生物反应器制备prrsv呼吸征病毒抗体概述

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1、生物反应器制备PRRSV呼吸征病毒抗体概述-->第一篇文献综述1猪繁殖与呼吸综合征概述猪繁殖与呼吸综合征(PRRS）俗称“猪蓝耳病”。该病主要引起怀孕母猪流产、早产、死胎和木乃伊胎等繁殖障碍，而仔猪和育肥猪主要表现为呼吸道症状。PRRSV引起的感染猪机体产生免疫抑制，导致猪体对其它致病因子的免疫力下降，从而引起临床上混合感染的发生。而且该病的亚临床感染猪在临床上与健康猪只区分困难，或成为病源传播和该病暴发的潜在威胁。近年来，猪蓝耳病的暴发蔓延，给世界各国养猪业造成了巨大的经济损失，因而被OIE列为B类动物疫病，在我国亦被农业部规定

2、为二类动物疫病[1]。1987年，猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）首次在美国发现，随后经过短短几年，迅速流行至加拿大、德国、荷兰等北美和欧洲国家，并先后引起暴发[2]。此后，德国和美国学者也相继从本国病例中分离出类似病毒。通过对这种病毒的形态结构、基因组以及抗原性等进行研究分析后，人们发现该病毒的多种生物学性质与其它病毒存在较大差异，是一种新发现的病毒。自人类首次发现该病后不到30年的时间里，目前该病已在全球范围内广泛传播。该病传播速度快，尤其在养殖技术的不断进步、养殖规模不断提高的今天，猪群养殖密度高、流动速度频繁，如果不能有效防

3、控，极易引起本病的暴发流行。2001年6月以来，该病在我国华东地区多个省份开始流行传播，至今已在我国大陆地区多次暴发流行。2006年6月下旬，我国的湖南、江西、安徽、江苏、浙江、湖北等省多个区域局部开始流行,引起了国内外的广泛关注[5]。据报道，当时江西、湖北、湖南、安徽、福建、江苏、浙江、河南、广西等多个省份的一些养猪比较集中的地区爆发一种以高烧、厌食、呼吸困难、嗜睡等为主要症状的传染病。这一疫病以传播速度快、死亡率高、治愈率低为特征，造成大批猪只死亡。1.1病原学而且发病猪场发病率和致死率很高，有的猪场基本死光。此次不明原因的

4、“猪无名高热”疫情不仅给猪场和养猪户造成了严重损失，也给我国养猪业带来严峻挑战，引起了政府部门的高度重视。经农业部组织有关单位和专家开展系统而细致的科研工作，通过对疫病的流行病学调查、病原分离鉴定、动物试验等一系列科技攻关，最终确定此次流行的猪无名高热病为猪繁殖与呼吸综合征变异病毒引起的高致病性猪繁殖与呼吸综合征，俗称高致病性猪蓝耳病[6]。以下将对PRRS（猪蓝耳病）在病原学、流行病学、临床症状和病理变化、诊断检测及疫苗研究等方面进行简要概述。另外，用稀释的抗PRRSV血清对病毒进行预先处理，然后再接种细胞，病毒对猪肺泡巨噬细胞

5、的感染性有了明显增强，这同样也证明了ADE的存在[8]。PRRSV对多种巨噬细胞具有亲噬性，如猪肺泡巨噬细胞(PAM)、外周血单核细胞、肺血管内巨噬细胞(PMI)等。此外，病毒能在猪脾巨噬细胞、脑小胶质细胞以及传代细胞系MA-104、Marc-145、CL2621和CRL1117上感染增殖，因而这些细胞系常用于病毒的继代培养[9]。1.2流行病学猪是唯一能感染PRRSV并表现出临床症状的动物，不同品种、年龄、性别的猪均可感染，但感染性高低具有一定差异。试验表明，一些禽类如绿头鸭、珍珠鸡也可产生亚临床感染，其中绿头鸭对PRRSV特别

6、易感[22]。病毒主要侵害繁殖母猪和仔猪，引起严重的母猪繁殖障碍和仔猪的呼吸道疾病，育肥猪感染症状则较为温和。PRRS感染猪，包括潜伏感染猪是本病的主要传染源。感染猪可通过其唾液、鼻腔分泌物、精液、粪尿以及乳汁等方式向外排毒。可以从PRRS感染猪的口咽样品中分离出PRRSV这一事实表明，扁桃体在PRRS侵染宿主过程中，扮演重要角色。PRRS一般呈地方流行性，传染性很强，传播迅速，可持续2~4个月。PRRS传播途径多样化，主要有呼吸道水平传播[23]和胎盘垂直传播[24]。其中空气传播是一个重要途径，PRRSV能通过空气从感染猪群传

7、播给易感猪群[25]。有数据表明，离PRRS暴发点500m以内的猪场45%都受到感染，而1～2km处仅有2%被感染[26]。然而，也有人认为病毒在空气中传播能达20km以外的地区。种公猪的精液也是本病重要传染源。PRRS发生的季节性不明显，一年四季均可发病。一般在潮湿、高温、低温或通风不良的环境因素刺激下，可促使隐性感染猪群发病。.............2大规模动物细胞培养技术概述2.1细胞生物反应器的种类、应用和发展传统的动物细胞规模化培养技术以转瓶培养为主，主要用于贴壁依赖性细胞的单层贴壁培养。这种细胞培养方法存在资源消耗大

8、、生产效率低、自动化水平低、操作过程不可控等一系列缺点。随着生物制品生产规模的不断扩大和工艺水平的不断提高，显然传统的转瓶培养模式已不能满足这一要求，而生物反应器细胞培养技术的应用正适应了工业化大规模细胞培养的客观需要。最早应用生物反应器进行大规模