资源描述：
《诊断剂量彩超对胎鼠脑神经细胞凋亡的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、诊断剂量彩超对胎鼠脑神经细胞凋亡的影响作者：段云友程颜苓曹铁生田蓉【关键词】彩色多普勒超声关键词：彩色多普勒超声;胎鼠;神经细胞;凋亡0引言二维超声照射与动物器官组织凋亡的研究已冇报道[1],但彩色多普勒超声（彩超）对胚胎器官凋亡的研究未见报道，我们用诊断剂量彩超照射宫内胎鼠，探讨其对胎鼠中枢神经元凋亡的影响.1材料和方法健康成熟雌性大鼠20只，受孕第18日接受超声照射（美国Acuson公司Sequoia512型彩色超声诊断仪，探头频率3.5MHz,）,按照射时间随机分为4组，Omin（对照组）、lOmin,20min及30min,每组5只•对
2、照组进行假照射，其余条件一律相同•辐照后24h剖宫取胎，断头取脑组织固定，常规石蜡包埋连续冠状切片••在光镜检查的取材部位取皮质，于20mL・L-l戊二醛屮4°C固泄，常规包埋，切片，染色，采用JIM-2000型透射电镜观察摄片•使用中国BOSTER公司提供TUNEL试剂盒染色.2结果2.1TUNEL标记结果对照组及彩超照射lOmin组，胎鼠脑组织中凋亡的神经元极少见，凋亡细胞百分率分别为(0・9±0・51)%和(1.4±0.40)%,两者之间无显著性差异(P>0.01);持续照射20min,脑皮质表面的凋亡细胞百分率明显增
3、多达(6.1±0・38)%,与对照组及lOmin组有显著性差异(P<0.01)•照射时间延长至30min,凋亡细胞百分率继续增加(8.3土0.44)%),与对照组、lOmin组及20min组均有显著性差异(P<O.01).TUNEL阴性对照组无阳性细胞.2.2电镜观察结果照射30min组胎鼠脑神经元体积缩小，胞质内有大量空泡，线粒体、内质网、高尔基体等基本正常，结构完整清晰，细胞核呈高电子密度，染色体向核膜靠拢聚集成块状或环状.3讨论细胞凋亡是一种不同于细胞死亡的形态学改变，涉及到生命活动的许多领域，目前已被认为是神经系统发育中的正
4、常事件，并在神经系统的成熟或疾病中可能有重要意义[2]•多种因素可诱导胎鼠神经元凋亡[3]・我们利用彩超辐照孕18d的大鼠，24h后观察胎鼠脑组织，发现照射20min以上可诱导皮层神经元发生凋亡，并且随辐照时间的延长，TUNEL标记的阳性细胞数增多，说明诊断剂量的彩超照射一定时间后可诱导神经细胞凋亡.TUNEL技术是根据凋亡细胞核内DNA被切割后，裸露出游离的3'末端，应用末端转移酶将经生物素标记的dUTP连接到3'末端的原理，作为识别凋亡细胞的标志[4].由于它会对一些细胞核出现非特异性标记，因而形态学观察仍是迄今为止判断凋亡最经典、最可靠的
5、方法[5]•我们利用TUNEL技术检测到彩超诱导的神经元凋亡集屮于皮层，选取皮层细胞进行电镜观察，发现了典型的凋亡细胞改变，证实了彩超照射20min以上确实能诱导皮层神经元发生凋亡.大脑的发育从最初形成到逐渐成熟要经过神经元的增生、分化、迁移、死亡等一系列过程，严格按照细胞内固有的程序和外界环境各因素相互协调，从而形成其稳定的精细结构和功能，一旦受到干扰，就有可能引起结构紊乱和功能障碍•胎龄16〜18d的鼠脑细胞正处于迁移阶段，对电离辐射具有较高的敏感性[6]•本实验证实此期对超声照射亦较敏感•虽然目前对大脑发育中的迁移延迟与生物体发育畸形间的
6、关系尚无直接证据，但据推测二者冇一定的内在联系•实验及流行病学调查表明孕期接受超声照射，仔鼠的神经行为能力下降•这些现象与神经元迁移阶段受损有无关系,是否与细胞凋亡有关尚需深入研究.参考文献：[1]杜联芳，张青萍，刘望彭•诊断超声与大鼠角膜细胞凋亡[J]・中国超声医学杂志，2000;16(9):645-647・[2]SastryPS,RaoKS・Apoptosisandnervoussystem[J].JNeu-rochem,2000;74(1):1-20.[3]HossainMM,NakayamaH,GotoN.Invitroinductio
7、nofapop-tosisofdevelopingbraincel1sby5~azacytidine[J]•IntJDevNeurosci,1996;14(1):11-17・[4]屮华病理学杂志编辑委员会•全国端粒酶、P53和细胞凋广的研究及应用研讨会会议纪要[J]・中华病理学杂志，2000;29(1):9-11-2000.[5]郑骏年，谢叔良•细胞凋亡检测方法研究进展[J]•国外医学临床生物化学及检验学分册,1999;20(3):124-126._6]TaguchiYH,FushikiS,KinoshitaCetal.Effectsoflow
8、-doseX-irradiationonthedevelopmentofthemousecerebellarcortex[J]・JRadiatRes,
