亚贡叶中总黄酮及总酚酸的含量测定论文

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1、亚贡叶中总黄酮及总酚酸的含量测定论文田芳窦德强迟玉新吴阳朱红丘鹰昆康廷国董锋【摘要】目的建立亚贡叶总黄酮、总酚酸的含量测定方法。方法利用分光光度计通过测定吸光度计算总黄酮、总酚酸的含量。结果实验建立了总黄酮、总酚酸的标准曲线,测得亚贡叶中总黄酮平均含量为3.2%,RSD=1.4%(n=6);总酚酸平均含量为4.5%,RSD=1.6%(n=6)。结论建立了亚贡叶的总黄酮、总酚酸含量测定方法,该法简单、快捷,重现性好,可用于亚贡叶的质量控制和定量分析。【关键词】亚贡总黄酮总酚酸Abstract:ObjectiveToestablishthedeterminationmethodsoftota

2、lflavonoidsandtotalphenolicacidfromleafofYacon.MethodsThecontentoftotalflavonoidsandtotalphenolicacidinedbyspectrophotometry.ResultsCalibrationgraphsethodsarerapid,reliable,accurateandsuitableforanalysisoftotalflavonoidsandtotalphenolicacidandqualitycontrolinSmallanthussonchifolius.Keyallanthusso

3、nchifolius(Poepp.etEnd1.)H.Robinson为菊科向日葵属多年生草本植物,俗称“雪莲果”“雅龙果”,英文名为“YACON”。原产于南美洲安第斯山脉,是当地印第安人的传统根茎食品[1]。在我国云南地区有大面积种植.freelallanthussonchifolius的叶。所用试剂(硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠、三氯化铁六水合物、铁氰化钾、十二烷基磺酸钠、盐酸、甲醇)购于各试剂公司。2方法2.1供试品的准备精密称取亚贡叶粉末约2g,加入石油醚100ml,用索氏提取器脱脂6h。脱脂后粉末加入100ml60%甲醇加热回流两次,各1.5h。过滤,合并滤液,减压浓缩并定容至2

4、5ml容量瓶。精密吸取1ml再定容至25ml容量瓶中备用。2.2总黄酮含量测定[3]。2.2.1芦丁对照品的准备精密称取芦丁对照品,用60%的甲醇溶解后定容,配成浓度为95μg/ml的芦丁对照品贮备液。精密吸取1ml芦丁对照品溶液,定容至10ml,制成浓度为9.5μg/ml的芦丁对照品溶液。2.2.2标准曲线的绘制精密吸取浓度为9.5μg/ml芦丁对照品溶液0,1.0,4.0ml及95μg/ml的芦丁对照品溶液1.0,2.0,3.0,4.5ml于7只10ml具塞比色管中,分别加入5%NaNO2溶液0.3ml,摇匀,放置6min后各加入10%Al(NO3)3溶液0.3ml,摇匀放置6min

5、。分别加入4%NaOH溶液4.0ml,用60%甲醇稀释至刻度,摇匀,放置10min。在波长505nm处测定吸光度。回归方程:Y=1.1937X-0.0011,r=0.9997。其中Y为吸光度,X为芦丁对照品溶液浓度(mg/ml)。结果表明:芦丁在0.001~0.043mg/ml的范围内呈良好的线性关系。2.2.3方法学考察精密度实验:精密吸取95μg/ml芦丁对照品溶液1.0ml置于10ml具塞比色管中,同“2.2.2”项下实验方法进行显色和测定,记录吸光度A,吸光度A的RSD为0.51%(n=5)。重现性实验:精密称取2g同一批药材5份,按“2.1供试品的制备”及含量分析项下进行操作,

6、制得5份供试液,各取适量,同“2.2.2”项下实验方法进行显色和测定,记录吸光度,吸光度A的RSD为1.5%(n=5)。稳定性实验:精密吸取95μg/ml芦丁对照品溶液1.0ml,同“2.2.2”项下实验方法进行显色,分别在15,20,30,45,60,100min测定,结果表明样品在15~60min内稳定。2.2.4供试品总黄酮含量测定精密吸取供试品溶液3ml置于10ml具塞比色管中,同上述显色法测定其吸光度A。计算亚贡叶中总黄酮平均含量为3.2%,RSD=1.4%(n=6)。2.3总酚酸含量测定[4]2.3.1咖啡酸对照品的准备精密称取咖啡酸对照品,用60%的甲醇溶解后定容,配成浓度

7、为101μg/ml的咖啡酸对照品贮备液。2.3.2标准曲线的绘制精密吸取浓度为101μg/ml咖啡酸对照品溶液0,0.2,0.3,0.5,1.0,2.0ml于6只25ml具塞比色管中,加甲醇至5ml,加0.3%十二烷基硫酸钠2ml及0.6%FeCl3·6H2O:0.9%K3[Fe()6](1∶1)混合溶液1ml,混匀,在暗处放置5min,加0.1mol/L的HCL溶液至刻度,混匀,在暗处放置20min。以显色剂为空白,在波长746n

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