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时间:2018-11-21
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1、丹参多酚酸提取工艺的研究论文孟江,周毅生,咸银库,段芳,刘林【摘要】目的优选丹参多酚酸最佳提取工艺。方法以丹参多酚酸B和总丹参多酚酸含量为指标成分,对丹参多酚酸提取工艺进行优选。结果优化工艺为:12倍量30%乙醇回流提取3次,1h/次。丹参多酚酸B和总丹参多酚酸含量分别为57.7%,66.9%。结论该工艺合理.freelizetheextractionprocedureforthesalvianolicacidsofSalviamiltiorrhiza.MethodsTheoptimumconditionsofextractionprocessf
2、orsalvianolicacidsofSalviamiltiorrhizaentaldesign.ResultsTheoptimalextractionprocedureiltiorrhizaes,1hourspertime.ThecontentsofsalvianolicacidBandsalvianolictumpreparativeprocedureisreliable.Salvianolicacidsicbenefit.Keyiltiorrhiza;Salvianolicacids;Extractingprocedure丹参多酚酸是中药
3、材丹参中的水溶性成分,主要成分为丹酚酸、原儿茶醛、原儿茶酸、丹参素、咖啡酸、迷迭香酸等。丹参多酚酸具有显著的抗心肌缺血作用,可降低心脏耗氧量,并能对抗诱导的血小板聚集和抑制血栓的形成。临床试验研究表明,丹参多酚酸对于冠心病、心绞痛,疗效显著、确切,病人使用安全[1]。目前丹参多酚酸是多种丹参制剂的重要原料,其质量好坏与稳定直接关系到制剂的临床疗效。因此本文对丹参多酚酸提取工艺进行优化,以期为对丹参多酚酸制剂的生产开发提供理论依据。1仪器与材料1.1仪器m×4.60mm;流动相为甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59);检测波长:286nm;柱
4、温:30℃;流速:1ml/min;进样体积:20μl,理论塔板数按丹酚酸B计算应不低于2000。2.1.2标准曲线的建立精密称定丹酚酸B对照品5mg,加75%甲醇定容至25ml容量瓶中,得到浓度为0.2052mg/ml的丹酚酸B对照品溶液。分别精密吸取对照品溶液2,4,6,8,10ml,稀释定容至10ml,分别进样10μl,记录色谱图。以色谱峰面积(Y)对丹酚酸B的量(X)作回归,回归方程为:Y=954.41X-60730,R2=0.9994。丹酚酸B在410.4~2052.0μg范围内线性关系良好。2.2丹参总酚酸含量测定标准曲线的建立精密称定
5、原儿茶醛对照品5.02mg,置50ml棕色容量瓶中,加水稀释定容至刻度,即得100.4μg/ml的对照品溶液。分别精密吸取0.2,0.6,1.0,1.4,1.8,2.2,2.6ml,用NaNO2-Al(NO3)3比色法进行比色,测定吸收度,经EXCEL回归软件计算,以原儿茶醛的含量为(X),以吸收度A为(Y)回归方程为:Y=0.0029X-0.007,R2=0.9994,线性范围为20.08~261.04μg。2.3样品含量测定方法2.3.1丹酚酸B的含量取各供试品溶液过0.45μm微孔滤膜,按照丹酚酸B的测定方法进行测定,计算其含量。2.3.2
6、紫外分光光度法测定丹参总酚酸的含量精密分取供试品溶液上清液10ml,水浴蒸至干,加水溶解,加0.1mol/L的HCl溶液稀释定溶于100ml容量瓶中,过滤,取滤液25ml,加入5gNaCl至溶解,等体积的乙醚萃取3次,萃取液在水浴上蒸干,残渣用乙醇溶解定溶于50ml容量瓶中,用NaNO2-Al(NO3)3比色法进行比色,即得吸收度,然后代入标准曲线,即得以原儿茶醛表示的丹参总酚酸的含量。2.4提取溶剂的选择丹参多酚酸可溶于水及不同浓度的甲醇、乙醇溶液[2],为了选择最佳提取溶剂,我们对水、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇作为提取溶剂进行了考察。
7、取100g药材8份,分别加上述4种溶剂加热回流提取3次,30min/次,合并提取液,过滤取上清液。分别按照“2.3”项下计算丹参酚酸B和丹参总酚酸的含量。结果见表1。结果表明,30%乙醇溶液提取丹酚酸B和总丹酚酸含量均较高,因此选择30%乙醇溶液作为提取溶剂。表1不同溶剂提取效果的比较(略)2.5正交实验实施考察最佳提取工艺根据文献报道[3]并结合实际,醇提丹酚酸的影响因素有溶剂用量、提取时间、提取次数,为此选择3因素作为考察因素,并结合生产实际,每因素又选取3个水平,按L9(34)正交表安排实验,以丹参多酚酸B和总丹参酚酸含量作为衡量提取效率的
8、双重客观指标,优选最佳工艺,因素水平安排见表2。表2因素水平(略)最佳提取条件要满足丹参多酚酸B含量高并且总丹参酚酸含量也高,因此采用加
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