热休克蛋白70在宫颈癌组织中的表达及意义

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1、热休克蛋白70在宫颈癌组织中的表达及意义热休克蛋白（heatshockprotein,HSP）是一组进化上高度保守的蛋白质,机体细胞在热休克或受到其他外来刺激时诱导HSP产牛，其在许多肿瘤中呈高表达［1-2］。本研究采用免疫组化SP法检测宫颈癌组织中HSP70的表达，从而探讨其与宫颈癌的关系。1对象与方法1.1研究对象选择2008年1月〜2009年1月我院收治的47例宫颈癌患者，均接受手术治疗，留取手术切除标木。术前均未进行放、化疗。同时收集10例正常宫颈组织作为对照组。1.2试剂兔抗人HSP70多克隆抗体、SP免疫组化试剂盒及

2、DAB显色剂均购口北京中杉牛物技术有限公司。1.3免疫组化SP法切片经脱蜡、梯度酒精脱水后，自來水冲洗，蒸懈水冲洗3mine3%甲醇-H2O2中室温孵育20min,蒸懾水冲洗冲洗3min,PBS冲洗5minx2次。HSP70釆用高压热修复。室温冷却,放入PBS内冲洗5minx2次，用山羊血•清封闭，37°C温箱内孵育45min。滴加兔抗人HSP70抗体（一抗）按1:100稀释，对照组用PBS,4°C过夜。PBS冲洗5minx3次，滴加二抗工作液，37°C温箱内孵育30min,PBS冲洗5minx3次。滴加三抗工作液,37°C温箱

3、内孵育30min,PBS冲洗5minx3次，DABM色。苏木素复染，常规梯度酒精脱水，中性树胶封片，显微镜下观察。以已知阳性切片作阳性对照，PBS代替一抗作阴性对照。1.4结果判定阳性染色为胞质和（或）胞核中出现棕黄色颗粒。每张切片至少观察10个高倍视野，计数阳性细胞与肿瘤细胞的百分比：<5%为（-）,5%〜25%为（+）,26%〜50%为（++）,>50%为（+++）,（+）〜（+++）为阳性。1.5统计学方法数据用SPSS10.0软件进行分析，经确切概率法检验，PV0.05农示差异有统计学意义。2结果2.1HSP70的表达4

4、7例宫颈癌中HSP70阳性表达率为74.5%（35/47）,10例正常宫颈组织中HSP70阳性表达率为20.0%（2/10）,经确切概率法检验，差异有高度统计学意义（PV0.01）o2.2HSP70与组织分级的关系47例宫颈癌包括高分化10例，中分化21例，低分化16例，其阳性率见农1。结果显示，宫颈癌分化程度越低，HSP70的表达越强。表1宫颈癌HSP70阳性率与纽织分级的关系［n（%）J2.1HSP70与宫颈癌组织学类型的关系宫颈癌组织分型及HSP70阳性率见表2。经统计学分析，差异无统计学意义(P>0.05)o表2宫颈癌H

5、SP70阳性率与组织学类型的关系[n(%)]3讨论HSP广泛存在于原核和真核生物，在生理条件下，HSP呈基础表达，调控细胞的增殖与分化、胚胎的生长发冇、激素的功能效应等。HSP能调节蛋白质的折叠、传递与降解，在维持组织细胞的口身稳定和环境适应性方ifii也有重要作用。在有害因索如热、冷、缺血、低氧、有机毒物、重金属、微生物、组织创伤、棊因损伤等的刺激下，均可诱导HSP产生，并保护细胞对抗热休克和其他导致人量蛋白质损伤、变性的有害刺激，防止应激所致的蛋白质损伤，进而启动內源性保护机制，发挥抗损伤的应激保护效应。大量研究显示，表达H

6、SP的肿瘤细胞对热休克、射线(如丫射线)、TNF-a等多种刺激诱导的凋亡有抑制作用。肿瘤细胞HSP70表达水平--般较高，赵霞等[3]用HSP70反义寡聚核甘酸阻断Molt-4等肿瘤细胞的内源性HSP70表达，结果发现，HSP70反义寡聚核甘酸的使用可以诱导肿瘤细胞凋亡，同吋抑制肿瘤细胞增殖，提示HSP70的表达有助于肿瘤细胞的生存和增殖。本研究发现，宫颈癌组织HSP70的阳性表达率为74.5%,正常宫颈组织HSP70的阳性表达率为20.0%,与郭云鸿等[4]的报道一致。水研究结果显示，HSP70的表达与宫颈癌细胞的分化程度和组

7、织类型没有明显的相关性，但可以看出，高、中、低分化各白的阳性率差别很大，细胞分化程度越低，HSP70的表达越强，推测HSP70的表达可能与患者的预后有关，HSP70表达越强，患者预后越差。由此可以推断，HSP70的表达可能与宫颈癌的发生、发展及预后有关，检测其表达水平有望作为估计患者预后的指标之一。[参考文献][1]JonesEL,ZhaoMJ,StevensonMA,etal.The70kilodaltonheatshockproteinisaninhibitorofapoptosisinprostatecancer[J].I

8、ntJHyperthermia,2004,20(8):835-849.[2]WangXP,QiuFR,LiuGZ,etal.Correlationbetweenclinicopathologyandexpressionofheatshockprotein70an