白术茯苓汤各萃取部位对脾虚大鼠血管活性肠肽含量的影响

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1、万方数据实验研究白术茯苓汤各萃取部位对脾虚大鼠血管活性肠肽含量的影响文跃强彭藤贾滚彭成魏华贺晓芳张撩(成都中医药火学，四川成都610075)摘要目的：确定白术茯苓汤下调牌虚大鼠血管活性肠肽(VIP)的有效郝住。方．汝：以大黄、厚朴、枳实加饥饱失常法复制膊气瘟证动物模型。耪逐用苓霹掇槛的有机溶剡萃取的白拳茯苓汤辑镑到的正丁薅零位、乙酸乙酯寄位、拳层。运用拳捉醇沉法分另哇提取的白誊茯苓多糖、麓芩多糖．以茂白术茯攀汤拳煎荆分剐灌胃给药詹观察各圣煮药物霹脾威大鼠肠组织藏血浆VIP的影响。结果：与模型组比较，白术茯苓汤组、正丁醇组均能降低脾虚大鼠VIP水平。蒜中白术茯苓汤对血浆VIP水平的

2、下调更明显。结论：正丁醇部位具有下调脾虚大鼠VIP的作用。荚键词簿震话鸯拳获苓汤VIP实验研究巾图分类号P,289．5文献标识鹤A文章编号1672—397X(2009)05-0073一02自零狭苓汤载予《古今医统夭金》，主治瀵泻～癍。稳臻研究证实一些腹泻为囊症之一的疾病．如肠易激综合征、功能性消化不良、炎症性肠炎等．其血浆戏相应组织器官中血管活性瑟蒎(VasoactiveIntestinalPeptide．VIP)会黢磐裹{l-2l。我嚣{翦期盼研究发现该方对脾虚大鬣瓤浆VIP含蛩精明曩的下溺作用131．本研究基于白术茯苓汤合煎荆对VIP的下调作用优于分煎141．拟用不问极性的有

3、机溶剂举取白术茯答汤．将得到的不竭郄位分测媛察其对耱鑫丈鼠VIP鳃影璃．以礁定该方下凋VIP的裔效部位。为下一步有效缀分的研究提供依据。l实骏材料1．1实验药物造模药物：按蹲朴：枳实：大黄=3：3：2的比例。蓐柃、参{突先浸逢40min。生太蘩漫逮20min，箨孝}、积实凳熬沸lOmin。再下大黄凝煎lOmin，熊液二层纱布过滤，二煎藏沸lOmin．过滤方法同上。合并2次煎液，于60℃水浴浓缩成ioo％(tg／mL)煎渡，4℃保存。自零获苓沥：称载重量隽l：l豹自拳、菝苓垒药耱钹跨。混合浸泡30min后余煎．煎煮3次后合并药液过滤．最后浓缩为浓度O．25dmL的自术茯苓汤药液。正

4、{+黪部位、乙黢乙酯都位觏水层：将t法铡备的内术茯苓沥蒸滚浓缩为浓囊lg／mL的氏零茯苓沥芬漩。霉运掰澎丁醇、乙酸己酯分析纯分别萃取白术茯苓汤药液，旋蒸擢十．最后得到藏丁醇部位、乙酸乙酯部位和水层。按生药0，259／mL浓瘦}}箕。将歪了‘醇鄹位、乙酸乙醚部位和水联溶于羧甲基溶液中，使筵完全溶解。白术茯苓多糖：称取1：1的囱术、茯苓镪药材饮片，首先用石油醚问流脱脂膀．将药材烘叶：．再用水加热浸提2次．合莠拳熬渡。浓缓魏入95％乙醇滠淀多糖，静爨待多糖辑掇。按生药O．25∥mL浓度计算，将自术茯苓多糖溶于蒸馏水中。茯涔多糖：称取茯苓生药材饮片，同上法制成茯苓移糖溶渡备用。l。2实验

5、磅耪SPF缀SD大鬣甜哭，钵黧(180±20)g。臻雄各半．由四川省医学科学院四川省人民医院实验动物研究所基念项目：国家自然科学基套资助(30572296)撵侯，合格证弩：0015593。1．3VIP检测放射免疫{畚(RIA)测定VIP。由四川犬学基础医学院同位索篷检测。2实验方法2。l造模方海SD大鼠64哭．隧橇癸必2组。空盘对照缝8只．脾气虚证模型组56只。所有造模缌大鼠采取隔卜{灌胃造模药物1次。每次4mL／2009体重，喂药当13禁食。饮水不限，次羰粳镯不限。嚷葬42d：空白霹照筑潮生理盐承4mL／2009体燕灌服．隔霹1次．连续42d。2．2实验分组技给药方法造模结柬后

6、．造模组火鼠随机分为7组，每组8只，即模型缀、正丁醇缀、乙酸乙酯缀、水层组、获苓多糖缝、巍零获苓多糖缝、叁零获苓汤组。予繁43d齐鲶灌胃给药治疗。每131次，连续7d。每缀均按生药牵才0．259／mL的浓度配制药液．按4mL／2009体重进行灌胃。2．3标叁采集与处理所有动物处髅赫禁食24h。饮水不限。试验时每哭动秘耀颈霉了钓臻LEDTA及IOp．L挣获藜戆试警取舭2mL。以3000r／min低温离心lOmin。分离m浆，装于1个1．5mL离心试管．冰冻保存待测血浆VIP，，取m后立即处死大鼠．打歼腹腔，自蹶戴f-i2em以上取100mg肠组织l段。在煮沸的生瑾簸承孛煮3min，

7、魏lmol／L酶冻醋酸0．5mL。匀浆。40C缣存l。2h，加1moFL的NaOH0．SmL。中和，离心3000廿'min。30min，取』：清液。装于1．5mL离心试臀，也O℃保存。待测结肠组织VIP。2．4数据统谚各组数掇均采臻(；虹)表示。孀SPSS12。0统计较侔透舒数据处理，荤因素方差分轿。均数闼两瓣眈较。3实验结果3．1动物造横情况造模肟第3d起模型大鼠开始出现饮水减少、灏凌繇矮、食欲下降、终重下降、馋怠、獭动、骞聚堆等搭征；7d后模瑙太鼠相继惠现嗜卧懒动．大便溏．食