老瓜头生物总碱对佐剂性关节炎大鼠血清中细胞因子及no的影响

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1、老瓜头生物总碱对佐剂性关节炎大鼠血清中细胞因子及NO的影响【摘要】目的观察老瓜头生物总碱对佐剂性关节炎大鼠血清中白细胞介素-1(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)和一氧化氮(NO)含量的影响。方法采用弗氏完全佐剂(CFA)制备大鼠佐剂性关节炎(AA)模型，用放射免疫方法检测大鼠血清中IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-10的含量;用硝酸还原法检测大鼠血清中NO的含量。结果与正常对照组相比，模型组大鼠血清中IL-1β、TNF-α及NO含量升高，IL-4、I

2、L-10含量降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组相比，老瓜头生物总碱能够降低佐剂性关节炎大鼠血清中IL-1β、TNF-α及NO含量，升高IL-4、IL-10含量。结论老瓜头生物总碱的抗炎作用可能与下调致炎因子(IL-1β、TNF-α、NO)，上调抗炎因子(IL-4、IL-10)有关。【关键词】老瓜头生物总碱;佐剂性关节炎;白细胞介素-1β;肿瘤坏死因子;白细胞介素-4;白细胞介素-10老瓜头(CynanchumKomaroviiAI.Iljiniski)系箩摩科鹅绒藤属多年草本生植物，别名牛心朴子，广泛

3、分布于次生沙漠中的半固定沙丘和荒漠流沙区。近年来，国内研究表明其化学成分除含有一些无机元素外，还含有生物碱、挥发油、甙类、黄酮醇类、糖类等化合物。老瓜头提取物有抗炎、抗菌、抗肿瘤、镇痛、止咳、祛痰、平喘等作用[1]。老瓜头生物总碱(TotalAlkaloidofCynanchumKomaroviiAI.Iljiniski,TACKI)是从老瓜头中提取的生物总碱，具有抑制蛋清致大鼠足趾肿胀、大鼠棉球肉芽肿以及角叉菜胶诱导的大鼠气囊滑膜炎等抗炎作用[2]。本研究以大鼠佐剂性关节炎(AdjuvantArthritis,AA)为模

4、型，观察TACKI对大鼠佐剂性关节炎血清细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-10及NO的影响。1材料与方法1.1实验动物Sprague-Dag/片)，弗氏完全佐剂(pleteFreund’sadjuvant,CFA;美国Sigma公司，批号Lot084k8928)，TNF-α、IL-1放免试剂盒购自解放军总医院科技开发中心放免研究所;IL-4、IL-10放免试剂盒购自北京北方生物技术研究所;NO硝酸还原法检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所。1.4方法1.4.1大鼠佐剂性关节炎模型(AdjuvantArthri

5、tis,AA)制备按照文献[3]方法，除正常对照组外，其他各组大鼠右后足常规消毒后，于足跖皮内注射CFA0.1mL致炎。1.4.2分组及给药方法大鼠随机分为6组，每组10只。(1)正常对照组;(2)模型对照组均给予生理盐水灌胃;(3)雷公藤多苷组将雷公藤多苷片研成细末，加生理盐水，配制成混悬液(6.0mg/kg);(4)TACKI高、中、低剂量组(20.0、10.0、5.0mg/kg)，用生理盐水配制，放置1d使其充分溶解，以上药物均以10mL/kg灌胃，每天1次，于致炎后第19天开始给药，连续8d。1.5血清中IL-1β

6、、TNF-α、IL-4、IL-10及NO含量的测定按照试剂盒说明操作。1.6统计学方法实验结果以(±s)表示。应用SPSS11.5软件进行统计学处理，多样本均数间比较采用One-WayANOVA检验，以P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1TACKI对AA大鼠血清TNF-α、IL-1β含量的影响CFA致炎后27d，模型组大鼠血清TNF-α、IL-1β含量明显高于正常对照组(P<0.01);中、高剂量组大鼠血清TNF-α、IL-1β含量均低于模型组(P<0.05或P<0.01)，与雷公藤多苷组相

7、当(P>0.05)，且接近正常对照组水平(P>0.05)，见表1。2.2TACKI对AA大鼠血清IL-4、IL-10含量的影响CFA致炎后27d，模型组大鼠血清IL-4、IL-10含量降低，高剂量组大鼠血清IL-4、IL-10含量高于模型组(P<0.05或P<0.01)，见表1。2.3TACKI对AA大鼠血清中NO含量的影响CFA致炎后27d，模型组大鼠血清中NO含量升高，TACKI中、高剂量组大鼠血清中NO含量明显低于模型组(P<0.01)，其高剂量组低于雷公藤多苷组(P<0.05)，

8、接近正常对照组水平(P>0.05)，见表1。表1TACKI对AA大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-10、NO含量的影响关节炎大鼠的多发性关节病即与NO的过量产生有关[6]，NO可以促进巨噬细胞释放IL-1、TNF-α形成恶性循环而增加RA的临床症状，因此，减少NO可以减轻关节损伤。