新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠肺部HRCT及血清细胞因子的影响.doc

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1、新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠肺部HRCT及血清细胞因子的影响【关键词】佐剂性关节炎HRCT细胞因子新风胶囊类风湿性关节炎（RheumatoidarthritisRA）是一种以慢性关节病变为主的自身免疫疾病，可反复迁延多年，最终导致关节畸变及功能丧失［1~2］。然而RA病变并非局限于关节，还常伴有关节以外的其他脏器病变，甚至可引起主要脏器的血管炎而危及生命［3］。因肺含有丰富的结缔组织和血管而更容易受累，且随着RA病程延长，肺受累的机率增高，约11％的RA病人会继发肺间质性病变［4］。细胞因子（cytokines，CK）参与了RA的整个病理过程，在RA的发病中具

2、有促炎、抑炎或刺激、抑制的正负反馈的免疫调控作用。当免疫调节功能失调，CK占优势时，则诱导关节炎症发生或迁延发展。中医研究表明，ＲＡ的基本病机为脾虚湿盛、痰瘀互结，采用健脾化湿通络法治疗效果良好，据此研制的中药制剂新风胶囊（药物组成：黄芪、薏苡仁、雷公藤、蜈蚣）应用于临床取得了满意疗效［5~6］。为了进一步探讨新风胶囊的作用机制，本文观察了该药对佐剂性关节炎大鼠肺部HRCT及血清细胞因子TNF-α、IL-10变化的影响，现将研究结果报道如下。1　材料与方法1.1实验材料1.1.1实验动物雄性Wistar大鼠60只，体重（200±20）ｇ，由安徽省医学科学研究

3、所动物房提供。1.1.2药品与试剂新风胶囊：由安徽中医学院第一附属医院制剂中心提供，院内批号：20051204。甲氨喋呤：2.5mg/片，由上海医药（集团）有限公司信谊制药总厂生产，批号：20050902。雷公藤多苷片：10mg/片，由上海医科大学红旗制药厂生产，批号：20040902。弗氏完全佐剂（Freund＇scompleteadjuvant）：由美国SIGMA公司生产。1.1.3实验仪器ToshibaAsteionCT机：由日本东芝公司生产；TECAN洗板机；TECAN酶标定量测定仪；电动离心沉淀器：由江苏省响水县医疗器械厂生产。1.2实验方法1.2

4、.1动物分组将60只Wistar大鼠随机分为5组：正常组，模型组，甲氨喋呤（MTX）组，雷公藤多苷片（TPT）组，新风胶囊（XFC）组，每组12只。1.2.2造模与给药4除正常组外，向每只动物右后足跖皮内注射Freund＇s完全佐剂0.1mL致炎，造成佐剂性关节炎（adjuvantarthritis，AA）模型［7］。致炎后第19天开始给药，剂量相当于临床用量的10倍。正常组和模型组：给予生理盐水灌胃，1mL/100g体重，1次/d；MTX组：将MTX研成细末，加生理盐水，配制成混悬液（每mL含MTX0.3mg），按1mL/100g体重剂量灌胃，1次/w，未

5、用药期间给予生理盐水灌胃，1mL/100g，1次/d；雷公藤组：将雷公藤多苷片研成细末，加生理盐水，配制成混悬液（每mL含雷公藤多苷1mg），按1mL/100g体重的剂量灌胃，1次/d；新风胶囊组：将新风胶囊去除胶囊壳，加生理盐水，配制成混悬液（每mL含药量0.3g），按1mL/100g体重的剂量灌胃，1次/d。连续给药30d。1.2.3指标观察1.2.3.1足跖肿胀度分别于致炎前、给药前、末次给药后1h用自制容积测定仪测量各组大鼠右后足容积，然后计算给药前肿胀度［=（给药前足容积-致炎前足容积）/致炎前足容积］，给药后肿胀度［=（给药后足容积-给药前足容积

6、）/给药前足容积］。1.2.3.2肺部HRCT扫描各组分别随机取2只大鼠，用10％水合氯醛（0.35mL/100g体重）腹腔注射麻醉，仰卧位，进行HRCT扫描，扫描层厚2mm，间隔1mm，螺距3ram，电压120kV，电流50mA，滤波函数FC10/FC81，矩阵512×512，扫描时间0.75秒/圈，扫描范围为全肺，重建时间1秒。1.2.3.3细胞因子测定末次用药24ｈ后，用10％水合氯醛（0.35mL/100g体重）将大鼠腹腔注射麻醉，行腹主动脉采血，将所采血液3000r/min离心5min，取上清液，置-20℃保存待测。TNF-α、IL-10测定采用E

7、LISA法，按试剂盒说明书操作。1.3统计学处理计量资料以（x±s）表示，组间比较用t检验。2结果2.1各组大鼠足跖肿胀度结果比较结果见表1。表1显示：致炎前各组大鼠的足跖肿胀度无明显差异；给药前，模型组、MTX组、TPT组、XFC组大鼠足跖肿胀度显著高于正常组（Ｐ<0.01，或Ｐ<0.05）；给药后，模型组大鼠足跖肿胀度显著高于正常组（Ｐ<0.01），MTX组、TPT组、XFC组3组大鼠足跖肿胀度显著低于模型组（Ｐ<0.01，或Ｐ<0.05），且3组之间无明显差异（Ｐ>0.05）。2.2各组大鼠肺部HRCT扫描结果4见图

8、1~图5。正常组大鼠肺轮廓清晰，肺纹理分布均匀，肺小