新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠肺部hrct及血清细胞因子的影响

新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠肺部hrct及血清细胞因子的影响

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1、新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠肺部HRCT及血清细胞因子的影响【关键词】佐剂性关节炎HRCT细胞因子新风胶囊类风湿性关节炎(RheumatoidarthritisRA)是一种以慢性关节病变为主的自身免疫疾病,可反复迁延多年,最终导致关节畸变及功能丧失[1~2]。然而RA病变并非局限于关节,还常伴有关节以外的其他脏器病变,甚至可引起主要脏器的血管炎而危及生命[3]。因肺含有丰富的结缔组织和血管而更容易受累,且随着RA病程延长,肺受累的机率增高,约11%的RA病人会继发肺间质性病变[4]。细胞因子(cytokines,CK)参与了

2、RA的整个病理过程,在RA的发病中具有促炎、抑炎或刺激、抑制的正负反馈的免疫调控作用。当免疫调节功能失调,CK占优势时,则诱导关节炎症发生或迁延发展。中医研究表明,RA的基本病机为脾虚湿盛、痰瘀互结,采用健脾化湿通络法治疗效果良好,据此研制的中药制剂新风胶囊(药物组成:黄芪、薏苡仁、雷公藤、蜈蚣)应用于临床取得了满意疗效[5~6]。为了进一步探讨新风胶囊的作用机制,本文观察了该药对佐剂性关节炎大鼠肺部HRCT及血清细胞因子TNF-α、IL-10变化的影响,现将研究结果报道如下。1 材料与方法1.1实验材料1.1.1实验动物

3、雄性A公司生产。1.1.3实验仪器ToshibaAstEionCT机:由日本东芝公司生产;TECAN洗板机;TECAN酶标定量测定仪;电动离心沉淀器:由江苏省响水县医疗器械厂生产。1.2实验方法1.2.1动物分组将60只TX)组,雷公藤多苷片(TPT)组,新风胶囊(XFC)组,每组12只。1.2.2造模与给药除正常组外,向每只动物右后足跖皮内注射Freund's完全佐剂0.1mL致炎,造成佐剂性关节炎(adjuvantarthritis,AA)模型[7]。致炎后第19天开始给药,剂量相当于临床用量的10倍。正常组和模型组:

4、给予生理盐水灌胃,1mL/100g体重,1次/d;MTX组:将MTX研成细末,加生理盐水,配制成混悬液(每mL含MTX0.3mg),按1mL/100g体重剂量灌胃,1次/L/100g,1次/d;雷公藤组:将雷公藤多苷片研成细末,加生理盐水,配制成混悬液(每mL含雷公藤多苷1mg),按1mL/100g体重的剂量灌胃,1次/d;新风胶囊组:将新风胶囊去除胶囊壳,加生理盐水,配制成混悬液(每mL含药量0.3g),按1mL/100g体重的剂量灌胃,1次/d。连续给药30d。1.2.3指标观察1.2.3.1足跖肿胀度分别于致炎前、给

5、药前、末次给药后1h用自制容积测定仪测量各组大鼠右后足容积,然后计算给药前肿胀度[=(给药前足容积-致炎前足容积)/致炎前足容积],给药后肿胀度[=(给药后足容积-给药前足容积)/给药前足容积]。1.2.3.2肺部HRCT扫描各组分别随机取2只大鼠,用10%水合氯醛(0.35mL/100g体重)腹腔注射麻醉,仰卧位,进行HRCT扫描,扫描层厚2mm,间隔1mm,螺距3ram,电压120kV,电流50mA,滤波函数FC10/FC81,矩阵512×512,扫描时间0.75秒/圈,扫描范围为全肺,重建时间1秒。1.2.3.3细胞

6、因子测定末次用药24h后,用10%水合氯醛(0.35mL/100g体重)将大鼠腹腔注射麻醉,行腹主动脉采血,将所采血液3000r/min离心5min,取上清液,置-20℃保存待测。TNF-α、IL-10测定采用ELISA法,按试剂盒说明书操作。1.3统计学处理计量资料以(x±s)表示,组间比较用t检验。2结果2.1各组大鼠足跖肿胀度结果比较结果见表1。表1显示:致炎前各组大鼠的足跖肿胀度无明显差异;给药前,模型组、MTX组、TPT组、XFC组大鼠足跖肿胀度显著高于正常组(P<0.01,或P<0.05);给药后,

7、模型组大鼠足跖肿胀度显著高于正常组(P<0.01),MTX组、TPT组、XFC组3组大鼠足跖肿胀度显著低于模型组(P<0.01,或P<0.05),且3组之间无明显差异(P>0.05)。2.2各组大鼠肺部HRCT扫描结果见图1~图5。正常组大鼠肺轮廓清晰,肺纹理分布均匀,肺小叶间隔、间质及小叶结构正常,胸膜正常,交界面规则,无高密度影,血管、支气管束走行自然,边缘锐利,并且由内向外逐渐分支而细。模型组大鼠肺轮廓欠清晰,肺部血管影扩张,边缘模糊且不规则,两肺有索条状密度增高影,邻近胸膜轻度肥厚。MTX组

8、大鼠肺部可见沿着肺纹理分布的斑片状密度增高影,肺血管纹理模糊,边缘不清楚。TPT组大鼠两肺可见多发性结节状及斑片状密度增高影,境界欠清晰。XFC组大鼠肺轮廓清晰,肺纹理分布均匀,部分肺组织显示斑点状密度增高影。2.3各组大鼠血清TNF-α、IL-10比较结果见表2。表2显示:与正常组相比,模型组大鼠血清

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