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1、大乌泡叶中总黄酮含量测定论文.freel处有最大吸收。重复性、精密度、加样回收率试验的RSD值分别为2.11%、0.97%、2.34%,含量测定结果表明大乌泡叶中总黄酮含量为3.8%。结论以60%甲醇提取、硝酸铝显色、510nm测定的分光光度法适用于大乌泡叶中总黄酮含量的测定。【关键词】大乌泡；总黄酮；含量测定；分光光度法Abstract：ObjectiveTosupplyscientificbasisforthereasonabledevelopmentandutilizationofRubusmultibra
2、cteatusLevl.etVant.resources.MethodThetotalflavonoidsRubusmultibracteatusLevl.etVant.ethanolanditscontentinedbyspectrophotometry.Thereliabilityandrepeatabilityofthemethodents.ResultBothstandardandtestedsolutionshadthemaximumabsorbanceat510nm.TheRSDvaluesofrep
3、eatability,accuracyandrecoveryexperimentsinationshoultibracteatusLevl.etVant.ethanol,colorediniumnitrateanddeterminedbyspectrophotometryat510nminationoftotalflavonoidsinRubusmultibracteatusLevl.etVant..KeyultibracteatusLevl.etVant.；totalflavonoids；contentdete
4、rmination；spectrophotometry大乌泡为蔷薇科悬钩子属植物大乌泡(RubusmultibracteatusLevl.etVant.),又名倒生根、黄水泡、无刺乌泡、糖泡叶、马莓叶,以根及全株入药。全国大部分地区均有分布,.freelultibracteatusLevl.etVant.),标本存放于中药复方新药开发国家工程研究中心。甲醇为分析纯,5%亚硝酸钠、10%硝酸铝、4%氢氧化钠等均采用分析纯自配。2方法与结果2.1供试品溶液的制备干燥大乌泡叶粉末约2.0g,精密称定,置索氏提取器中,加
5、入60%甲醇100mL,于恒温水浴锅上90℃提取6h,过滤,减压浓缩并定容至50mL容量瓶中,得供试品溶液。2.2芦丁对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的芦丁对照品4.75mg,用少量60%甲醇溶解,置50mL容量瓶中,用60%甲醇定容至50mL,摇匀,静置,配成浓度为95μg/mL的芦丁对照品贮备液。2.3测定波长的选择以芦丁为对照品测定大乌泡叶中总黄酮的含量。精密吸取对照品液、供试品液各适量分别加入到25mL容量瓶中,按“2.4”项下方法操作,并在400～600nm范围内扫描,结果均在510nm处有最大吸收波
6、长,其他成分对测定无干扰,故选择510nm为测定波长。2.4标准曲线的绘制精密吸取浓度为95μg/mL的芦丁对照品溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL,分别置于25mL量瓶中,分别加入5%亚硝酸钠溶液1.0mL,摇匀,放置6min后各加入10%硝酸铝溶液1.0mL,摇匀后放置6min,分别加入4%氢氧化钠溶液10mL,用60%甲醇稀释至刻度,摇匀,放置10min,在510nm处测定吸光度。回归方程为：Y＝0.0012X＋0.001,r＝0.9996。结果表明,芦丁对照品溶液浓度在95～570
7、μg/mL之间呈良好的线性关系。2.5方法学考察2.5.1精密度试验精密吸取95μg/mL芦丁对照品溶液5.0mL,置于25mL量瓶中,按“2.4”项下方法进行显色和测定,重复6次实验,记录吸光度。吸光度的RSD＝0.97%(n＝6),说明仪器精密度良好。2.5.2重复性试验精密称取样品6份,每份约2.0g,精密称定,按“2.1”项下方法制备供试品溶液,每份精密吸取1.0mL,分别置于10mL容量瓶中,按“2.4”项下方法进行显色和测定,记录吸光度值,计算每份样品的含量。6份样品黄酮含量的RSD＝2.11%(n＝
8、6)。2.5.3稳定性试验精密称取样品6份,每份约2.0g,按“2.1”项下方法制备供试品溶液。精密吸取供试品溶液1.0mL,共6份,分别置于10mL量瓶中,按“2.4”项下方法进行显色和测定,分别在15、20、30、45、60、100min测定,RSD＝1.38%(n＝6)。结果表明样品在15～100min之间稳定。2.5.4加样回收率试验精密称取芦丁对照品适量,加入已
