酢浆草对a―萘异硫氰酸酯所致小鼠肝损伤干预作用

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1、酢浆草对a—萘异硫氰酸酯所致小鼠肝损伤干预作用摘要：目的：对酢浆草活性成分进行提取，探究酢浆草的体外抗氧化作用及对a-萘异硫氰酸酯(ANIT)所致小鼠肝损伤的干预作用，同时研究酢浆草治疗肝损伤的作用机制。方法：50%乙醇90°C、4h提取酢浆草黄酮类活性成分，采用清除DPPH自由基实验，测定ANFT所致小鼠肝损伤后血清肝功能各项指标。结果：酢浆草对DPPH自由基具有清除作用；同时可以提高肝损伤小鼠的血清肝功能各项指标。结论：酢浆草有一定程度的抗氧化性，对ANIT所致小鼠肝损伤有显著性的干预作用。关键词：酢浆草抗氧化a-萘异硫氰酸

2、酯肝功能指标Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2014.01.015【中图分类号】R96【文献标识码】A【文章编号】1671-8801(2014)01-0012-02黄疽肝炎为肝损伤之一，由肝炎病毒引起，这些病毒会损坏肝细胞、肝组织结构，最后导致血液中的结合胆红素等物质升高，导致皮肤、黏膜、巩膜等部位出现发黄症状［1］。1材料与方法1.1材料与试剂。1.1.1材料：酢浆草采自本学校药学院植物园。1.1.2试剂：ALT、AST、ALP、TB匀为（中生北控生物科技有限公司）；其他化学试剂均为国产分析纯。1.1

3、.3仪器与设备：紫外分光光度计；旋转蒸发仪；加热磁力搅拌器；循环水式多用真空泵。1.2方法。1.2.1酢浆草活性成分提取［2］:将酢浆草置于圆底烧瓶中，加入200mL的50%乙醇，90°C加热回流4h后过滤，减压浓缩，用乙醚洗2〜3次，上层溶液滴加约30mL的5%NaHC03溶液，调pH至8〜9，三氯化碳萃取两次，取水层，加入1%盐酸溶液使pH2〜3，得到沉淀静止2h，抽滤干燥。1.2.2DPPH自由基清除实验［3］:100umol/L的DPPH甲醇溶液2mL，分别与酢浆草提取液4mL反应。反应混合液振荡后于室温黑暗处反应半小时

4、，维生素C做阳性对照，在517nm波长处测定吸光度值。DPPH清除率（％）=（1+A样品/A空白）X100%。1.2.3酢浆草干预肝损伤活性研究：ANIJ2g加热溶于100mL色拉油中，除正常组外，其余各组均每只小鼠给予ANIJ100ug/kg,一次性灌胃中毒。实验［4］将小鼠30只随机分成5组，单笼饲养，自由食水饲养3天，从第4天起施加处理因素。其中A、B组灌胃生理盐水，实验C-D组鼠分别灌胃5mg/mL、10mg/mL、15mg/mL酢浆草溶液。在实验动物ANPT中毒48h后，用0.3%异戊巴比妥钠腹腔麻醉处死，将肝组织用冰

5、生理盐水漂洗后，制成10%肝组织匀浆液，测定血清中肝功能各项指标。2结果2.1酢浆草的一般性质。提取物干燥后为粉末，褐色，微溶于水，pH约为2.6。2.2清除DPPH自由基能力。酢浆草及维生素C对DPPH自由基的清除率随着浓度的增加而增强，在浓度为0.8mg/mL时，其清除率几乎接近维生素C，说明酢浆草所含的活性成分的抗氧化能力强。3小鼠血清肝功能指标测定血清中ALT、AST、ALP、TB主要分布在肝细胞中，其升高程度往往与肝脏受损程度一致，从表2中可以清晰看出造模组血清中各指标含量显著增高，说明ANIT造模成功，鼠肝脏遭到损伤

6、。然而加入酢浆草提取物进行干预后，血清中各指标含量显著下降，其中酢浆草高剂量组的各指标含量显著低于中、低剂量组，说明高剂量酢浆草对ANIT造成的肝损伤有很好的保护作用。4讨论脂质过氧化反应是机体内不饱和脂肪酸在某些酶类作用下产生的自由基含量变化可近似反映组织中脂质过氧化程度及肝损伤程度［5］。本实验证明酢浆草提取物对自由基的清除率随着浓度升高而增强，可以有效起到抗氧化作用。本实验用ANIT对鼠肝损伤造模成功，使小鼠出现活动减少，耳背、尾皮肤、巩膜黄染等症状。酢浆草可以提高肝损伤小鼠血清中ALT、AST、ALP、TB等，保护肝脏避

7、免受损。参考文献［1］马瑞红.中西医结合治疗急性黄疽肝炎的疗效［J］.求医部药下半年月刊，2012，10(7)：584-585［2］俞兆腾.龙胆中黄酮化合物含量测定［J］.黑龙江医药，2006，19(6)：430-431[3]Po-JungChen,FuuShen,Wan-Ting,&Min-ShengSu.Effectofmolecularweightofchitosansontheirantioxidativeactivitiesinapplejuice[J].FoodChemistry，102，1192-1198［4］熊益

8、群，朱慧敏，张赤志，姚小萍，李之清，马小军，驾劲松.消黄散对实验性小鼠黄疽的影响［JL中西医结合肝病杂志，2001，11(3)：154-156［5］李桃园，王昕，赵旋，李丹，王淑梅，章国良.柚皮素对四氯化碳致小鼠化学性肝损伤中氧化应激介质生成影响的实验研究［J］