignificances;toobservetheexpressionofHSP70andSYX1inasthmaticratmodeltreatedwithDXM.MethodsThirtyadultWiste