松花粉对砷中毒小白鼠肝脏rna含量及其尿酸含量的影响论文

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1、松花粉对砷中毒小白鼠肝脏RNA含量及其尿酸含量的影响论文韦利英，罗艳红，罗凤芬，吴妮，王强，梁通，黄秀敏【摘要】目的通过研究松花粉对砷中毒小鼠核糖核酸(RNA)及其尿酸含量的影响来观察松花粉对砷中毒小白鼠的治疗作用。方法将39只小鼠随机分为三组：A组为正常对照组，B组为治疗组.freelg/kg)进行砷染毒，治疗组在砷染毒进行的第15天后开始用松花粉灌胃(1g/kg)。至第45天，分别测各组小白鼠肝脏RNA及其尿酸的含量。结果中毒组与正常组相比，小白鼠肝脏RNA含量和尿酸含量显著增高（P0.01）；治疗组与中毒组相比，小白鼠肝脏RNA含量和尿酸含量显著降低(P0.01)；正常组与治疗组

2、小白鼠肝脏RNA含量和尿酸含量差异无显著性（P0.05）。结论松花粉能使砷中毒小白鼠肝脏RNA及尿酸的含量降低并恢复正常，为松花粉在治疗肿瘤方面有更深的研究提供参考。【关键词】松花粉砷中毒小鼠RNA尿酸在正常情况下，细胞的增殖受到多种因素的调控，调控失衡可能引起异常的增殖和持续的分裂。肿瘤的发生是由于细胞的增殖与分化失常所导致的恶性生长现象。而我们知道砷中毒可以导致肿瘤的发生，因此，对砷中毒小白鼠肝肿瘤或异常增生的诊断和预后具有重要的意义。核糖核酸(RNA)在生命活动中具有重要的作用，它和蛋白质共同负责基因的表达和表达过程的调控。它的变化对肿瘤生物学行为有直接的影响［1］。RNA的含量

3、可作为肝肿瘤诊断及判断预后的理想指标［2］，另外，它也可以作为肿瘤恶变的指标之一［3］。松花粉的排砷、保护机体方面的作用已有研究［4，5］，RNA主要在肝脏合成，通过肾脏排泄，本实验通过测定肝脏RNA和尿酸的含量来检测松花粉对砷中毒小鼠的治疗作用。本次实验采用紫外分光光度法，从肝脏RNA水平上定量分析正常组、砷中毒组以及松花粉治疗组小白鼠的肝细胞增殖情况，以肝脏RNA的含量为指标，同时测定尿酸含量，通过对肝脏RNA含量及尿酸含量的变化来分析RNA的合成及排泄情况，为松花粉在治疗肿瘤方面有更深的研究提供参考。1材料与方法1.1试剂NaAsO2，分析纯，购自上海试剂总厂第四分厂；10%Na

4、Cl溶液，0.1mol/LNaOH溶液，95%乙醇，10%乙酸。1.2药品国珍松花粉，购自中国新时代公司。1.3仪器紫外分光光度计，生化全自动分析仪。1.4动物分组昆明小鼠39只（购自广西医科大学试验动物部），雌性，均为12周龄，体重20g左右，普通（清洁）级。将小白鼠随机分为三组，每组13只。1.5染毒与治疗正常对照组，自行饮用蒸馏水；治疗组、中毒组，用亚砷酸钠染毒，1mg/kg体重隔天腹腔注射。15天后，治疗组的小鼠用国珍松花粉液，浓度为0.09g/ml，0.6ml/只，持续灌胃治疗，至第30天处理各组动物。1.6采样和检测方法尿酸的测定方法采用生化全自动分析仪。1.6.1肝匀浆制

5、备剖腹取新鲜鼠肝，用0.9％NaCl洗去血液，除去结缔组织，剪碎，称取1g肝组织，加1m10.14mol/LNaCl溶液，研钵中研磨，制成肝匀浆。1.6.2分离核蛋白肝匀浆倒入试管中，4000r/min离心5min，上清倒入另一试管中为A管。沉淀加0.25ml0.14mol/LNaCl搅匀后再置研钵中研磨，4000r/min离心5min，上清倒入A管，沉淀重复上述操作，上清并入A管，沉淀弃去。1.6.3纯化核蛋白A管用10％乙酸调pH至4.2，混匀，静置5min，4000r/min离心5min，倾去上清，沉淀含核糖核蛋白。1.6.4溶解核糖核蛋白A管沉淀中加0.75m110％NaCl，

6、搅匀，100℃水浴10min(不断搅拌，防沸溢出)，冷却，4000r/min离心5min，留上清液。1.6.5纯化RNAA管上清液加95％冷乙醇5m1，见乳白色核糖核酸钠沉淀，混匀放置10min，4000r/min离心15min，沉淀为纯化RNA。1.6.6RNA的溶解沉淀中加入0.1mol/LNaOH1.0ml，搅拌溶解，2000r/min离心10min，上清液则为RNA水解液。1.6.7RNA的测定用4ml0.1mol/LNaOH将样品稀释到一定浓度，以0.1mol/LNaOH调零，测定样品的A260，计算出1g肝组织中的RNA含量。2结果RNA含量和尿酸含量的测定结果，见表1。表

7、1三组小鼠肝RNA、尿酸含量的测定结果（略）与中毒组比较,a:t=2.81,b:t=4.40,c:t=14.10,d:t=9.05,P均0.01;与治疗组相比，e:t=1.75,P0.053讨论砷中毒后T淋巴细胞的rDNA转录活性降低，机体肿瘤免疫力下降［5］。同时砷还可引起正常细胞的增殖调控失衡，细胞异常增殖，组织发生瘤变［4］。实验中也发现砷中毒小白鼠肝部有类似肿瘤病变。肿瘤一旦发生，如果得不到及时治疗，肿瘤细胞就会持续增殖和分裂，机体的损