散斑竹根七的组织培养与快速繁殖体系的建立

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1、散斑竹根七的组织培养与快速繁殖体系的建立蒋天仪１，唐敏１，阳淑１，王波２，石大兴３（１．成都农业科技职业学院，成都６１１１３０；２．四川工程职业技术学院，四川德阳６１８０００；３．四川农业大学林学院，四川雅安６２５０１４）摘要：以散斑竹根七［Ｄｉｓｐｏｒｏｐｓｉｓａｓｐｅｒａ（Ｈｕａ）Ｅｎｇｌ．ｅｘＫｒａｕｓｅ］的嫩茎段作为外植体，研究了其组织培养和快速繁殖体系。结果表明，外植体预处理后，经过７５％的乙醇消毒２０ｓ，再用０．１％ＨｇＣｌ２处理６ｍｉｎ的灭菌效果最好，启动率达到７８．４0％，污染率仅为２３．７５％

2、。初代培养最适宜的培养基是ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋２，４－Ｄ０．０１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ；ＭＳ＋６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ１．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ适用于继代增殖培养，丛生芽的增殖系数达到６．１0；适宜生根的培养基为ＮＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋１／２ＭＳ，生根率达到９６．１３％。..关键词：散斑竹根七［Ｄｉｓｐｏｒｏｐｓｉｓａｓｐｅｒａ（Ｈｕａ）Ｅｎｇｌ．ｅｘＫｒａｕｓｅ］；组织培养；快速繁殖体系中图分类号：Q943.1文献

3、标识码：A：0439－８114（２０15）16－4070-03DOI:10.14088/j.ki.issn0439-8114.2015.16.062收稿日期：２０１５－０３－２５基金项目：四川省重点学科建设项目（ＳＺＤ０４１９）简介：蒋天仪（１９８２－），女，四川成都人，讲师，硕士，主要从事观赏园艺植物的研究，（）０２８－８２７３５００８（电子信箱）１２８４５９５８＠ｑｑ．ｃｏｍ。散斑竹根七［Ｄｉｓｐｏｒｏｐｓｉｓａｓｐｅｒａ（Ｈｕａ）Ｅｎｇｌ．ｅｘＫｒａｕｓｅ］是百合科竹根七属植物，为多年生草本［１］，其叶厚

4、纸质，花黄绿色，具紫色斑点，花被钟状［２］，春季开花，花朵俯垂，枝形优美。该种原产于林下、阴蔽山谷或溪边，是一种耐阴性很好的植物，可应用于风景林地下或建筑边缘物作地被植物，也可盆栽观赏［３］。地被植物在园林中的应用量一般很大，快速繁殖是满足园林应用的一个方面，而工厂化生产是保证苗木整齐的另一个方面。目前，工厂化生产种苗的公司并不多，专业生产地被植物的更少［４，５］。１材料与方法１．１试验材料散斑竹根七植株采自四川省雅安市的周边山上，采回后种植于苗圃，选在５月取材，剪取３～４ｃｍ的带芽茎段作为外植体。１．２试验方

5、法１．２．１外植体表面灭菌将外植体在加有洗衣粉的洗涤液中浸泡１０ｍｉｎ，接着用自来水冲洗２～３次，然后放入７５％乙醇中处理２０ｓ后用无菌水冲洗３次，再用０．１％ＨｇＣｌ２溶液分别处理３、６和９ｍｉｎ，期间不停地振荡，最后使用无菌水冲洗５次。每处理接种２０个外植体，重复３次，灭菌后的外植体接入启动培养基先暗培养７ｄ，再进行光照培养（１２ｈ/ｄ），３５ｄ后统计启动率和污染率。１．２．２初代培养将处理好的带芽嫩茎段作为外植体进行接种，基本培养基为ＭＳ。设置基本培养基ＭＳ，加入６－ＢＡ（０、０．５、１．０、２．０ｍｇ／

6、Ｌ）、２，４－Ｄ（０．０１、０．０５、０．１、０．５ｍｇ／Ｌ）、ＮＡＡ（０、０．０５、０．１、０．５ｍｇ／Ｌ）和ＩＡＡ（０、０．１、０．５、１．０ｍｇ／Ｌ），共１６个处理。每处理接种１０株外植体，重复３次，培养３０ｄ观察统计芽启动率。１．２．３继代增殖培养将初代培养获得的茎段丛生芽切割为带１个芽的小块，转接到继代增殖培养基上，以ＭＳ为基本培养基，加入６－ＢＡ（０．５、１．０、２．０ｍｇ／Ｌ）、ＫＴ（０．５、１．０、１．５ｍｇ／Ｌ）、ＮＡＡ（０．０１、０．１、０．２ｍｇ／Ｌ）和ＩＢＡ（０．１、０．５、１．０ｍｇ／

7、Ｌ），共１２个处理。每个处理接种２０株外植体，重复３次，４０ｄ后统计增殖系数及有效苗数。１．２．４生根培养在增殖培养中选取高约３ｃｍ的健壮丛生芽，切割成单苗，接种于生根培养基中，基本培养基为ＭＳ，加入ＮＡＡ（０．１、０．５、１．０ｍｇ／Ｌ）、ＩＢＡ（０．０５、０．１、０．５ｍｇ／Ｌ）和ＭＳ培养基（ＭＳ、１／２ＭＳ、１／４ＭＳ），共９个处理。每个处理接种２０株外植体，重复３次，４０ｄ后观察统计生根率。２结果与分析２．１不同表面灭菌方式对灭菌效果的影响对散斑竹根七在不同灭菌时间处理中的启动率和污染率进行显著性差异Ｓ

8、ＳＲ检验，结果见表１。从表１中可以看出，随着０．１％ＨｇＣｌ２处理时间的增加，污染率逐渐降低，启动率则表现为先上升后下降。处理３ｍｉｎ时，外植体启动率较高，为７６．３９％，但污染率也高（４８．６１％）；处理６ｍｉｎ时启动率最高，达到７８．４0％，污染率较低，为２３．７５％。而随着灭菌处理的时间延长，污染率降至最低（１４．２９％），但启动率仅有５１．２６％，为各处理中最低。综合来看，采用