响应面法优化蛹虫草菌丝体多糖超声波提取工艺的研究论文

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1、响应面法优化蛹虫草菌丝体多糖超声波提取工艺的研究论文董媛朱靖宇王虎义左陶马东宵滕利荣【摘要】目的利用单因素及响应面分析法优化蛹虫草菌丝体多糖超声提取工艺。方法通过单因素实验选取实验因素与水平，在单因素实验的基础上，以液料比、超声功率、提取时间为响应因子，进行3因素3水平的响应面实验，并与传统水提法进行比较分析。结果超声提取蛹虫草菌丝体中多糖的最佳工艺条件为：提取时间504s，提取功率466)优化多糖提取工艺的研究报道较少［5］。响应面分析法（ResponseSurfaceMethodology，RSM）,将数学与统计

2、学相结合，采用多元二次回归方法作为函数估计的工具来拟合因素与响应值之间的函数关系［6］，依此可对函数的响应面和等高线进行分析来寻求最佳工艺参数。本工艺在蛹虫草菌丝体多糖的提取过程中，以液体深层发酵获得蛹虫草菌丝体为原料，将单因素和响应面分析法应用于超声波提取蛹虫草菌丝体多糖，研究了超声提取的条件及其对提取结果的影响，并与传统水浸提法进行了比较，为其工艺路线的改造，降低生产成本以及工业化生产提供一定的理论参考。1材料与仪器蛹虫草菌种（CGMCC5.0699），购于中国科学院微生物研究所；蒽酮，浓硫酸，3,5-二硝基水杨

3、酸，葡萄糖，所有试剂均为分析纯；HZQ-F160型全温振荡培养箱（哈尔滨市东联电子技术开发有限公司），MLS-3750型高压自动灭菌锅（日本SANYO），超净工作台（苏净集团安泰公司），5810R型高速冷冻离心机（德国Eppendorf），JY92-Ⅱ超声波细胞粉碎仪（厦门精密仪器有限公司），UV-3150紫外分光光度计（日本岛津），BP221S电子天平（德国赛多利斯）。2方法2.1多糖的测定2.1.1总糖的测定蒽酮－硫酸法［7］。2.1.2还原糖的测定DNS法［8］。2.1.3菌丝体多糖提取率的计算多糖含量=总糖含

4、量-还原糖含量多糖提取率(%)=［多糖含量(g)/菌丝体质量(g)］×l00％2.2菌丝体多糖的超声提取方法液体深层发酵获得蛹虫草菌丝体，冷冻干燥至恒重，粉碎，过60目筛。分别称取0.1g菌丝体干粉，按一定液料比加入一定量去离子水，水浴中超声波提取一定时间。提取液经12000r/min，4℃，离心10min，上清测定总糖和还原糖的含量。2.3菌丝体多糖提取单因子实验在提取过程中，利用单因子实验对影响多糖提取率的液料比、超声功率、提取时间3个主要因素进行考察。2.4菌丝体多糖提取中心组合实验在单因子实验的基础上根据Bo

5、x-Benhnken的中心组合实验设计原理，采用响应面法在3因素3水平上对菌丝体多糖的提取条件进行优化。按最佳提取条件进行验证实验并考察提取次数对提取率的影响。3结果3.1超声波提过程中的单因素影响3.1.1提取时间对菌丝体多糖提取率的影响在液料比40∶1，提取功率300］.郑州：河南科学技术出版社，2004：24.［2］王琦，韩晓龙.蛹虫草对老年大鼠自由基代谢影响的研究［J］.辽宁师范学报，2002，4（4）：104.［3］熊中良,邓春生.真菌多糖免疫活性的研究进展［J］.江西农业学报,2006,18(2):118

6、.［4］高丽君,王汉忠,崔建华,等.白首乌可溶性多糖提取工艺研究［J］.食品科学,2004,.freel］.杭州:浙江大学出版社,2003:103.［8］滕利荣.生物学基础实验教程［M］.长春：吉林科学技术出版社,1999：541.