正交实验法优选莲子心生物碱的提取工艺

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1、正交实验法优选莲子心生物碱的提取工艺作者：曾建伟，熊学敏，吴锦忠【摘要】目的优选莲子心生物碱的最佳提取工艺。方法以紫外分光光度法测定生物碱的含量，采用正交实验法对莲子心的提取工艺进行优选。结果最佳提取工艺为：药材粉碎成粗粉，用10倍量的甲醇进行回流提取。结论最佳提取工艺可以有效地提取莲子心中的生物碱，工艺操作简单、合理。【关键词】莲子心；生物碱；正交实验法；提取工艺　　Abstract：ObjectiveTooptimizetheextractingprocessofalkaloidsfromplumulanelumbinis．MethodsUltr

2、avioletspectrophotometryizeextractionprocessofalkaloidsfromplumulanelumbinis．ResultsTheoptimumextractingprocedureedicalmaterialesmethanol.ConclusionTheoptimumextractionprocesscanextractthealkaloidsfromplumulanelumbinisandtheextractiontechnologyissimpleandreasonable．　　Keyulanelu

3、mbinis;Alkaloids;OrthogonalTest;ExtractionTechnology　　莲子心为睡莲科植物莲NelumbonuciferaGaertn.的成熟种子中的干燥幼叶及胚根［1］。《本草纲目》记载其性味苦寒，归心肺肾三经，具清心去热，固精止血之功效。现代研究证明，莲子心具有降血压、抗心律失常、抗血小板聚集等心血管药理活性，与其所含生物碱成分有关［2］，譬如莲心碱(Liesinine)、异莲心碱(Isoliensinine)、甲基莲心碱(Neferine)、莲心季铵碱(Lotusine)等。这些生物碱的分子结构中都含有共轭键

4、，具有很强的紫外吸收。因此，本文以紫外分光光度法来测定总生物碱的含量，采用正交实验法对多因素、多水平下的莲子心的提取工艺进行优化选择，获得最佳提取工艺，从而提高莲子心中生物碱的提取率。　　1仪器与试药　　760CRT双光束紫外分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)，KQ250E超声清洗仪(昆山市超声仪器有限公司)。氯仿（上海申博化工有限公司），甲醇（上海振兴化工一厂），其它试剂均为分析纯。莲子心购自黄庆仁栈华氏大药房，经鉴定为莲NelumbonuciferaGaertn.的干燥幼叶及胚根。　　2方法与结果　　2.1正交实验设计　采用L9(34)正交

5、实验表安排莲子心的提取实验，以莲子心生物碱溶液的吸光度为考察指标，选择提取方法、药材粒度和甲醇用量3个因素，每个因素设3个水平。因素水平见表1。正交实验设计及结果见表2。方差分析见表3。　　2.2莲子心生物碱的提取　取莲子心药材（粉末）10g，按表2安排莲子心的提取实验。用甲醇进行提取，提取液回收甲醇蒸干，残渣用1%盐酸50ml使溶解，过滤，滤液用浓氨水调pH至9～10；再用氯仿萃取2次，40ml/次；合并氯仿层，转移到100ml容量瓶中，并用氯仿定容至刻度。　　表1因素水平（略）　　表2L9(34)正交实验设计及结果（略）　　表3方差分析（略）　　

6、2.3莲子心生物碱的含量测定　对莲子心生物碱溶液在200～400nm范围内进行紫外扫描，发现有两个吸收峰，但最大吸收波长在277nm处，故选择在277nm处的吸光度作为莲子心生物碱含量测定结果。　　　2.4结果分析　　2.4.1直观分析由表2知，RA＞RC＞RB，即A为主要因素，其次为C，B；再根据Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ值的大小确定水平：依次为A(3)，B(3)，C(3)。由于莲子心药材粒度越细，粉碎越困难，而2，3水平结果相差不大，所以B因素选择2水平。故初步确定莲子心生物碱的最佳提取工艺暂定为：A3B2C3。　　2.4.2方差分析直观分析的结论是否可靠，需经

7、方差分析后才能确定。由表3知，A因素具有显著性差异，而B，C两个因素均无显著性差异。进一步确定影响莲子心生物碱提取率的关键因素是A，即提取方法应选择回流提取；药材粒度对生物碱提取率既无明显影响，则选择粉碎容易的操作，即粉碎成粗粉即可；提取溶剂的用量对生物碱提取率亦无显著性影响，从节约溶剂用量出发，方法甲醇用量宜选择10倍量为佳。综上所述，莲子心生物碱的最佳提取工艺确定为：A3B2C2，即药材粉碎成粗粉，用10倍量的甲醇进行回流提取。　　2.5验证实验　称取药材按A3B2C2进行验证实验，结果与正交试验结果吻合，说明工艺稳定可行。　　3讨论　　莲子心中

8、含有大量的叶绿素，提取前宜先用石油醚对药材进行前处理，去除叶绿素等杂质。　　由于紫外吸收具有加和性，故选择测