肾综合征出血热患者血小板内游离钙离子浓度的变化

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1、肾综合征出血热患者血小板内游离钙离子浓度的变化作者：赵千子，刘正稳，韩群英，高麦仓【关键词】细胞内游离钙离子摘要：目的探讨肾综合征出血热(HFRS)患者血小板内游离钙离子浓度([Ca2+]i)与疾病的相关性。方法用流式细胞仪检测细胞中Fluo3的荧光强度，对42例确诊的HFRS患者血小板内[Ca2+]i进行测定，并以30例正常人作为对照。结果检测显示，多尿期HFRS患者的[Ca2+]i显著高于正常对照组(P<0.01)，而发热期、少尿期及恢复期的[Ca2+]i与对照组之间无统计学差异(P>0.05)。结论HFRS发病过程中有

2、多种因素可以活化血小板，多尿期患者的血小板处于活化状态，而发热期和少尿期患者的血小板可能由于各种原因的功能缺陷导致其[Ca2+]i并不升高。　　关键词：肾综合征出血热；血小板；细胞内游离钙离子　　Studyontheplateletintracellularfreecalciumconcentration　ofpatientsorrhagicfevere　　ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetherelationshipbetorrhagicfevere(HFRS)andintracellularfreeca

3、lciumconcentration([Ca2+]i)ofplatelets.MethodsFluorescenceofFluo3easuredinplateletsof42patientsetry.ResultsPlatelet[Ca2+]iofpatientsthatofthecontrolgroup(P>0.05).ConclusionPlateletsfrompatientsatthepolyuricphasearehighlyactivated,possiblyinresponsetomanyfactorsinthepr

4、ogressofthedisease.Thereisnosignificantdifferencebet　　肾综合征出血热(hemorrhagicfevere,HFRS)是各种病毒性出血热中分布最广、发病数量最多、危害最大的一种急性传染病[1]。临床以发热、出血、肾脏功能损害为主要特征。出血见于HFRS整个病程，其程度轻重不一。引起HFRS患者出血的原因复杂多样，血小板减少及功能障碍是公认的原因之一。钙离子对血小板发挥正常生理功能起重要作用，阐明HFRS患者血小板功能状态及其[Ca2+]i变化的机制对HFRS发病机理的深入理解和新的有针

5、对性的治疗方法的设计具有重要意义。因此，我们对HFRS患者血小板[Ca2+]i进行了检测并分析其与疾病的相关性。　　1材料与方法　　1.1材料病例为2004年12月至2005年6月本院及西安市第八医院住院患者42例，有典型的HFRS临床症状和体征，均经HFRS特异性IgM抗体检测阳性而确诊。其中男32例，女10例，年龄18-65岁，平均(44.0±12.8)岁。临床分型危重型15例，重型12例，中型8例，轻型7例。对照组为正常健康人30例，其中男25例，女5例，年龄19-50岁，平均(33.8±7.6)岁。Fluo3AM(美国Bioti

6、um公司)用二甲亚砜配成0.5mmol/L，置-20℃冰箱保存。　　1.2方法空腹采肘静脉血1mL，用EDTA抗凝，以800r/min的速度离心10min，取富血小板血浆200μL装入试管，加入Fluo3使其终浓度为4μmol/L。37℃孵育30min后用PBS稀释50倍，然后用流式细胞仪(FACSCalibur，美国BD公司)检测10000个血小板的荧光强度。在1mmol/LCaCl2存在的情况下加入TritonX100测定最大荧光值Fmax，加入20mmol/LEGTA测定最小荧光值Fmin。细胞内钙离子浓度计算公式为：[Ca2+]

7、i=Kd(F-Fmin)/(Fmax-F)nmol/L(Kd为Fluo3与Ca2+反应的解离常数，Kd=450nmol/L)[23]。　　1.3数据统计分析实验结果以均数±标准差表示，以t检验和方差分析进行统计学处理，P<0.05表明差异有统计学意义。用SPSS12.0统计分析系统完成处理过程。　　2结果　　检测结果显示，HFRS患者多尿期血小板[Ca2+]i与正常对照组之间有显著性差异(P<0.01)，而发热期、少尿期和恢复期血小板[Ca2+]i与正常对照组无显著性差异(P>0.05)。HFRS各期血小板[Ca2+]

8、i之间没有显著性差异(P>0.05)。HFRS患者多尿期和正常对照组血小板[Ca2+]i的Fluo3荧光强度流式细胞仪检测结果见图1、图2。HFRS患者发热期、少尿期、多尿期和恢复期血小板[Ca2+]