大鼠孤束核内h3 受体对哮喘发作时脑组织中fos蛋白表达的影响论文

《大鼠孤束核内h3 受体对哮喘发作时脑组织中fos蛋白表达的影响论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、大鼠孤束核内H3受体对哮喘发作时脑组织中Fos蛋白表达的影响论文.freelalerats.MethodsTheexpressionsofER.αmRNAandER.βmRNAinlungtissueserasechainreaction（RT-PCR），andER.βproteininlungmunohistochemistry.ResultsAsidefromRNA，lungtissueshooderateexpressionofER.βmRNA.ThepositiveER.βimmunore

2、ac-tivitynarepithelium，intermediatecells.freeloothmusclecellsoflungtissueandinpulmo-naryvascularsmoothmusclecells，endothelialcells.ConclusionER.βisdistributedinlungtissueofmalerats.Keymunohistochemistry;rats［摘要］目的:探讨大鼠孤束核（NTS）内组胺H3受体对哮喘发作时大脑Fos蛋白表达的影响

3、及其意义。方法:取健康雄性SD大鼠制备哮喘模型并诱发哮喘发作，采用中枢立体定位及微量注射技术，分3组分别在NTS内微量注射无菌生理盐水、H3受体激动剂R.α.methylhistamine（RMHA）以及H3受体拮抗剂thioperamide（Thio）加RMHA，用SABC免疫组织化学方法测定大鼠哮喘急性发作后1hFos蛋白在丘脑至延髓平面各核团的分布情况。结果:与哮喘组相比，哮喘大鼠NTS内微量注射1μgRMHA，丘脑室旁核、下丘脑室旁核、室周核、NTS等核团Fos蛋白表达减少，阳性细胞数降低

4、，差异有显著性（P0.01）;而用Thio5μg预处理则可拮抗RMHA的上述效应。结论:NTS内H3受体可能通过丘脑室旁核、下丘脑室旁核和室周核等脑区相关神经元参与对哮喘的神经调控，从而可能抑制哮喘发作。［关键词］大鼠;孤束核;H3受体;哮喘;Fos蛋白;表达支气管哮喘是一种常见的气道慢性变态反应性炎症，发病机制非常复杂，其中涉及多种炎性细胞和炎性介质，目前已证实c-fos参与了气道炎症反应。c-fos是一种即刻早期基因，在生理状态下即有低水平表达，调控着多种细胞的生长和分化，参与重要脑功能活动的

5、信号转导和调控过程，已被公认为脑功能活动形态学定位标记物之一［1］。本研究拟在大鼠孤束核（nucleustractussolitarius，NTS）内微量注射H3受体激动剂（R.α.methylhistamine，RMHA），用Fos蛋白抗体免疫组织化学方法检测丘脑至延髓平面各核团Fos蛋白的表达情况，初步探讨NTS内H3受体可能通过哪些脑区神经元来调控大鼠哮喘发作时的呼吸运动，从而为揭示哮喘发病机制和开发有效的抗哮喘药物提供实验依据。1材料和方法1.1哮喘模型制备雄性成年SD大鼠28只，体重25

6、0～300g，由东南大学医学院实验动物中心提供，在安静、温暖（18～25℃）、避强光、明暗周期为10.14h的实验室预饲养1周后，随机取24只大鼠分成哮喘模型组（n=18）和生理盐水（NS）对照组（NS组，n=6）。实验第1天，每只模型组大鼠腹腔注射用卵蛋白（OVA）粉末100mg、氢氧化铝干粉100mg、灭活的百日咳杆菌5×109个配成的混悬液1ml1次，自第15天开始用超声雾化器给大鼠雾化吸入1%OVANS溶液（2～3mlmin-1，颗粒直径≤5μm），每天1次，每次均以哮喘症状出现（烦躁不安

7、、呼吸急促、用力呼吸、呼吸困难、喘息、腹肌明显收缩、咳嗽等）作为指标，连续3d。NS组大鼠在致敏和吸入激发阶段均以NS代替OVA混悬液，且吸入时间为同批哮喘模型组鼠最长诱喘时间。1.2核团定位和给药方法模型大鼠乌拉坦1gkg-1腹腔注射麻醉后，将鼠头固定于立体定位仪上，参照Paxinons-HA（Sigma公司）临用前用无菌NS配制成1μgμl-1和2μgμl-1;H3受体拮抗剂thioperamide（Thio，Sigma公司）用无菌NS新鲜配制成10μgμl-1，pH7.2～7.4，低温保存，

8、注射前置于37℃水浴箱中加温。实验结束后用相同给药法在原点注射等体积美蓝后，将大鼠头浸泡在10%的甲醛液内，7d后冰冻切大鼠脑片（40μm），查找注射点，对照大鼠脑图谱确定注射部位，凡注射部位不在NTS的实验动物均剔除。1.3实验分组将已成功制备的哮喘模型大鼠按NTS处注射不同药物再随机分为哮喘组（OVA加NS组）、OVA加RMHA组及OVA加Thio加RMHA组3组，每组6只，即各组在静脉注射OVA溶液（40mgkg-1，共0.1ml）诱发哮喘急性发作后，分别往NTS内微量注射1