罐组式动态逆流提取蛹虫草多糖的工艺研究论文

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1、罐组式动态逆流提取蛹虫草多糖的工艺研究论文郭脉玺，李再新，潘明，雷云玲，肖正华，谢万如【摘要】目的建立罐组式动态逆流提取蛹虫草多糖的方法。方法通过单罐单因素实验，正交设计分析提取时间、提取温度和料液比对蛹虫草多糖提取的影响；设计罐组式动态逆流提取装置，重点探讨料液比和提取级数对多糖提取得率的影响。结果罐组式动态逆流提取虫草多糖的条件为：提取时间150min.freelicrefluenceinextractingpolysaccharidefromCordycepsmilitaris(Fr)Link.MethodsEffectsofextractiontime,temperatureandra

2、tioofdosageliquorandnumberofpotsongenerationofpolysaccharidealextractionconditionsofpolysaccharideinutes,90℃and1∶50oftheratioofdosageliquor，5potsinthepotgroupsdynamicrefluence.Thedifferenceiccountercurrentandthatofsinglepot(P0.01).ConclusionTheextractingprocessofpotgroupdynamicrefluenceextractioncan

3、getmoreeffectiveponents,saveenergyandshortenthetimeofmanufacturing.Keyilitaris(Fr)Link；Polysaccharide；Countercurrentextraction蛹虫草Cordycepsmilitaris(Fr)Link属子囊菌亚门(Asyxotina)麦角菌科(Clavicipitaceae)虫草属［1］。因其药效成分与冬虫夏草Cordycepssinensis相似，现已逐渐成为其替代品入药。虫草多糖是蛹虫草菌丝体主要生物活性成分，大量医学实验证实，虫草多糖可活化巨噬细胞，刺激抗体产生，提高人体免疫能力

4、，抑制肿瘤细胞的生长和扩散［2］。蛹虫草多糖一般采用水法提取，但蛹虫草多糖黏度非常高，因而单罐提取中，随着多糖不断溶出，体系黏度迅速增加，使传质推动力削弱，多糖提取效率较低，且单罐提取时间长、溶剂耗量大，后序浓缩阶段负荷较高。为提高蛹虫草多糖的提取效率、降低提取成本，本文利用耐高温三角锥瓶（提取瓶）组合，形成连续逆流提取装置，开展蛹虫草多糖的提取实验，分析提取率、提取罐数和料液比等影响因素。1材料采收后的蛹虫草大米固体培养基，由四川理工学院生物制药实验室提供。乙醇、葡萄糖、浓硫酸、丙酮和苯酚等试剂均为分析纯。2方法2.1单罐提取工艺取蛹虫草采收后的固体培养基，50℃烘干粉碎，过100目筛，单罐

5、回流装置提取蛹虫草多糖。采用不同温度、时间和料液比,重复3次，正交实验回归分析［3］。2.2连续逆流提取方法称取上述烘干的虫草粉3g，加入到500ml耐高温的三角锥瓶(提取瓶)中，编号，加入适量的去离子水，90℃水浴。30min后，纱布过滤，将药渣留原提取瓶，药液转入下一级提取瓶，逐次转瓶，经多级转移后，收集药液，淘汰起始提取瓶药渣，在末尾增加药粉［4］。设置料液比分别为为1∶15，1∶30和1∶60，罐数为4，5和6。2.3提取滤液的处理提取滤液冷却后，在6000r/min离心10min，加入3倍95%乙醇。4℃静置24h，在6000r/min离心10min，去除上清液，依次再加入一定量的无

6、水乙醇、乙醚和丙酮洗涤2次,60℃下真空干燥得粗多糖。2.4多糖含量及其提取率分析采用蒽酮-硫酸法测定总糖,3,5-二硝基水杨酸法测定还原糖；多糖=(总糖含量-还原糖含量)×100%,以葡萄糖为标准品(校正系数0.9)。多糖总提取率(%)=粗多糖量/（原料粗多糖总含量×投料量）×100%3结果3.1单罐提取正交实验分析，溶媒水量、提取温度和次数对蛹虫草多糖提取的影响最大,提取时间次之，最佳提取条件：温度90℃，溶媒水量20倍，分3次提取，每次3h。经醇沉，两次粗多糖的得率为79.5%，3次得率88.2%。3.2逆流提取温度的选择蛹虫草多糖的罐组式连续逆流提取，料液比在1∶15较为适宜，可以达到

7、单罐两次提取的效果。料液比高，有利于多糖的透出，提取得率也较高（如表1）。当料液比低于1∶10时，提取率显著降低，且提取液粘度高,后处理过滤、离心操作困难。根据多次实验，并结合提取工艺的后处理浓缩、沉淀操作，以1∶15的料液比进行蛹虫草多糖的逆流提取，具有良好的操作性和经济性。同时对该设置的不同提取瓶数组合，对虫草多糖的提取率比较。结果发现，采用5罐组合,料液比为1∶15情况下，得到的虫草多糖提取