白术茯苓汤调控脾虚大鼠血管活性肠肽总多糖的提取工艺研究论文

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1、白术茯苓汤调控脾虚大鼠血管活性肠肽总多糖的提取工艺研究论文彭腾贾波彭成文跃强宴永明张楠贺小芳【摘要】目的研究白术茯苓汤总多糖的提取工艺。方法通过单因素实验及正交实验确定提取总多糖的优化条件,用分光光度法测定总多糖的含量。结果白术茯苓汤总多糖提取的最佳条件是:料液比为1∶30、提取时间为2.0h、提取次数为3次、温度90℃.在此条件下测得白术茯苓汤中总多糖含量为48.25mg/g.结论该方法简便、快速、准确,适用于该复方中总多糖的含量测定。【关键词】白术茯苓汤;总多糖;正交实验;含量测定【Abstra

2、ct】ObjectiveToinvestigatetheextractionprocessofpolysaccharidefromAtractylodesPoriasoup.MethodsTheoptimalconditioninedbytheorthagonalexperimentandsinglefactortest.Polysaccharideseasuredbyspectrophotometry.ResultsExperimentrevealsthatoptimalconditionfor

3、extractionperature:90℃;duration:2hours;times:3times;ratio:1:30(eofpolysaccharidesinAtractylodesPoriasoupis48.25mg/g.ConclusionThemethodissimple,rapidandaccuratefordeterminationofpolysaccharidefromthepound.【Keyent;determination脾气虚证是中医临床常见征候,病变涉及到消化吸收功能障

4、碍、自主神经功能紊乱、内分泌功能失调、免疫功能低下,以及血液系统、运动系统和能量代谢等方面的诸多异常。其中,脾气虚证内分泌激素尤其是胃肠道激素分泌异常是近年来研究的重要内容。白术茯苓汤由白术、茯苓组成,二药配伍运用,始见于张仲景所著《伤寒杂病论》,该方是在“经方配伍规律的文献研究”中发掘整理出的治疗脾胃气虚证、脾虚湿滞证、肝脾不和证等的经典配伍。课题组前期研究结果表明,白术茯苓汤水煎剂能显著下调SD大鼠脾虚动物血管活性肠肽含量的升高[12]。文献报道[3].freelaatractylodisma

5、crocephalae)、茯苓(l容量瓶中,加水补足2ml,用标准曲线的测定方法显色后,以试剂空白为参比,从370~520nm每隔5nm测定一次吸光度,结果测得在490nm处吸光度最大,所以选择测定波长为490nm.2.1.2标准曲线的制备准确称取0.0050g葡萄糖标准,以蒸馏水溶解定容至100ml,得到50μg/ml的葡萄糖标准溶液。分别吸取0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml、0.6ml葡萄糖标准液并以蒸馏水补足2ml,各加入1ml5%苯酚水溶液,摇匀后,分别加入5ml浓

6、硫酸,混合均匀并于室温放置20min后,在490nm处测吸光度,以蒸馏水代替糖溶液作空白,求得葡萄糖标准曲线的回归方程A490=0.023X+0.0106,R2=0.9998(见图1)。图1葡萄糖标准曲线Fig.1Standardcurveofglucose2.1.3白术茯苓汤总多糖的提取与精制取白术、茯苓按临床配比混合均匀后,精密称取样品粉末5g置提取装置中,先以石油醚(60℃~90℃)回流除去脂类(1h),加入90%的乙醇200ml,在85℃下回流,浸提2次,每次2.0h,目的是除去北沙参中的单

7、糖、低聚糖、苷类等醇溶性成分[5]。药渣挥去溶剂后,用水提取多糖,提取液在50℃经减压浓缩至原体积的1/3,.freelin,过滤,定容至100ml,备测。2.2.1.2提取时间的选择称取白术、茯苓按临床配比(1∶1)0.500g经石油醚回流处理的药材15份,加入20ml水,于水浴90℃分别提取1h、2h、3h、4h、5h,过滤、定容至100ml,备测。2.2.1.3提取温度的选择称取白术、茯苓按临床配比(1∶1)0.500g经石油醚回流处理的药材15份,加入20ml水,分别在60℃、70℃、80℃

8、、90℃、100℃提取30min,过滤、定容至100ml,备测。2.2.2白术茯苓汤总多糖提取的最佳组合的选择以1:30为料液比,根据药材性质,拟定影响浸出效果的3个主要因素A(水浴温度)、B(提取时间)、C(提取次数)为优选因素,每个因素3个水平选用L9(34)正交表进行实验(见表1),进一步探索最佳提取参数。表1因素水平表3结果3.1料液比对白术茯苓汤总多糖含量的影响由图2可看出,料液比在1∶10~1∶50之间,从1∶10~1∶30多糖含量随料液比的增加而增加,料

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