升降散治疗内毒素发热的实验研究论文

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1、升降散治疗内毒素发热的实验研究论文【摘要】目的研究升降散对内毒素发热的影响。方法采用大肠杆菌内毒素复制家兔毒素发热模型,设立正常对照组、模型组、白虎组、布络芬组,升降组,观察各组症状及体温变化,白细胞介素-8(IL-8),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等指标变化。结果升降组症状表现较轻,降温效果平稳;升降组、白虎组、布络芬组家兔的血清IL-8和TNF-α含量较模型组显著降低(P<0.05~0.01)。结论升降散对内毒素发热具有良好的治疗作用。【关键词】升降散内毒素发热实验研究升降散一方,出自清代温病学家杨栗

2、山的《伤寒瘟疫条辨》[1]:“瘟病总计十五方…….freell溶液,4℃冰箱冷藏,用前置40℃温水温浴20min[3]。IL-8和TNF-α酶免试剂盒(由深圳晶美生物工程公司进口批号:20060218和20060205)。1.3仪器MK3型号IL-8和TNF-α酶标仪(热电上海有限公司),CELLTAC型号白细胞计数仪(日本NIHONKOHDEN公司),Biofuqe.stratos型高速液晶离心机(德国),DT系列电子天平(美国双杰兄弟集团有限公司),715型半导体数字肛温计(上海医用仪器厂),XE-21

3、00全自动血液分析仪(Sysmex公司)。1.4药物制备白虎汤:石膏30g,粳米15g,知母15g,甘草9g,水煎浓缩至每毫升含生药1g。升降散:僵蚕9g,蝉衣6g,姜黄6g,大黄6g,水煎浓缩至每毫升含生药1g。饮片均购自广西中医学院第一附属医院中药房。布络芬缓释胶囊(每粒300mg,批号:060101),300mg稀释于150mg蒸馏水中制成浓度2mg/ml的溶液,购自广西中医学院第一附属医院西药房。中药煎剂和布络芬稀释液分别经过高压灭菌后贮于置4℃冰箱内备用,用前置30℃温水温浴20min。2方法2.

4、1动物分组与造模健康家兔共40只,随机分为5组:正常对照组、模型组、布络芬组、白虎组、升降组,每组8只,每笼2只分开饲养。实验用兔实验前1周抽取血液,经检测比较后筛选出5组无差异性动物方可进行造模;并1次/d测直肠肛温,连续7d,以平均值作为基础肛温[4]。抽血1周后,除正常对照组外,余组均在室温条件,动物自然清醒的状态下,由家兔的耳缘静脉注入大肠杆菌内毒素液每次1ml/kg[3](攻毒),正常对照组则注入等剂量无菌生理盐水1次,全部过程均无菌操作。2.2给药方法实验动物与人临床用药换算按文献[5]进行换算

5、。白虎组灌胃药物10ml/kg;升降组灌胃5ml/kg;布络芬组灌胃14ml/kg;模型组、正常对照组灌胃生理盐水15ml/kg,在攻毒前2h和攻毒后立即,两次灌服完。2.3观察指标①平均发热曲线;②白细胞及中性粒细胞含量观察;③血清IL-8和TNF-α含量观察。体温观察采用电子肛温计测量动物直肠温度,每30min记录1次,白细胞及中性粒细胞含量的测定,于实验造模3h后由清醒家兔的耳缘静脉用2ml注射器连接5号针头采血1ml,置于普通试管中,用XE-2100全自动血液分析仪测量;血清IL-8和TNF-α的测

6、量,也于实验造模3h后由清醒家兔的耳缘静脉用2ml注射器连接5号针头采血1ml,置于普通试管中,4℃,3000r/min,离心15min,取上清液按IL-8和TNF-α酶免试剂盒说明严格操作。3结果3.1对平均发热曲线的影响见图1。模型组、治疗组在注射大肠杆菌内毒素后随即出现发热。每隔30min测肛温1次。模型组高热持续2h,然后开始下降。在造模后30min白虎组肛温较其他两组升高快,在1h时达到最高值,然后开始下降,上升和下降幅度都比较大。布络芬组在造模后30min达到最高值,然后平稳降温。升降组降温效果

7、好,布络芬组次之,白虎组第3。升降组在攻毒1h后肛温达到最高值,然后平稳降温。治疗组在造模3h后肛温降至正常范围。模型组肛温仍未回到正常值。3.2白细胞及中性粒细胞含量观察结果见表1。实验结果显示,攻毒3h后,模型组白细胞、中性粒细胞均高于正常对照组,经统计学处理差异极显著(P<0.01)。布络芬组、白虎组及升降组的白细胞、中性粒细胞模型组均有下降,与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。布络芬组效果最好,白虎组次之,升降组第3。3.3血清IL-8和TNF-α含量观察结果见表2。实验结果显示,模型

8、组的血清IL-8和TNF-α含量显著增加,经统计学处理差异极显著(P<0.01)。治疗组各组含量均有降低,与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。且升降组的疗效最好,白虎组次之,布络芬组第3。表1各组家兔造模后3h白细胞、中性粒细胞结果比较(略)表2各组动物血清IL-8和TNF-α含量比较(略)4讨论升降散作为温病的“总方”,在临床广泛运用,主要用于瘟疫、温病等急性传染病或感染性疾病的治疗。由本实验可观

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