浅谈热休克蛋白70，90在口腔鳞癌及癌前病变中的表达及意义

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1、浅谈热休克蛋白70，90在口腔鳞癌及癌前病变中的表达及意义：殷操，沈丽佳，谢思明，谢立群【热休克蛋白；HSP70；HSP90；口腔癌；口腔扁平苔藓【AbstractAIM:Todetecttheexpressionofheatshockprotein70,90(HSP70,HSP90)inoralsquamouscellcarcinoma(OSCC)andoralprecancerouslesionsandinvestigatetherolesofHSP70andHSP90.METHODS:SABCimmunohistochemicalmeth

2、odsaloralmucosa.RESULTS:TherateofthepositiveorhighexpressionofHSP70inOLParkablyhigherthanthoseofnormaloralmucosa,oralleukoplakiaandOSCC（P%26lt;0.05）.Theratesofpositiveorloalmucosaandoralleukoplakia（P%26lt;0.05）.CONCLUSION:BothHSP70andHSP90mayplayaroleinorallichenplanus.HSP90

3、mayberelatedouscellcarcinoma，OSCC）及癌前病变中的表达和功能的探究较少，为此，我们通过检测HSP70及HSP90在OSCC及其癌前病变中的表达，探索HSP70，90在OSCC发生发展过程中的功能.1材料和方法1.1材料1999/2003年本院手术及活检标本94例（患者术前均未采用化疗、放疗），其中正常口腔黏膜（normaloralmucosa，NOM）10例，口腔扁平苔藓（orallichenplanus，OLP）22例，口腔白斑（oralleukoplakia，OLK）20例，OSCC共42例，按照其分化程度分

4、为I级20例，II级12例，III级10例.所有标本均经HE染色，并经口腔病理专家确诊.鼠抗人HSP70mAb（浓缩型）、鼠抗人HSP90mAb（浓缩型）均购自DAKO公司，工作浓度分别为1∶300和1∶200.SABC法试剂盒及DAB显色液均购自DAKO公司.1.2方法常规石蜡连续切片4μm，常规脱蜡、梯度乙醇水化至水，微波修复，自然冷却至室温.采用SABC法免疫组织化学染色，DAB显色3～5min，苏木素复染5min，盐酸乙醇分化数秒，流水返蓝15min，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片.用TBS代替一抗作为空缺对照，已知阳性片作阳性

5、对照.结果在光学显微镜下进行观察.HSP70阳性定位于胞质及胞膜，HSP90阳性定位于胞质，呈黄色或棕黄色颗粒.采用双盲法统计实验结果.随机选取10个高倍视野进行计数，计数阳性细胞所占的百分比，根据阳性细胞的比例分为以下四个等级：%26lt;5%为阴性（-），5%～25%为弱阳性（±），26%～75%为阳性（＋），%26gt;75%为强阳性（）.统计学分析：采用SPSS12.0统计软件包进行统计，因各组指标均为等级资料，故其组间的比较采用非参数秩和检验Kruskal,OLK,OSCC三组间经非参数秩和检验，χ2＝5.058，P＝0.08%26g

6、t;0.05，差异无统计学意义.将这三组合并为非OLP组后和OLP组相比，χ2=12.948，P＝0.000%26lt;0.05，有统计学意义，提示HSP70在OLP中表达上调.OSCC各级相比，χ2＝0.006，P＝0.997%26gt;0.05，差异无统计学意义.2.2HSP90的表达见表1.HSP90在口腔正常黏膜中以阴性表达为主，占70%（7/10）；在OLP组中主要以阳性和弱阳性为主，占73%（16/22）.在OLK组中主要以阴性和弱阳性表达为主（图1C），占70%（14/20）.OSCC组中则以弱阳性和阳性表达为主（图1D），占62

7、%（26/42）.各组间经非参数秩和检验Kruskal和OLK相比，χ2＝1.091，P=0.296%26gt;0.05，差异无统计学意义.OLP和OSCC相比，χ2＝0.747，P＝0.387%26gt;0.05，差异无统计学意义.将OLP和OSCC合并成一组，NOM和OLK合并成另一组后相比，χ2＝9.149,P=0.002%26lt;0.05，提示HSP90在OLP,OSCC组中表达上调.OSCC各级相比，χ2＝7.066，P=0.029%26lt;0.05，以OSCCI级表达较低，提示HSP90和OSCC分化程度有关.3讨论生物细胞在受

8、到各种理化因素刺激后发生应激反应，诱导HSP的合成.HSP广泛存在于原核和真核A：扁平苔藓HSP70；B：口腔鳞癌中HSP70阳性表达；C：口腔白斑H