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1、兔颈静脉动脉化后血管的重塑机制陶登顺，王辉山，汪曾炜，朱洪玉，高文根，王建生，杨丽君【关键词】静脉移植；细胞凋亡；模型,动物 Mechanismofvascularremodelingafterrabbitjugularveingraftarterialization 【Abstract】AIM:Toestablisharabbitmodelofcarotidarterialvenousbridgebypassgraftandobservethepathologicalchangeoftheveinbridgeatdifferentphases,to
2、detecttheexpressionsofPAandαactin,cellapoptosis,andtoinvestigatethemechanismofveingraftremodeling.METHODS:Themoncarotidarteryandexternaljugularveinof30rabbitsosedsidebyside,sothatarterialbloodepointsafteroperationaandmedia,andobservedintheexpressionsofPAandαactinandcellapoptosis.
3、RESULTS:Allrabbitssurvived.Theveinbridgekeptsmooth.Theintimaandmediaproliferatedobviously.Theaproliferatedunequally,tothepeakin24aandmedia,a.Cellapoptosisoccurred1aandmediaandpeakeduntil4ainlyinintima.Proliferationofsmoothmusclecellsinmediaandtheirmigrationintointima,cellapoptosi
4、smayallparticipateinveingraftremodeling. 【Keyodels,animal 【摘要】目的：建立兔颈动脉静脉桥旁路移植模型，观察不同时期静脉桥病理改变及PA，αactin表达和检测细胞凋亡，探讨移植静脉重塑机制.方法：家兔30只，将一侧颈总动脉与颈外静脉分别游离后，行颈总动脉与颈外静脉侧侧吻合，结扎颈外静脉两吻合口外侧及颈总动脉吻合口中部，使动脉血经颈外静脉桥通过，于术后不同时间段取静脉桥行HE及弹力纤维染色，定量分析血管壁内膜、中膜厚度，观察PA，αactin表达和细胞凋亡情况.结果：30只家兔全部存活，静脉桥
5、全部保持通畅；病理所见静脉桥血管壁增厚、血管内膜及中膜均明显增生，术后2~4g/kg），仰卧位固定于手术台.术前iv青霉素30kU/kg.随机分为6组，每组6只，其中5组为实验组,1组为对照组.实验组在麻醉状态下分别于术后3d,1,2,4,8，切开皮肤及皮下结缔组织，首先在胸骨乳突肌内缘，分离胸骨舌骨肌与胸骨甲状肌之间的结缔组织，沿肌缝即找到颈总动脉，钝性游离，顺血管神经束内神经和血管的行走方向分离出颈总动脉，长约2.5cm，在动脉下面引过2根丝线，轻轻提起显露颈总动脉；然后在颈部皮下胸骨乳突肌外缘寻找到颈外静脉，沿血管走行方向，将颈外静脉周围的结缔组织
6、轻轻分离，上至上颌外静脉与上颌内静脉分叉处，下至胸骨水平，结扎各分支，游离颈外静脉长约2.5cm，在静脉下面引过2根丝线，轻轻提起，在胸骨乳突肌前与颈总动脉平行并拢.静脉注射肝素钠（1mg/kg），全身部分肝素化，将静脉远近两端结扎，动脉远近两端置无创血管夹，将动静脉平行并拢，两端血管对应处分别切长约3mm纵切口，用80Prolene线连续缝合，行动静脉侧侧吻合，吻合好后排气，恢复血流，然后将动脉两吻合口中部结扎，使动脉血流自静脉桥通过，确定血流通畅，彻底止血后缝合颈部切口.实验动物麻醉恢复后送动物实验中心饲养.肌肉注射青霉素（30kU/kg）预防感染，
7、连续3d.于术后3d,1,2,4,8切片，常规脱蜡至水，行HE染色和弹力纤维染色，光镜下观察移植后内膜的动态变化.日本产LuzexF显微图像分析系统分析血管壁内膜及中膜厚度. 1.2.1免疫组化染色标本经石蜡包埋后切片，片厚5μm，常规脱蜡至水，以αactin（稀释度1∶200，美国Dako公司），PA（稀释度1∶100，美国Dako公司）单克隆抗体常规SABC染色（博士德公司试剂盒），苏木精复染.每个标本随机选取4个部位，计算每个高倍镜视野下PA阳性细胞及细胞总数，取平均数计算细胞增殖指数.细胞增殖指数（%）=PA阳性细胞数/细胞总数×100. 1
8、.2.2凋亡细胞的检测标本经石蜡包埋后切片，片厚5μm，常规脱蜡至水，以TUNE
