乙草胺对生物的急性毒理研究论文

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1、乙草胺对生物的急性毒理研究论文【摘要】目的研究乙草胺对泥鳅的的毒害作用,为鱼类养殖和影响人类身体健康的环境监测提供依据。方法对泥鳅进行了乙草胺急、慢性毒性试验。结果安全浓度为1.41μl/L。在乙草胺污染的水体中残存的个体,.freelentalmonitoring.MethodsApairofacetochloracuteandchronictoxicitytestsforloachutationrateintheacetochloruchhigherthanthatinnormalutationrate.【Keyalies乙草胺(acetochlor

2、)是酰胺类最具代表性的、我国使用最多的3种除草剂中的一种[1]。乙草胺原药在我国的使用量已超过107kg[2]。自1994年美国环保局EPA批准乙草胺有条件注册使用以来,乙草胺在美国的使用量也迅速增加,1996年美国的乙草胺使用量已经达到1.35×107kg。据报道[3],美国的浅层地下水和塞纳河水中乙草胺的检出量为0.05~0.17μg/L。众所周知,农药自身通过其在环境中的转化产物直接或间接地影响人类的身体健康。采取生物标志物来对乙草胺这种低毒、长期的污染物进行合理地评价是一值得探讨的问题。泥鳅(Misgurnusanguillicadatus)属鱼

3、纲.freel×25cm×25㎝,充气泵15个,中型塑料水桶6个。乙草胺为江苏昆山化工厂生产。1.2实验鱼养殖与分组实验用水为阳光曝气7d的自来水,水温为(22±1)℃,pH7.4左右。在消毒好的水桶中暂养泥鳅若干尾,以供整个试验所需。鱼缸中水量为50cm×25cm×20cm。每个鱼缸中投放30尾鱼暂养,每天上午10:00换一次水。发现死亡的要及时捞出。泥鳅暂养一周后,在每个鱼缸中挑选健康活泼,体表无损、个头均等的个体10尾继续试验,采用完全随机方法进行分组。1.3半数致死浓度和安全浓度的测定方法通过预试验,设计3.4、3.6、3.8、4.0、4.2、4

4、.6、4.8、5.0μl/L的药液共8个浓度组,每个浓度放10尾鱼。每个鱼缸中按设计浓度加入药液,外设一个鱼缸用曝气自来水做对照。分别记录24、48h各浓度的泥鳅死亡数目。根据加权概率法计算半数致死浓度TLm,并根据以下公式计算安全浓度。安全浓度=TLm48×0.3(TLm24/TLm48)21.4对红细胞核异常的诱导作用血涂片的制备以24h内泥鳅不出现死亡和明显异常(如形态、行为异常等)为标准,确定最高染毒浓度为2.0μl/L。以2.0μl/L为标准,依次以1/2浓度梯度递减,确定5个试验组。由此,将乙草胺用曝晒好的自来水配制成2.0、1.0、0.5、

5、0.25、0.125μl/L5个浓度组,分别为最高使用浓度的1/1000、1/2000、1/4000、1/8000、1/16000。另设一不加乙草胺的对照组。对照组和每一试验组均投放10尾泥鳅,每24h更换一次处理液。5个鱼缸中按设计浓度加入药液,分别在24、48、96h时从各浓度的处理液中随机取2条泥鳅断尾取血,制作血涂片,每组制作两张。涂片先用无水乙醇固定3min,再浸入新鲜配制的姬姆萨染色液中染30min,用水冲洗后在空气中晾干。对照组按同样步骤制作血涂片两张。将血涂片置于油镜下观察血红细胞形态有无畸变,记录异常数。红细胞异常的判断按照娄允东等[4

6、]的标准,包括微核、核空泡、核凸出、核内凹、双核等。每张片观察3000个左右。统计微核及核异常细胞率,结果以千分率(‰)表示。选取红细胞微核和核异常的经显微摄影拍照。微核及核异常鉴别见薛开先等[5]。采用二项分布的单样本检验对统计结果进行分析。微核细胞率=带有微核的细胞数/观察的细胞总数×1000‰核异常细胞率=具有核异常(除微核外)的细胞总数/观察的细胞总数×1000‰总核异常细胞率=微核细胞率+核异常细胞率2结果2.1泥鳅在乙草胺中的染毒试验反应泥鳅在放入染毒液后呈现不安游动和上窜的现象,几分钟后趋于平静。浓度越高,不安现象越长。5h后泥鳅个体开始出

7、现上颌溃烂,有的出现大量出血点、肛门外翻、体壁变薄等体表变化。死前1min左右围绕缸壁做剧烈运动,继而死亡。死后体表出现粘液,但全身未见充血现象。2.2半数致死浓度和安全浓度的计算每染毒浓度各放10尾鱼,染毒24h泥鳅死亡数见表1。表1染毒试验泥鳅死亡情况采用加权概率单位法,计算24h急性中毒试验的半数致死量为4.7μl/L;95%置信区间为(4.5μl/L,4.9μl/L)。48h中毒试验的半数致死量为4.4μl/L;95%置信区间为(4.1μl/L,4.6μl/L)。安全浓度=TLm48×0.3(TLm24/TLm48)2=(4.4×0.3)÷(4.

8、7/4.4)2=1.41(μl/L)2.3乙草胺污染液对泥鳅红细胞核异常的诱导作

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