胸水淋巴细胞微核率检测在良、恶性胸腔积液鉴别诊断中的意义论文

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1、胸水淋巴细胞微核率检测在良、恶性胸腔积液鉴别诊断中的意义论文.freelicronuclei;pleuraleffusion;chromosomes，hu-man;chromosomeaberrationsAbstract:AIMToinvestigatethesignificanceofpleuralfluidlymphocytemicronucleifrequency（PFLMNF）fordiag-nosisofmalignantpleuraleffusionandbenignpleuraleffu┐sion.METHODSThem

2、odifiedcytokinesis-blockedmi-cronucleus（CB-MN）techniqueinepe-ripheralbloodlymphocytemicronucleifrequency（PBLMNF）andmitomycinC（MMC）-inducedPBLMNFin20casesalignantpleuraleffu-sionand20healthcontrols.freeletime.RESULTSTherealignanteffusiongroupuchhigherthanthatofthebenignef

3、fusiongrouporthecontrolgroup（P0.01）.Hoalig-nanteffusiongroupple，fast，practicalmethod，canbeusedtore-placethePBLMNFtest.Itisapracticaldiagnosticmethodformalignantpleuraleffusionandbenignpleuraleffusion.0引言胸腔积液常规方法多能定性诊断，但仍有部分难区分良、恶性.胸膜活检虽可信，但有创伤、阳性率低.为此人们尝试胸水细胞染色体畸变率、p53突变

4、作为辅助诊断指标［1-5］，但需专门培训.微核检测简便、快速，是染色体损伤和染色体畸变的可靠替代指标.近些年研究发现多种肿瘤患者外周血淋巴细胞微核率（PBLMNF）及脱落细胞微核率增高［6-9］，肿瘤患者诱发微核率增加显著高于正常人，表明肿瘤患者染色体稳定性差［10，11］.提示PBLMNF是潜在的肿瘤诊断的辅助指标.我们采用改良的Fenech［12］创建的胞质分裂阻滞法检测胸水患者自发及丝裂霉素诱发PBLMNF，直接在光镜下观察胸水淋巴细胞微核率（PFLMNF），了解PFLMNF能否反应PBLMNF，探讨PFLMNF检测及诱发微核试验

5、在良、恶性胸腔积液鉴别诊断中的价值.1对象和方法1.1对象实验分3组，即恶性胸腔积液组、良性胸腔积液组及健康对照组.①恶性胸腔积液组（A组）20（男13，女7）例.年龄28～67（平均46.7±11.4）岁.其中肺癌14例，胸膜间皮瘤3例，乳腺癌胸膜转移1例，肝癌胸膜转移2例.全部经病理细胞学确诊.实验前均未作化疗、放疗.②良性胸腔积液组（B组）20（男10，女10）例，年龄22～71（平均46.5±14.8）岁，结核性胸膜炎16例，根据临床表现、胸水生化检查及治疗结果确诊.系统性红斑狼疮胸腔积液1例，经血液狼疮细胞多次检查确诊.肝硬化

6、低蛋白血症胸腔积液3例，根据临床表现、肝功检查、胸腔积液检查确诊.③健康对照组（C组）20（男13，女7）例，年龄26～71（平均46.5±11.7）岁.胸腔积液患者均为住院确诊患者，标本为入院后未作治疗的前两次胸腔积液.3组人群均无遗传性疾病，实验前1L加入含200mLL-1小牛血清的RPMI1640培养液5mL（内含双抗各1×105UL-1），加入终浓度为2gL-1PHA（植物血凝素）.50mLL-1CO2恒温培养箱37.0℃培养36h，加入终浓度为6mgL-1的细胞松弛素B，继续培养36h.培养物移入10mL刻度离心管中，1000

7、rmin-1离心8min（以下均相同）.弃上清液加入0.1molL-1的KCl溶液3mL，37.0℃低渗3min，随后加入新配制甲醇:冰醋酸（3∶1）固定液2mL轻轻吹匀预固定，离心弃上清液.加固定液5mL固定20min，离心弃上清液.加少许固定液吹匀沉淀，3～4滴滴于冰冻载玻片上，由一端向另一端吹匀，气干.Giemsa-NF与对照组无统计学差异（P0.05）;恶性胸腔积液组与良性胸腔积液组及对照组差异显著（P0.01）.各组MMC诱发微核率明显增高，恶性胸腔积液组尤为显著（P0.01）.PFLMNF较PBLMNF低（P0.01）.恶性

8、胸腔积液组PFLMNF明显高于良性胸腔积液组（P0.01）.各组内诱发PBLMNF高于自发PBLMNF（P0.01），自发PBLMNF明显高于PFLMNF（P0.01，Tab2）.PFLMNF与PBLMNF