亚贡叶中总黄酮及总酚酸的含量测定

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1、亚贡叶中总黄酮及总酚酸的含量测定作者:田芳窦德强迟玉新吴阳朱红丘鹰昆康廷国董锋【摘要】  目的建立亚贡叶总黄酮、总酚酸的含量测定方法。方法利用分光光度计通过测定吸光度计算总黄酮、总酚酸的含量。结果实验建立了总黄酮、总酚酸的标准曲线,测得亚贡叶中总黄酮平均含量为3.2%,RSD=1.4%(n=6);总酚酸平均含量为4.5%,RSD=1.6%(n=6)。结论建立了亚贡叶的总黄酮、总酚酸含量测定方法,该法简单、快捷,重现性好,可用于亚贡叶的质量控制和定量分析。【关键词】亚贡总黄酮总酚酸  Abstract:ObjectiveToestablishthedeterminatio

2、nmethodsoftotalflavonoidsandtotalphenolicacidfromleafofYacon.MethodsThecontentoftotalflavonoidsandtotalphenolicacidinedbyspectrophotometry.ResultsCalibrationgraphsethodsarerapid,reliable,accurateandsuitableforanalysisoftotalflavonoidsandtotalphenolicacidandqualitycontrolinSmallanthussonc

3、hifolius.  Keyallanthussonchifolius(Poepp.etEnd1.)H.Robinson为菊科向日葵属多年生草本植物,俗称“雪莲果”“雅龙果”,英文名为“YACON”。原产于南美洲安第斯山脉,是当地印第安人的传统根茎食品[1]。在我国云南地区有大面积种植,贵州、福建、湖南、台湾等地也均有种植。民间用亚贡叶加工成茶,冲泡饮用,有降血糖、预防动脉粥样硬化的功效。日本学者研究发现,亚贡能有效地控制胆固醇增加,有减肥、防感冒、防骨质疏松、降低高血压的功效,对消化道和循环系统的疾病,以及结肠癌等,均具有一定的疗效[2]。目前国内对于亚贡的  2.3

4、总酚酸含量测定[4]  2.3.1咖啡酸对照品的准备精密称取咖啡酸对照品,用60%的甲醇溶解后定容,配成浓度为101μg/ml的咖啡酸对照品贮备液。  2.3.2标准曲线的绘制精密吸取浓度为101μg/ml咖啡酸对照品溶液0,0.2,0.3,0.5,1.0,2.0ml于6只25ml具塞比色管中,加甲醇至5ml,加0.3%十二烷基硫酸钠2ml及0.6%FeCl3·6H2O:0.9%K3[Fe()6](1∶1)混合溶液1ml,混匀,在暗处放置5min,加0.1mol/L的HCL溶液至刻度,混匀,在暗处放置20min。以显色剂为空白,在波长746nm波长处测定吸光度A。回归方

5、程为:Y=4.9428X-0.0005,r=0.9998。其中Y为吸光度,X为绿原酸对照品溶液浓度(mg/ml)。结果表明:绿原酸在0.001~0.008mg/ml的范围内呈良好的线性关系。  2.3.3方法学考察  精密度实验:精密吸取绿原酸标准溶液1.00ml置于25ml量瓶,同“2.3.2”项下实验方法进行显色和测定,记录吸光度A,吸光度A的RSD为0.87%(n=5)。  重现性实验:精密称取2g同一批药材5份,按“2.1”供试液的制备及含量分析项下进行操作,制得5份供试液,各取适量,同“2.3.2”项下进行显色和测定,记录吸光度,吸光度A的RSD为2.1%(n

6、=5)。  稳定性实验:精密吸取绿原酸标准溶液1.0ml,同“  2.3.2”项下进行显色,分别在15,20,25,30,35,40,45,50min测定,结果表明样品在15~40min内稳定。  2.3.4供试品总酚酸含量测定精密吸取供试品溶液1ml于10ml具塞比色管中,同上述显色法测定其吸光度,A=0.703。计算亚贡叶中总酚酸平均含量为4.5%,RSD=1.6%(n=6)。  3讨论  分别测定显色后的供试品及芦丁、绿原酸对照品最大吸收波长,确定总黄酮测定波长为505nm,总酚酸测定波长为746nm。  精称供试品4份,分别用超声提取及回流提取。分别按“2.2.

7、2”、“2.3.2”项显色方法测定其吸光度,计算总黄酮、总酚酸含量。结果超声提取法总黄酮、总酚酸含量明显低于回流提取法,故选用回流提取法。实验发现样品总黄酮测定的稳定性较好,而在总酚酸测定时发现40min后波长扫描无明显最大吸收波长,吸收峰变扁平,故总酚酸的测定时间不宜过长,需要避光保存。  实验测得亚贡叶中总黄酮含量为3.2%;总酚酸含量为4.5%。远远高于相关

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