超临界二氧化碳萃取丹酚酸b的提取工艺研究

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1、超临界二氧化碳萃取丹酚酸B的提取工艺研究金承怀 罗杰英 袁洪 谭鸿毅 刘畅 黄志军 阳国平【摘要】目的研究超临界CO2中加入非离子表面活性剂的多元醇混合体系萃取丹酚酸B的新工艺。方法以丹酚酸B的提取率为指标,采用正交实验法进行丹参提取工艺的优选,采用HPLC法测定其含量。结果超临界CO2萃取中加入非离子表面活性剂的多元醇混合体系可大大提高丹酚酸B的提取率。在本实验条件下,丹参的超临界萃取最佳工艺为:夹带剂选择10%乙醇+5%吐温-80,用量与药材相等,萃取温度55℃,压力30MPa,萃取时间1.5h。结论加入非离子表面活性剂的多元醇混合体系比只用乙醇作夹带剂进行超临界

2、CO2提取丹酚酸B的效率高约6倍。【关键词】超临界CO2萃取;丹参;丹酚酸B;非离子表面活性剂  Abstract:ObjectiveTostudytheneixedextractionsystemofsupercriticalCO2addingnonionicsurfactant.MethodsSalvianolicacidBarkerponentanddeterminedbyHPLCtooptimizetheextractprocessofSalviamiltiorrhizabyorthogonaltest.ResultsSupercriticalCO2addin

3、gnonionicsurfactantmixedsystemofthepolyolcouldsignificantlyenhanceextractionrateofSalvianolicacidB.Theoptimumsupercriticalfluidextractionperatureat55℃,andextractingtime1.5h.ConclusionAddingnonionicsurfactantmixedsystemofthepolyolisaboutsixtimeshigherthanthatjustethanolasentrainmentagent

4、forsupercriticalCO2extractionSalvianolicacidB.  Keyiltiorrhiza;SalvianolicacidB;Nonionicsurfactant  丹参为唇形科鼠尾草属多年生草本植物丹参SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根及根茎,具有祛淤止痛、活血通经、清心除烦的作用〔1〕。丹酚酸B是丹参水溶性的主要活性成分,在药材中的含量高达3%以上,具有很强的抗脂质过氧化和清除自由基等作用〔2〕。丹酚酸B在传统的提取方法中由于长时间加热损失较多,所以建立一种能减少丹酚酸B在提取过程中损失的新方法势在必行。丹酚酸B

5、极性比较强,直接用超临界CO2萃取效果不好,用超临界CO2流体萃取中药时需用到夹带剂,以提高中药有效成分的提取率,但对于许多中药有效成分如生物碱类、蛋白质、酚酸类等大分子水溶性物质都较难提取。因此如何增加超临界CO2流体的溶解度,扩大其在中药方面的应用成为当务之急。Johnston等〔3〕提出加入表面活性剂和水,在超临界CO2中形成反相微乳,使极性物质能溶于其中,开创了极性物质萃取的新途径。但从产品实际开发的角度,作为食品添加剂的泊洛沙姆、吐温、司盘类表面活性剂价格低廉,毒副作用很小,在夹带剂中加入这些非离子表面活性剂形成的多元醇混合体系来考察丹酚酸B的提取率,以扩大

6、超临界CO2萃取的应用范围〔4〕。本实验以丹酚酸B的提取率为指标对新提取工艺进行研究。  1材料与仪器  1.1药品和试剂  丹酚酸B(批号:02/071218,纯度大于99%)购自上海诗丹德生物技术有限公司。丹参药材购于湖南省药材公司,产地安徽,本品经干燥后粉碎,过20目筛,经过超临界CO2萃取丹参脂溶性成分后的萃取物用于本次实验。甲醇、乙腈(色谱纯,Tedia公司),其余试剂均为分析纯,实验用水为二次蒸馏水(自制)。  1.2仪器  高效液相色谱仪,岛津LC-20A高效液相色谱仪,SPD-20A紫外检测器,LCsolution工作站;超临界萃取设备,HA231-5

7、0-06型超临界流体萃取器(江苏南通华安超临界萃取有限公司);AL204精密电子天平(METTLERTOLEDO);高速离心机。  2方法与结果  2.1丹酚酸B的测定〔5〕  2.1.1色谱条件  色谱柱ultimateXB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇∶乙腈∶甲酸∶水(29∶9∶1∶61),流速为1ml/min,柱温为室温,检测波长286nm。丹酚酸B的保留时间为14.3min,不受其它成分的干扰,理论塔板数以丹酚酸B峰计算应不低于3000。色谱图见图1~2。  2.1.2线性关系考察  精密称取丹酚酸B对照品4.6m

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