蛹虫草子实体虫草多糖提取工艺的优化.pdf

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1、江苏农业科学2014年第42卷第7期·-——277-——殷东林，王锐丽，段鸿斌．蛹虫草子实体虫草多糖提取工艺的优化[J]．江苏农业科学，2014，42(7)：277—279蛹虫草子实体虫草多糖提取工艺的优化殷东林，王锐丽，段鸿斌(信阳农林学院，河南信阳464000)摘要：以蛹虫草子实体为材料，研究虫草多糖的提取工艺，探讨热水浸提法、超声波助提法、微波助提法和索氏提取法4种提取方法的效果。结果发现，微波助提法是虫草多糖的最佳提取方法。通过正交试验考察了微波助提法中微波功率、微波时间、提取次数、料液比4个因素对虫草多糖提取效率的影响，建立

2、了提取虫草多糖的最佳工艺，即微波功率420W、微波处理时间4min、提取次数3次、料液比1g：40mL，此时提取率可达9．34％以上。关键词：蛹虫草；虫草多糖；提取工艺；正交试验；优化中图分类号：R284．2文献标志码：A文章编号：1002—1302(2014)07—0277—02蛹虫草[Cordycepsmilitaris(Linn．)Link]为子囊菌亚门1．1材料麦角。菌目麦角菌科虫草属的模式种⋯，是一种药食两用的名1．1．1试剂无水乙醇、浓硫酸、蒽酮，均为市售分析纯；蒸贵食用菌。蛹虫草所含的虫草多糖、虫草酸和虫草菌素均高馏水。

3、于冬虫夏草，其独特药理作用已日益引起药学界的高度重视。1．1．2器材用具高速粉碎机，80目筛，电子天平(上海越研究表明，虫草多糖是一种半乳甘露聚糖，它能促进淋巴细胞平科学仪器有限公司)，微量移液器(上海求精生化试剂仪器转化，提高血清IgG的抗体含量和机体的免疫功能，增强机体有限公司)，数显恒温水浴锅(上海梅香仪器有限公司)，自身抗癌、抑癌的能力。它不仅能激活T、B淋巴细胞、巨噬JY92一Ⅱ超声波细胞粉碎机(浙江宁波新芝生物科技股份有细胞和自然杀伤细胞，还能活化补体、促进细胞因子包括肿瘤限公司)，微波炉(广东省佛山市顺德区格兰仕微波炉电

4、器有坏死因子和白细胞介素生成，从而对免疫系统发挥多方面的限公司)，旋转蒸发器RE52—86A(上海亚荣生化仪器厂)，调节作用。此外，多糖还具有抗炎作用，且效果明显，其DHG一9023AS型电热恒温鼓风干燥箱(浙江宁波东南仪器有发酵液中有抗菌活性物质，对金黄色葡萄球菌马铃薯芽孢杆限公司)，TU一1810紫外可见分光光度计(北京普析通用仪菌等均有明显的抑制作用，在研制新型杀菌剂和保鲜剂方面器有限责任公司)。有良好的应用前景J。1．1．3材料蛹虫草由信阳农林学院生物技术系实验室培目前，虫草多糖的提取方法有热水浸提法、碱提取法、稀养。蛹虫草子

5、实体干燥后粉碎，过8O目筛。酸浸提法和酶提取法等。其中，最常用、最简单有效的方法是1．2方法热水浸提法，首先用蒸馏水浸润物料，再用热水浴浸提，然后1．2．1虫草多糖的提取用单因素分析法确定虫草多糖最利用多糖易溶于水而不溶于高浓度乙醇的性质，用无水乙醇佳提取方法：(1)热水浸提法。取干质量1g蛹虫草粉，加入沉淀得到多糖，即采用水提醇沉的办法。30mL蒸馏水，80℃水浴提取2h，提取结束后抽滤提取液，为了进一步提高提取率、缩短提取时间，可用超声波辅助用真空旋转蒸发仪将滤液浓缩到适当体积。(2)超声波助提浸提和微波辅助浸提，这2种方法操作简

6、单且不会引入杂质。法。取干质量1g蛹虫草粉，加入55mL蒸馏水，用超声波细超声波能破坏细胞和细胞膜结构，增加细胞内容物通过细胞胞破碎仪400W处理9O次，每次58，然后转入水浴8O℃提膜的穿透能力，有助于多糖的释放与溶出，超声波使提取液不取2h，提取结束后抽滤提取液，用真空旋转蒸发仪将滤液浓断振荡，有助于溶质扩散，缩短提取时间，提高有效成分的提缩到适当体积。(3)微波助提法。取干质量Ig蛹虫草粉，加取率和原料的利用率；微波透过提取溶剂到达物料内部，入80℃蒸馏水40mL，静置20min湿润物料，微波功率为使之快速升温，进而使其细胞内部

7、压力增大。当压力超过细420W下辐射1min，问隔1min后再辐射1rain，如此间隔辐胞壁所能承受的能力时，细胞壁破裂，胞内有效成分易流出，射直至总辐射时间达到4min，然后转入水浴温度为8O℃下从而易进人提取溶剂。本研究采取单因素分析法和多因提取1h，提取结束后抽滤提取液，用真空旋转蒸发仪浓缩到素正交分析法，对虫草多糖提取工艺进行优化，旨在为虫草多适当体积。(4)索氏提取法。取干质量1g蛹虫草粉，用糖的提取提供一套快速、高效的方法。120mL蒸馏水于80～100℃下热回流3次，收集提取液，用旋转蒸发仪浓缩至适当体积。以上4种方法均

8、做3个重复，1材料与方法结果取平均值。得到的提取液浓缩到适当体积后，加入3倍体积的无水乙醇，静置过夜，进行醇析，所得沉淀在45℃条件下烘干；再用60℃蒸馏水将沉淀溶解，并定容到100mL，即收稿日期：2o13—10—24