牡丹组织培养与快速繁殖

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1、摘要本研究以不同品种牡丹的鳞芽为外植体，探讨了不同生长调节物质和不同环境因子在鳞芽的萌发、增殖以及生根过程中的作用，分析不同培养过程中主要影响因子有效浓度的范围，并进一步对生根试管苗从显微结构上进行了观察研究；同时又以中原牡丹品种“风丹”幼胚为外植体，初步探讨了在牡丹愈伤组织的诱导、增殖分化过程中主要的影响因子及有效范围浓度，以此建立起牡丹幼胚培养及植株再生体系，为提高其繁殖系数、加快规模化育苗速度、进一步利用生物技术对其品种进行改良等研究奠定基础。结果如下：1．以“朱砂垒”磷芽和“海黄”茎段为材料，对牡丹外植体消毒方法进行了研究。结果表明，70％酒精对牡丹外植体损伤较大，在对牡丹外

2、植体进行消毒处理时，只需要用0．1％HgCl2，根据取材时间及材料幼嫩程度的不同，牡丹鳞芽消毒时长以8～10min为宜，叶柄以5～8min为佳。2．以“朱砂垒”、“脂红”、“映金红”三个品种的鳞芽为材料，分别比较不同的生长调节物质(IAA、6-BA、GA3)对三种牡丹鳞芽萌发的影响，结果表明：不同的生长调节物质对不同品种鳞芽萌发率的影响不同，6一BA对三个不同品种鳞芽萌发的影响都比较明显，低浓度或者不加6-BA的培养基更利于提高牡丹鳞芽的萌发率，培养基MS+6mmoFLCa'“'+IAA0．5mg·L1+GA31．0mg·L-1比较适合鳞芽的萌发。3．把8个不同的品种，即“风丹”、“

3、朱砂垒”、“璎珞宝珠”、“乌龙捧盛”、“洛阳红”、“映金红”、“脂红”和“十八号”的鳞芽分别在相同培养条件下进行诱导培养，结果表明8个品种之间萌发率的差异依次为：“朱砂垒”>“脂红”>“璎珞宝珠”>“乌龙捧盛”>“映金红”>“风丹”>“十八号”>“洛阳红”，其中以“朱砂垒”的萌芽率最高，为85％；“洛阳红”最差，萌芽率仅为25％。4．利用正交设计进行朱砂垒试管苗增殖试验研究，结果表明GA3和6-BA是“朱砂垒”试管苗增殖过程的重要的生长调节物质，同时，附加0．3mg·L1的KT可以明显的提高“朱砂垒”增殖培养的增殖系数，但当附加的KT的浓度达到0．5mg·L1以上时，又会使“朱砂垒”

4、试管苗的增殖受到一定的抑制作用。5．以“朱砂垒”试管苗为材料，利用正交设计，进行生根诱导试验。通过生根系数、平均根数及平均根长等生长指标研究发现：单一生长物质IBA不能诱导“朱砂垒”试管苗根的发生，必须适当的附加IAA或者ABT才能诱导生根。蔗糖和FA对“朱砂垒”试管苗生根系数及平均根数也有显著的影响作用，并且，FA和IB^的浓度水平对试管苗的平均根长有很大的影响；从生根系数、平均根数及平均根长三个指标综合分析，培养基1．／2MS+6mmol／LCa2++IBA2．0mg·L1+IAAO．5rag·L1+FAlOg·I_1+ABT0．5mg·L1+蔗糖309·U1更有利于“朱砂垒”试

5、管苗根的诱导。●6．以“风丹”幼胚为材料，进行牡丹愈伤组织的诱导试验，比较不用生长调节物质对牡丹愈伤组织诱导的影响，同时又对牡丹愈伤组织的分化增殖进行了研究。结果表明：NAA、基本培养基类型及2，4．D是影响幼胚出愈率的重要因素，各因素不同的水平间都有很显著的差异；MS+6mlTlOl／Lea2+的基本培养基和高浓度的2，4．D更利于愈伤组织的诱导，而NAA浓度以1．5rag．L．1为宜，过高或者过低的NAA都会对“风丹”幼胚的出愈率有明显的抑制作用；在愈伤组织的增殖分化过程中，KT和6．BA起重要作用，是愈伤组织增殖分化的重要因素。关键词：牡丹，鳞芽，幼胚，茎段，组织培养，快速繁殖

6、ⅡAbstractThestudylakesbudofdifferentspeciespeonyasexplanltodiscussactionofdifferentgrowthregulativemaileranddifferentenviromentalfadoginsproutinginthebuds，multiplicationandrhizogenesis．Andanalysetheeffectivescaleofmajorfactorsindifferentprocess．Furthermoretostudytherhizogenictubeseedlingfrommic

7、rostmclure．Simultaneously,thisstudytakestheimmatureembryoof“P．suffruticosa‘Fengdan’”asexplanttodiscussttheeffectivescaleofmajorfactorsintheEmbryogeniccallusinductionanddifferentiation,toestablishcultureofimmatureembryoofP．suffruti