干燥综合征患者唇腺p53及pcna表达与其发生非霍奇金淋巴瘤的相关性研究

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1、干燥综合征患者唇腺p53及PCNA表达与其发生非霍奇金淋巴瘤的相关性研究作者：莫汉有，周润华，王晓桃，莫东华，陈蓓莉，朱珊珊【摘要】目的探讨p53及增殖细胞核抗原（PA）在原发干燥综合征(pSS)并发非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者唇腺中的表达及意义。方法利用免疫组织化学方法分别检测正常人群、pSS、pSS并发NHL、NHL患者的p53及PA表达。结果正常人群、pSS、pSS并发NHL、NHL患者的p53表达阳性率分别为5.26%，15.5%，90.90%和92.30%。PA表达阳性率分别为13.15%，27.80%，100.00

2、%，96.15%。p53及PA表达阳性率在pSS并发NHL、NHL患者明显高于正常人群、pSS患者(P<0.01)，其强度亦明显增高。结论p53及PA与pSS患者并发NHL的发生发展有关，可用于pSS患者并发NHL的潜能及预后评价。如pSS患者p53及PA表达阳性率升高，应积极予应用免疫抑制剂治疗。【关键词】干燥综合征；淋巴瘤，非霍奇金；p53；增殖细胞核抗原；唇腺　　Abstract:ObjectiveTooutlinethesignificanceofP53andproliferatingcellnuclearant

3、igen(PA)expressionsinlabialglandinpatientsarySjogren’ssyndrome(pSS)associatedphoma(NHL).MethodsAnimmunohistochemicalmethodplesfromnormalsubjects，patientsalsubjects，patientsalsubjectsandpatientsentofNHLinpatientsmunosuppressantactively.　　Keye；Non-Hodgkin’sLymphoma；P5

4、3protEin；proliferatingcellnuclearantigen；labialgland　　原发干燥综合征（primarySjogren’ssyndrome，pSS）是一种由淋巴细胞介导的主要累及外分泌腺的全身性自身免疫性疾病，其特征性病理改变为唾液腺和泪腺等外分泌腺组织淋巴细胞浸润，腺体组织进行性破坏，致使腺体功能减退或丧失［1］。pSS与肿瘤的关系较为密切，尤其非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’slymphoma，NHL)多见。与性别、年龄相匹配的正常人群比较，其发生NHL的相对危险率为正常人群的44

5、倍［2］。而其并发NHL的发病机理目前还不十分清楚，本组采用免疫组织化学染色技术检测pSS患者唇腺组织中p53及增殖细胞核抗原(PA)表达水平，以期初步探讨pSS患者高发NHL的发病机理。　　1资料与方法　　1.1临床资料2002年以前病例按照1992年制定的pSS欧洲诊断标准，2002年以后病例按照2002年修订的pSS国际分类标准［3，4］。选择经我院风湿科、口腔科、眼科、病理科1997年1月～2005年7月间确诊的241例pSS患者的唇腺活检标本，术前均未接受激素及免疫抑制剂治疗。本组男72例，女169例，年龄35～81

6、岁，平均52岁。并发NHL11例中，男5例，女6例，年龄46～72岁，平均60岁；分类为边缘区淋巴瘤3例，滤泡性淋巴瘤3例，弥漫性大B细胞淋巴瘤2例，套细胞淋巴瘤1例，间变性大细胞淋巴瘤1例，血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤1例。正常人群选择我院既往下唇外伤标本8例，另外30例为有口干症状但唇腺病理正常、血清学阴性者标本。NHL患者选用既往确诊患者石蜡切片共52例，其中边缘区淋巴瘤7例，滤泡性淋巴瘤21例，弥漫性大B细胞淋巴瘤12例，套细胞淋巴瘤6例，间变性大细胞淋巴瘤3例，血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤2例，结外NK/T细胞淋巴瘤

7、1例。标本均经40%的甲醛固定，石蜡包埋，连续切片，厚5μm。　　1.2实验方法　　1.2.1p53检测采用SABC法，试剂盒购自博士德生物工程公司，p53单克隆抗体为丹麦DAKO公司产品，稀释度1∶50。以PBS替代一抗作为阴性对照，光镜下阳性反应为细胞核着棕黄色，着色浅者为（+），着色深者为（++），不着色者为（-）。　　1.2.2PA检测采用免疫组化法，PA抗体为DAKO公司产品，稀释度1∶100。室温下孵育1h，采用3-氨-9，2基咔唑（AEC）进行显色反应，所有标本免疫反应及显色反应在同一时间，同一条件下进行。细胞核

8、出现棕黄色颗粒者为阳性，阳性细胞数<25%为（+），25%～50%为（++），51%～75%为（+++），>75%为（++++）。　　1.3统计学处理用SPSS11.5软件进行统计分析，实验数据用x±s表示。计量资料组间比较采用独立样本t检验或t′检验，两个变量相