血管活性肠肽对暂时性脑缺血大鼠梗死体积的影响

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1、血管活性肠肽对暂时性脑缺血大鼠梗死体积的影响作者：赵朝华　胡晓丹　杨杰　钱亦华　邱芬　刘勇【摘要】　　目的通过活体实验研究血管活性肠肽(VIP)对脑缺血损伤的神经保护作用。方法大鼠侧脑室内注射VIP后，采用大脑中动脉线栓(MCAO)法诱导建立暂时性局部脑缺血模型。通过神经学的评价对MCAO大鼠进行判定和筛选；TTC染色测定大鼠脑梗死体积；双抗夹心ELISA检测血清S100β的含量。结果MCAO后2h大鼠呈现不同程度的神经功能损伤症状。评定为1-2级的仅有2例出现明显脑梗死区，3级的为全部。VIP注射后大鼠脑梗死体积明显缩小，较对照组减少约25%(P<0.05)；血清S100β浓度也明显

2、降低(P<0.05)。结论以神经学评分3级作为MCAO模型成功的判定标准是较为可靠的。VIP脑内注射可明显减小脑缺血后梗死体积，具有神经保护作用。VIP可以降低S100β的含量，这可能涉及到VIP的另一神经保护机制。【关键词】血管活性肠肽；脑缺血；梗死体积；S100β　　Effectsofvasoactiveintestinalpeptideontheinfarctvolume　inrattransientfocalcerebralIschemia　　ABSTRACT:ObjectiveToexploretheneuroprotectiveeffectsofvasoactiveinte

3、stinalpeptide(VIP)onischemicbraininjuryinvivo.MethodsInthepresentstudy,VIPiainalocclusionofmiddlecerebralartery(MACO)for120min.Theevaluationandscreeningofratsedbyneurologicaltesting.Theinfarctvolumechloride(TTC)stain.S100βconcentrationinserumethod.ResultsThedifferentgradesofneurologicalseverityappe

4、aredobviouslyinalltheratsat2hoursafterMCAO.Onlytebyapproximately25%(P<0.05),andthenremarkablydecreasedS100βserumconcentration(P<0.05).ConclusionThegrade3ofneurologicalscoreasastandardtoevaluatesuccessfulocclusionofMCAissatisfactoryandreliable.VIPinjectioncanreducetheinfarctvolumeinaratmodelof

5、focalcerebralischemia.ThepresentstudyprovidesfurtherevidencefortheneuroprotectiveeffectsofVIPinvivo.VIPmaydecreaseS100βserumconcentration,ayinvolveoneofthemechanismsoftheneuroprotectiveeffectofVIP.　　KEYCAO)诱导建立暂时性局部脑缺血大鼠模型。简要手术过程：大鼠做颈部前正中切口，分离暴露右侧颈部血管，用微动脉夹暂时夹闭颈内动脉，结扎颈总动脉和颈外动脉。将头端加热呈光滑椭圆球形的30单股尼龙线

6、(宁波医用缝针厂)经颈外动脉缓慢插入颈内动脉至感到有轻微阻力为止，进线长约18mm左右。手术期间使用电热毯维持大鼠体温在36.5-37.5℃之间。MCAO后2h轻轻抽出尼龙线至颈外动脉结扎处。　　1.4神经学的评价大鼠MCAO后2h参照Bederson等[3]方法进行神经功能损伤程度的评定，即0级：行为正常；1级：提尾悬空左侧前肢屈曲，肩内收；2级：抵抗对侧推力下降，伴前肢屈曲；3级：自发性侧向旋转或运动，伴抵抗对侧推力下降和前肢屈曲。评定为3级者被视为成功脑缺血模型。　　1.5血清标本制备动物于处死前，经右心室取血1.5×10-3L，3000r/min离心10min，吸取上清液，-20℃冻

7、存。　　1.6氯化三苯基四氮唑(TTC)染色VIP组(n=5)和对照组(n=5)大鼠于MCAO后24h处死，断头迅速取脑，置于-20℃冷冻10min后，在脑片床上自前向后行2mm厚连续冠状切片，将切片立即置于预热的20g/LTTC(国药集团化学试剂有限公司的产品)溶液中，于37℃恒温下避光染色30min，随后置于40g/L多聚甲醛溶液中固定24h，照像。　　1.7梗死体积测定将TTC染色照片扫描并存储，使用M