sb203580防治大鼠高氧肺损伤的作用与机制论文

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1、SB203580防治大鼠高氧肺损伤的作用与机制论文罗莉漫，孙志强，余健，聂国明，刘静，邹敏书【摘要】目的：探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)特异性抑制剂SB203580对新生大鼠高氧肺损伤产生保护作用的机制.方法：160只新生大鼠随机分为空气对照组、高氧肺损伤组、高氧肺损伤+SB203580组和高氧肺损伤+生理盐水组，建立模型.作用12,24,72h和1echanismofprotectionfromhyperoxiainducedlunginjuryinnechloridegrouprandomly.Atthetimepointsof12,24

2、,72hand1epointof72hepointepointof72h,p38MAPKchloridegroup;inthetegoingon.Andateachtimepoint,.freelentofSB203580throughblockingtheexpressionsofp38MAPK,theninhibitingtheexpressionofIL8andTGFβ1.【Keyitogenactivatedproteinkinase;IL8;TGFβ10引言我们在前期研究中发现，大鼠长时间暴露于高氧环境后，p38丝裂素活化蛋白激酶（p38m

3、itogenactivatedproteinkinase,p38MAPK）得以激活并介导了急性肺损伤，p38MAPK特异性抑制剂SB203580对这种损伤具有明显的保护作用［1］，但具体的机制尚不清楚.有研究表明，白介素8（interleukin8,IL8）和转化生长因子β1（transforminggroa公司）;IL8和TGFβ1ELISA检测试剂盒（美国Mega诊断试剂有限公司）.1.2方法1.2.1分组及建模将大鼠随机分为4组：空气对照组、高氧肺损伤组、高氧肺损伤+SB203580组及高氧肺损伤+生理盐水组，每组40只.所有高氧肺损伤组置

4、于常压高氧仓中，氧体积分数0.95，CO2体积分数≤0.05；空气对照组置于同一室内，空气中氧体积分数为0.21.高氧肺损伤+SB203580组从高氧暴露第1日开始，给予SB203580（配制成10μmol/L）5mg/kg腹腔注射，1/d，共3d.高氧肺损伤+生理盐水组给予生理盐水5mg/kg腹腔注射，1/d，共3d.所有高氧肺损伤组每天开仓1次，添加水及垫料，并将母鼠置于空气中休息1h,累计连续暴露于高氧环境72h.以上4组环境温度均控制在21~25℃，湿度60%~70%.1.2.2标本制备于12，24，72h和1in，13000g高速离心20min，取上

5、清液.1.2.3APK抗体（1∶500），4℃过夜.TBST洗涤3次（15min/次），加入HRP标记的羊抗兔IgG（1∶500），37℃孵育1h，TBST洗涤3次（15min/次），DAB染色，适时终止.1.2.4ELISA法检测IL8和TGFβ1的含量取4个时相点的右肺匀浆离心后的上清液为待测样品.严格按试剂盒说明书操作.在450nm波长处测定A值，根据吸光度在标准曲线中换算样品中IL8和TGFβ1的含量.统计学处理：计量资料以x±s表示，采用统计软件SPSS11.0进行分析，组间比较用非参数秩和检验,P0.01为差异有统计学意义.2结果2.1AP

6、K的表达72h后，空气对照组未见p38MAPK表达，高氧肺损伤组可见p38MAPK表达；高氧肺损伤+生理盐水组p38MAPK表达明显强于高氧肺损伤+SB203580组（图1）.2.2ELISA法检测IL8和TGFβ1的表达在高氧肺损伤组和高氧肺损伤＋生理盐水组中，肺组织IL8和TGFβ1浓度均随时间延长呈持续上升趋势；在各个时相点，高氧肺损伤组和高氧肺损伤＋生理盐水组IL8和TGFβ1浓度均高于空气对照组和高氧肺损伤＋SB203580组（P0.01，表1）.表1不同处理组新生大鼠右肺IL8和TGFβ1含量测定（略）3讨论p38MAPK通路是19

7、93年发现的一类MAPK通路.1994年，Han等［2］首先在小鼠肝脏细胞中克隆了p38MAPK基因，同时发现其在小鼠巨噬细胞和淋巴细胞中均有表达.和其它MAPK通路一样，p38MAPK通路亦采用磷酸化高度保守的三级激酶级联传递信号，即MEKK5→MKK3/6→p38MAPK［3］.p38MAPK通常由紫外线、内毒素、脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）、高渗环境等激活，之后移位至细胞核内，作用于相应的转录因子，启动某些基因转录.除了在细胞应激、发育、分化和凋亡中具有重要作用外，p38MAPK在炎症反应中也发挥了重要作用［4］.在哺乳动物中，

8、p38MAPK特异性抑制剂SB2035