亚贡叶中总黄酮及总酚酸的含量测定

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1、亚贡叶中总黄酮及总酚酸的含量测定田芳窦德强迟玉新吴阳朱红丘鹰昆康廷国董锋【摘要】　　目的建立亚贡叶总黄酮、总酚酸的含量测定方法。方法利用分光光度计通过测定吸光度计算总黄酮、总酚酸的含量。结果实验建立了总黄酮、总酚酸的标准曲线，测得亚贡叶中总黄酮平均含量为3.2%,RSD=1.4%（n=6）；总酚酸平均含量为4.5%,RSD=1.6%（n=6）。结论建立了亚贡叶的总黄酮、总酚酸含量测定方法，该法简单、快捷，重现性好，可用于亚贡叶的质量控制和定量分析。【关键词】亚贡总黄酮总酚酸　　Abstract：ObjectiveToestablishthedeter

2、minationmethodsoftotalflavonoidsandtotalphenolicacidfromleafofYacon.MethodsThecontentoftotalflavonoidsandtotalphenolicacidinedbyspectrophotometry.ResultsCalibrationgraphsethodsarerapid,reliable,accurateandsuitableforanalysisoftotalflavonoidsandtotalphenolicacidandqualitycontrol

3、inSmallanthussonchifolius.　　Keyallanthussonchifolius(Poepp．etEnd1．)H．Robinson为菊科向日葵属多年生草本植物，俗称“雪莲果”“雅龙果”，英文名为“YACON”。原产于南美洲安第斯山脉，是当地印第安人的传统根茎食品〔1〕。在我国云南地区有大面积种植，贵州、福建、湖南、台湾等地也均有种植。民间用亚贡叶加工成茶，冲泡饮用，有降血糖、预防动脉粥样硬化的功效。日本学者研究发现，亚贡能有效地控制胆固醇增加,有减肥、防感冒、防骨质疏松、降低高血压的功效,对消化道和循环系统的疾病,以及结肠癌等

4、,均具有一定的疗效〔2〕。目前国内对于亚贡的文献报道较少，本文对亚贡叶中总黄酮及总酚酸含量进行了测定，为其资源合理的开发利用及质量控制提供理论依据。　　1仪器与试药　　1.1仪器　　UV-2100紫外分光光度计(上海UNICO)、FA-1004分析天平（上海精科天平厂）。　　1.2试药芦丁对照品为自制，经HPLC纯度检验为98.472%、咖啡酸标准品购于中国药品生物制品检定所（批号110885-200102）。亚贡叶200509采自辽宁省鞍山市岫岩新甸镇大山村，经辽宁中医药大学药学院康廷国教授鉴定为菊科亚贡Smallanthussonchifoli

5、us的叶。所用试剂(硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠、三氯化铁六水合物、铁氰化钾、十二烷基磺酸钠、盐酸、甲醇)购于各试剂公司。　　2方法　　2.1供试品的准备精密称取亚贡叶粉末约2g，加入石油醚100ml，用索氏提取器脱脂6h。脱脂后粉末加入100ml60%甲醇加热回流两次，各1.5h。过滤，合并滤液，减压浓缩并定容至25ml容量瓶。精密吸取1ml再定容至25ml容量瓶中备用。　　2.2总黄酮含量测定〔3〕。　　2.2.1芦丁对照品的准备精密称取芦丁对照品，用60%的甲醇溶解后定容，配成浓度为95μg/ml的芦丁对照品贮备液。精密吸取1ml芦丁对照品溶液，

6、定容至10ml，制成浓度为9.5μg/ml的芦丁对照品溶液。　　2.2.2标准曲线的绘制精密吸取浓度为9.5μg/ml芦丁对照品溶液0，1.0，4.0ml及95μg/ml的芦丁对照品溶液1.0，2.0，3.0，4.5ml于7只10ml具塞比色管中，分别加入5%NaNO2溶液0.3ml，摇匀，放置6min后各加入10%Al(NO3)3溶液0.3ml，摇匀放置6min。分别加入4%NaOH溶液4.0ml，用60%甲醇稀释至刻度，摇匀，放置10min。在波长505nm处测定吸光度。回归方程：Y=1.1937X-0.0011，r=0.9997。其中Y为吸光度

7、，X为芦丁对照品溶液浓度（mg/ml）。结果表明：芦丁在0.001～0.043mg/ml的范围内呈良好的线性关系。　　2.2.3方法学考察　　精密度实验：精密吸取95μg/ml芦丁对照品溶液1.0ml置于10ml具塞比色管中，同“2.2.2”项下实验方法进行显色和测定，记录吸光度A，吸光度A的RSD为0.51%(n=5)。　　重现性实验：精密称取2g同一批药材5份，按“2.1供试品的制备”及含量分析项下进行操作，制得5份供试液，各取适量，同“2.2.2”项下实验方法进行显色和测定，记录吸光度，吸光度A的RSD为1.5%(n=5)。　　稳定性实验：精密

8、吸取95μg/ml芦丁对照品溶液1.0ml，同“2.2.2”项下实验方法进行显色，分别在15，20，30，4