非霍奇金淋巴瘤中p53基因突变情况研究

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果非霍奇金淋巴瘤中p53基因突变情况研究【摘要】目的探讨非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin′sLymphoma，NHL)中p53基因第5～8外显子突变情况。方法采用PCR-SSCP法对47例NHL进行p53基因第5～8外显子的点突变研究。结果p53基因第5～8外显子总突变率为%(23/47)。其中第6外显子的突变率最高为%，其次为第8外显子，突变率为%；高度恶性组和低度恶性组突变率

2、分别为%、%；T细胞和B细胞突变率分别为%、%(P>)。结论NHL中存在较高p53基因突变率，提示其突变可能参与了NHL的发生发展。高度恶性组p53基因突变倾向于高发。【关键词】非霍奇金淋巴瘤；基因，p53；突变Abstract:ObjectiveToinvestigatetheroleofp5genemutation(exons～8)inNon-Hodgkin’sLymphoma(NHL).MethodsAPCR-SSCPmethodwasusedtodetectthefrequenceofp5pointmuta

3、tioninexonstoinpatientswithNHL.ResultsMutationrateofp5exons～%(23/47).Exonwasfoundwiththehighestmutationrateof%，exonwiththesecondrateof%.Themutationrateinhighgradegroupandlowgradegroup%(12/24)%(8/23)，respectively(P>)；themutationrateinT-cellandB-cellderivedcases

4、%(11/28)%课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果(9/19)，respectively(P>).ConclusionHighmutationrateofp5geneispresentinNHL，whichindicatesthatp5genemutationmightplayaroleinpathoge

5、nesisandprogressionofNHL.　　Keywords:Non-Hodgkin’sLymphoma；genes，p53；mutation非霍奇金淋巴瘤是淋巴造血系统中一种常见的恶性肿瘤，约占所有淋巴瘤的80%～90%［1］。我国NHL约占恶性肿瘤的3%～4%，为恶性肿瘤第8位［2］。p53基因是目前发现与人类肿瘤相关性最高的抑癌基因［3］，在细胞修复、生长与凋亡的调控中起着重要的作用。NHL的发生和发展过程中涉及染色体易位、体细胞突变、基因扩增和基因缺失等多步遗传学改变。在不同阶段这些改变可引起癌基

6、因的激活和抑癌基因的失活。故在NHL中深入研究p53基因是有必要的。1材料与方法标本标本取自1998～XX年遵义医学院附属医院及贵州省人民医院病理科的各型NHL存档材料47例，所有病例均根据XX年WHO［4］淋巴造血组织肿瘤分类，形态学及免疫组织化学切片复习确诊。其中T细胞性肿瘤28例，B细胞性肿瘤19例。取反应性增生性淋巴结组织作为对照。标本均用4%甲醛固定、石蜡包埋。课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具

7、有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果石蜡组织DNA提取提取DNA主要试剂购于上海生工生物技术有限公司。组织块大且坏死少者常规脱蜡后采用常规蛋白酶K消化，酚—氯仿—异戊醇抽提，盐沉淀法提取石蜡组织DNA，反之用粗提法：常规脱蜡后加入裂解液和蛋白酶K，55℃过夜，待组织溶解后灭活蛋白酶K，吸上清液做PCR模板。核酸测定仪上测定DNA浓度及比值A260/A280，比值p53基因突变分析引物p53第5～8外显子DNA引物序列由上海生物工程技术有限公司合成。引物

8、序列，见表1。表1p53基因5～8外显子引物序列及所扩增的DNA的长度注，P1：指正向；P2：指反向聚合酶链反应检测PCR扩增相关试剂：Taq酶(B0089)、dNTP(D0056)、10×PCRBuffer、MgCl2(0403)购于上海生工生物技术有限公司。PCR反应体系为50μl，其中10×Bufferμl、/LMgCl2、200μmol/LdNTPs