高效液相色谱法测定参芪健胃颗粒中芍药苷的含量论文

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1、高效液相色谱法测定参芪健胃颗粒中芍药苷的含量论文余树珍，张红梅，陆春燕【关键词】参芪健胃颗粒；,,芍药苷；,,高效液相色谱法摘要：目的测定参芪健胃颗粒中芍药苷的含量。方法采用高效液相色谱法（HPLC）测定含量，色谱柱：Kromasil1005C18柱（4.6mm×250mm）。流动相：甲醇水(38∶62)，检测波长：230nm，流速：0.7ml/min，柱温：30℃。结果该条件下芍药苷与其它组分分离良好，芍药苷在0~50μg/ml呈良好的线性关系.freelinationofPaeoniflorininShenqijianinationmetho

2、dofShenqijianasil100-5C18(4.6mm×250mm).Themobilephasecorsrstedofacetonitrile：Methanol.Theflol/min,andthecolumntemperatureethodlforPaeoniflorin.Theaveragerecoverypleproductrespectively,.freelethodcanbeusedforthequalitycontrolofShenqijianasil100-5C18柱（4.6mm×250mm）。流动相：甲醇水（38∶62

3、），流量：0.7ml/min；检测波长：230nm；柱温：30℃；进样量：10μl；理论板数按芍药苷峰计算应不低于2000［2］。2方法与结果2.1溶液的配制2.1.1对照品溶液的制备［3］精密称取在五氧化二磷减压干燥器中干燥36h的芍药苷对照品10.13mg，置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为贮备液。精密吸取2ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。2.1.2供试品溶液的制备取本品，研细，取约2g，精密称定，置50ml容量瓶中，加50%甲醇35ml，超声处理（功率250in［4］，放冷，加50%甲醇至刻度，摇匀，取上清液，滤

4、过。精密吸取续滤液5ml，置水浴上蒸干，残渣用5ml流动相溶解，转移于10ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取续滤液作为供试品溶液。2.1.3缺白芍阴性供试品溶液的制备配制缺白芍药材的阴性供试品，照供试品溶液制备项下操作，即得。2.2系统适用性实验分别吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性溶液注入色谱仪，记录色谱图，结果见图1。a芍药苷对照品b供试品c缺白芍阴性供试品图1HPLC系统适用性色谱图（略）由图1可见，芍药苷峰保留时间约为8.7min，阴性对照色谱在芍药苷峰位置无假阳性峰，表明其它组分对测定无干扰，芍药苷峰与其

5、它组分的分离度为4.7，理论塔板数以芍药苷峰计算为8163。2.3线性关系考察精密吸取对照品贮备液0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml，分别置10ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，分别精密吸取10μl，注入色谱仪。以芍药苷的进样量（X）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标，进行线性回归，得回归方程：Y=4.4146×106X-1.0172×104。2.4精密度实验精密吸取同一芍药苷对照品溶液（20μg/ml），重复进样5次，各10μl，测定峰面积，结果RSD=0.689%。2.5稳定性实验对同一供试品溶液在0，1，2，4，8，12

6、h进样，测定峰面积，结果芍药苷峰面积RSD=0.724%。2.6重现性实验取同一批供试品（批号：20060201），分别制备5份供试品溶液，测定参芪健胃颗粒的含量，结果表明本法重现性良好，RSD=1.25%。2.7加样回收率实验取同批供试品（批号：20060201）6份，每份约1g，精密称定，分别精密加入2，2.5，3ml的芍药苷对照品贮备液各2份，按供试品制备与测定方法操作，测定结果见表1。测定结果表明，本方法回收率好，方法可靠。表1加样回收率实验结果（略）2.8供试品的测定分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，依法测定，以

7、外标注法计算供试品中芍药苷含量。结果见表2。表2供试品含量测定结果（略）*为每袋中含量3讨论当以滤液直接进样时，出现峰形不佳，因此将滤液蒸干，用流动相作溶剂，峰形效果大为改善。因参芪健胃颗粒含14味药材，其它成分对芍药苷的干扰比较大。按《中国药典》2005版白芍的含量测定，以乙腈0.1%磷酸溶液（14∶86）为流动相，分离效果较好，但保留时间在19min左右。当加大乙腈比例（15∶85），其它成分干扰偏大。在选择甲醇水（38∶62）时，保留时间在9min左右，干扰少，分离效果理想，因此选择甲醇水（38∶62）为流动相。