诊断级彩超照射后胎鼠脑组织fos蛋白的表达论文

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1、诊断级彩超照射后胎鼠脑组织Fos蛋白的表达论文.freelin和对照组共4组.应用免疫组化方法检测胎鼠脑中Fos蛋白的表达，采用方差分析比较各组间差异.结果照射10min组于胎鼠脑海马及皮层出现散在分布的淡染Fos弱阳性细胞，阳性细胞百分率为（2.61±1.8）%;而照射20min及30min组于海马、皮层及基底节均有密集分布的深染Fos强阳性细胞，阳性细胞百分率分别为（64.39±14.05）%和（71.45±11.73）%，该两组分别与10min组有显著性差异（P0.01）.对照组未观察到着色的Fos阳性细胞.

2、结论诊断剂量的彩超辐照孕鼠20min以上可诱导胎鼠脑组织Fos蛋白高表达.Keyuridae;brain;proto-oncogeneproteinsc-FosAbstract:AIMTostudyoffetalratcouldbestimulatedbydiagnosticcolorDopplerultrasound.METHODSPregnantratsin，20min，30minandcontrolgroup.Immunohischemistrypusandcerebralcortexinthe10mingr

3、oup，pus，inand30mingroups.Thereinandtheothertorethan20minutes.0引言超声在临床上越来越广泛地应用于诊断各方面，超声仪器的更新和发展也向超声场的能量表征参量提出了挑战.传统的表征参量包括Isata（空间平均和时间平均声强），Isppa（空间峰值与脉冲平均声强），Im（空间峰值与最大半周期内的平均声强），-P（峰值负压）等，目前有关超声生物效应的研究也仍沿用上述参量［1-3］.但从1993年美国FDA及许多机构团体建议使用新的标准，即MI（机械指数）和TI（热

4、指数）来提示发射的超声能量所产生的潜在生物效应.本实验采用具有此标准的超声仪器辐照孕鼠，观察其对胎鼠脑组织Fos蛋白的影响.1材料和方法1.1材料健康性成熟SD大鼠20只（本校实验动物中心提供），其中雄性4只，体质量370～420g，雌性16只，体质量300～350g.将雌雄鼠按照21比例合笼后，次日起每日查阴栓及阴道涂片，镜检到活精子之日记为受孕0日，依此推算孕龄.孕鼠在受孕18d接受超声照射，按照照射时间随机分为4组，0（对照组），10，20及30min，每组4只.美国Acuson公司Se-quoia512型彩

5、色超声诊断仪，探头彩色频率3.5MHz，彩色增益50dB，Pm，彩色取样框深度50mm，角度覆盖全部扫查范.全部声学参数由Acuson公司提供.c-fos免疫组化试剂盒及DAB显色剂由博士德公司提供.1.2方法受孕18d的母鼠仰卧固定于木板上，于下腹部外涂耦合剂，沿孕鼠子宫部位的体表投影区缓慢滑行移动.照射时间分别为10，20及30min;对照组进行假照射，条件一律相同.孕鼠辐照后2h用10gL-1戊巴比妥钠4mLkg-1ip麻醉后，剖腹剖宫取胎，每只孕鼠随机取2只胎鼠，迅速断头取出脑组织于40gL-1中性甲醛固定

6、24h.固定后的脑组织常规石蜡包埋连续冠状切片，切片贴于涂有多聚赖氨酸的涂胶片上烘干.组织切片常规脱蜡、梯度酒精至水后，蒸馏水新鲜配制的30mLL-1H2O2孵育10min，水洗，抗原修复液20min，水洗，羊血清封闭20min.c-fos抗体4℃孵育24h，羊抗兔IgG37℃孵育2h，ABC复合物37℃孵育2h.以上各步之间需用0.01molL-1PBS洗涤.DAB显色剂A，B，C各一滴加蒸馏水至1mL，滴加于切片上显色，镜下控制显色程度.常规脱水、透明、封片，光镜下观察，着棕黄色者为阳性细胞.阴性对照组以0.0

7、1molL-1LPBS取代c-fos一抗.统计学处理:每份标本统计3张阳性细胞最多的切片，每张切片统计1个Fos阳性细胞集中的区域，记数每高倍镜视野阳性细胞百分率，取平均值，采用多个样本均数比较的方差分析.2结果超声辐照10min组于胎鼠脑海马、皮层出现散在分布的淡染Fos弱阳性细胞，而辐照20及30min组可于脑海马、皮层及基底节见到密集分布的深染Fos蛋白强阳性细胞数量明显增多，其细胞记数均与10min组有明显差异（P0.01）），并且随辐照时间延长阳性细胞数有所增加（Tab1）.对照组胎鼠脑组织切片中未见到着

8、色的Fos阳性细胞.免疫组化阴性对照组也无着色的Fos阳性细胞.表1胎鼠脑组织Fos阳性细胞百分率结果（略）3讨论十几年来，临床应用的超声仪器输出能量在逐渐增高，其热机制及非热机制所致的潜在生物效应也在逐步提高，因而美国FDA要求新型产科超声仪器必须显示MI及TI［4］.MI=Pr.3/f，即以0.3dB/cmMHz减小的峰值压强.多种资料表明非热机制，如空