黑水缬草组织培养与快速繁殖研究

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1、黑水缬草组织培养与快速繁殖研究【摘要】目的对黑水缬草愈伤组织诱导培养基和生长的培养条件进行研究，构建黑水缬草快速繁殖体系。方法通过筛选外植体，添加不同种类及浓度的生长调节剂对黑水缬草进行愈伤组织诱导、芽增殖培养及生根培养。结果诱导愈伤组织适宜培养基：MS+0.5mg/LNAA+5.0mg/L6BA。芽增殖培养以MS+0.2mg/LNAA+10.0mg/L6BA为宜。生根培养以MS+0.1mg/LNAA为佳。结论利用组织培养技术能够实现黑水缬草快速繁殖。【关键词】黑水缬草组织培养快速繁殖　　AbstractObjectiveToprovid

2、esomeneurensisSmir.exKomthroughstudyingonmediumarycultureofdifferentexplants,cultureofclusterbudsandthEirrootingcultureediumoftreatmentbinationsofaddingdifferenthormones.ResultsTheappropriatemediumfordifferentculturestagesg/LNAA+5.0mg/L6BAincalluscultureinduction,MS+0.2mg/

3、LNAA+10.0mg/L6BAindifferentiationandsubcultureofclusterbuds,MS+0.1mg/LNAAinrootingculture.ConclusionRapidpropagationcanbeachievedurensisSmir.exKom.　　KeyurensisSmir.exKom;Tissueculture;Rapidpropagation　　黑水缬草（ValerianaamurensisSmir.exKom）为败酱科（Valerianaceae）缬草属（ValerianaLinn.

4、）多年生草本植物。在我国产于东北，集中分布于长白山及其余脉地区。入药部位为根和根茎。黑水缬草中主要含有环烯醚萜、倍半萜、生物碱和黄酮四大类型化学成分［1］，具有镇静、解痉、抗肿瘤活性、抗抑郁活性等作用，尤其是其倍半萜类和缬草酯类化合物具有很大的利用潜力，有望从中寻找出新型的抗抑郁药和镇静药［2］。目前缬草提取物及其制剂在国际上十分畅销，销售额列植物药前10名［3］。　　我国多利用野生缬草资源，不利于大规模生产。由于近年旅游开发以及自然环境的破坏和无节制的采挖，野生状态的缬草资源已急速下降。又由于缬草属植物为多年生草本，自然生长十分缓慢，野生资

5、源更趋于枯竭。开展黑水缬草的组织培养及快速繁殖的研究，就显得更为迫切和重要。而关于缬草属植物的组织培养研究有少数报道，陈建荣等［4］对诱导缬草愈伤组织作了初步研究。经查阅　　表1不同外植体对愈伤组织诱导的影响（略）　　2.2不同植物生长调节剂对黑水缬草愈伤组织诱导和生长的影响考察了不同浓度配比的NAA和6-BA对愈伤组织诱导和组织生长的影响。见表2。　　表2NAA和6-BA不同浓度的组合（略）　　初次培养有多类型的愈伤组织产生，继代后不同类型愈伤组织再生能力表现不同。初次培养产生的愈伤组织，质地上有疏松、坚硬，颜色有白色、淡黄色、淡绿色、深绿

6、色。其中C系列培养基长势较理想（见表3）。C4号培养基愈伤组织结构致密,表面光滑,继代后愈伤组织保持旺盛生长，培养25d后可见白色根形成。C1号培养基继代后生长正常，愈伤组织质地适中，长期培养未见根分化，这种特征的愈伤组织分生能力较强，可用作细胞培养。　　表3C系列配方对茎尖愈伤组织生长的影响（略）　　2.3节间茎段丛生芽的诱导和苗增殖培养采用不同浓度配比的6-BA和NAA对黑水缬草带节间的茎段进行诱导。结果表明，经过30d的培养，部分培养基中节间部位长芽。其中，以B5号培养基长芽的时间较短，且生长速度较快。茎段在培养起始时即开始膨大,并在基

7、部出现较多绿色小点,随着植株的生长分化出小芽,幼芽数逐渐增多形成芽丛，将丛生芽切割后转接到不同浓度配比的6-BA和NAA培养基中，其中仍以B5号培养基芽增殖效果为好。　　2.4生根培养当无根苗长至1cm以上时，转接到MS+NAA（0.05，0.10，0.20，0.40mg/L）培养基中诱导生根。其中MS+0.10mg/LNAA培养基中形成的根白色粗壮，且生长快。3周时间便能产生良好的根系。　　3讨论　　3.1外植体对愈伤组织诱导效果的影响在本实验中，黑水缬草茎尖培养后优先愈伤，然后叶柄和茎段剪切端愈伤，最后是叶片破损处愈伤化。这表明分裂旺盛的

8、部位易愈伤化，剪切受损的部位易愈伤化。造成这种差异的原因可能是由于旺盛生长时期的材料内源激素的含量较高，再分化比较容易。因此，在进行愈伤组织诱导时，选用适宜的组织部