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1、肝细胞癌中潜伏膜蛋白论文陈淑勤,高凌云,汪晓军,袁芳平【关键词】癌,肝细胞;,膜蛋白质类;,免疫细胞化学摘要:目的探讨EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)在肝细胞癌(HCC)中的表达及意义。方法应用免疫组织化学SP法,对石蜡包埋的50例HCC组织(HCC组)和10例正常肝组织(对照组)标本检测LMP1的表达。结果(1)LMP1阳性表达率HCC癌组织(38%)和癌旁肝硬化组织(38.9%)均高于癌旁非肝硬化组织和正常对照组(均为0,P0.05);(2)HCC癌组织中LMP1阳性表达率在Ⅲ~Ⅳ(51.7%)高于Ⅰ~Ⅱ期(19.0%
2、,P0.05),有门静脉癌栓形成(50%)高于无门静脉癌栓形成(16.7%,P0.05)。结论EB病毒LMP1与HCC病期进展及有无门静脉癌栓形成密切相关,可作为估计HCC患者预后的参考指标。关键词:癌,.freel连续切片。一抗鼠抗人LMP1单克隆抗体(丹麦Dako公司)。工作浓度1∶50、超敏SP(鼠)试剂盒与液体DAB酶底物试剂盒(福州迈新生物技术开发有限公司)。石蜡切片经脱蜡水化后,滴加一抗前行抗原修复,用高压法及H2O2甲醇去除内源性生物素。常规SP法(按试剂盒说明书步骤),DAB显色,苏木精对比染色。以已知阳性
3、的鼻咽癌组织切片作阳性对照,以PBS缓冲液代替一抗作阴性对照。1.3结果判定按半定量方法判定其表达强度,阳性强度:无着色为0,淡黄色1,棕黄色2,棕褐色3;阳性细胞数(面积):无着色为0,着色面积1/3为1,1/3~2/3为2,2/3为3,两项结果相加≥3为阳性。1.4统计学处理采用SPSS10.0卡方检验，P0.05为差别有统计学意义。2结果2.1LMP1蛋白在HCC癌组织、癌旁肝组织、正常肝组织中的表达强度及分布方式LMP1阳性定位于细胞质中。HCC癌组织阳性癌细胞表达强度中等或稍弱,呈灶性或片块分布(图1),部分在癌
4、巢边缘呈强阳性表达,表达阳性的癌组织间质中淋巴细胞多见灶性表达。HCC癌旁肝组织肝硬化区域表达呈弥漫或片块分布,非肝硬化区域未见阳性表达。正常肝组织未见阳性表达。阳性信号位于肿瘤细胞质内,呈棕黄色颗粒状.图1肝细胞癌癌组织潜伏膜蛋白1免疫组织化学表达(×200)（略）Fig1TheexpressionofLMP1inHCCmunohistochemistry(×200)2.2LMP1蛋白在HCC癌组织、癌旁肝组织、正常肝组织中的表达阳性率LMP1蛋白在HCC癌组织和癌旁肝硬化组织中的表达阳性率高于癌旁非肝硬化组织和正常对照
5、组(P0.05),癌旁肝硬化组织与癌区肝组织表达阳性率无差异(P0.05,表1)。表1潜伏膜蛋白1在肝细胞癌癌组织、癌旁肝组织及正常肝组织的表达（略）Tab1ThepositiveexpressionrateofLMP1inHCC,pericarcinomatoushepaticcirrhosisandnormallivertissues表中数据为例数.LMP1:EB病毒潜伏膜蛋白1;HCC:原发性肝细胞癌.与对照组比较,☆:P0.05;与癌旁非肝硬化比较,#:P0.05.2.3HCC癌组织LMP1蛋白的表达与临床病理特征
6、的关系LMP1蛋白的表达与HCC患者性别、年龄以及肿瘤组织分化程度无明显关系,但与临床分期和有无门静脉癌栓形成密切相关(P0.05,表2)。表2肝细胞癌癌组织潜伏膜蛋白1的表达与临床病理特征的关系（略）Tab2TherelationshipbetericanhepatocellularcarcinomaJ.AmJPathol,2001,159(4):12871292.2JunyingJ,HerrmannK,DaviesG,etal.AbsenceofEpsteinBarrvirusDNAinthetumorcellsofE
7、uropeanhepatocellularcarcinomaJ.Virology,2003,306(2):236243.3SugaatissuesfromhepatitisCpositivepatientsJ.ScandJGastroenterol,2000,35(9):981984.4郝瑞安,胡志坤,陈杨东,等.原位PCR法定位检测原发性肝细胞性肝癌组织中EB病毒核酸的临床意义J.四川肿瘤防治,2004,17(4):223224.5Li,etal.EpsteinBarrvirusinhepatocellularcarci
8、nogenesisJ.WorldJGastroenterol,2004,10(23):34093413.6江培洲,沈新明,吕丽春,等.细胞间接触是EB病毒自发感染人类上皮细胞的有效途径J.中国病毒学,2004,19(1):15.
