对血清胸腺因子(fts)提高nk细胞活性的实验研究

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1、对血清胸腺因子(FTS)提高NK细胞活性的实验研究作者:乐嘉静,张林可,徐康森【摘要】目的观察FTS提高正常动物、荷瘤动物及免疫缺陷型动物自然杀伤性细胞(NK)活性的作用。方法用正常动物、荷瘤动物及免疫缺陷型动物模型皮下注射不同剂量的FTS后,取其脾NK细胞测定其对靶细胞(L929)的杀伤能力。结果FTS2.5mg/kg、1.25mg/kg能够显著地增加正常小鼠及免疫力低下模型小鼠的NK细胞对靶细胞的杀伤能力(P<0.01)。结论FTS能够提高NK细胞的活性,具有抗肿瘤及免疫增强的作用。【关键词】血清胸腺因子;NK;L929;抗肿瘤【Abstract】Obj

2、ectiveObservationtheFTStoenhancethenormalanimal,theDutchlumpanimalandtheimmunodeficiencyanimalnaturekillinggermcell(NK)activefunction.MethodsAfterthenormalanimal,theDutchlumpanimalandimmunodeficiencyanimalmodelhypodermicinjectiondifferentdosageofFTS,takeitsthespleenNKcelltodetermineit

3、tothetargetcell(L929)killcapability.ResultsFTS2.5mg/kg,1.25mg/kgcanobviouslyincreasethenormalmouseandtheimmunityloodelmouse’sNKcelltothetargetcellkillcapability(p<0.01).ConclusionFTScanenhancetheNKcellactiveness,hasfunctionorandtheimmunitystrengthen.【Keyor血清胸腺因子(thymulin,FTS)是胸腺组织中

4、由9个氨基酸残基组成的小分子肽,是一类具有增强机体免疫功能的多肽[1],自然杀伤细胞(NK)具有抗肿瘤、抗感染和免疫调节功能[2],是抗肿瘤的免疫监视作用中的第一道防线[3],因此,NK活性的提高对于机体的抗肿瘤能力的提高是有很积极作用的,本文通过研究FTS对不同模型动物NK细胞活力的影响,了解FTS的免疫调节作用。1材料与方法1.1药物与试剂血清胸腺因子(批号060821,由深圳市翰宇生物工程有限公司提供),其纯度为>96%,冻干粉末,冷冻保存,临用前取FTS1mg,加1ml消毒生理盐水稀释为1mg/ml的原液,供皮下注射用。阳性对照药为胸腺肽,冻干粉末,

5、20mg/支(黑龙江迪龙药业有限公司提供,批号20061001);环磷酰胺,针剂,10mg/10ml(山西普德药业有限公司提供,批号20060203);0.1%中性红染液;细胞溶解液(50%醋酸+50%乙醇);0.25%胰酶;RPMI-1640培养液。1.2瘤株小鼠H22,取接种于小鼠的腹腔第7天的瘤株,配成106/ml瘤细胞悬液,接种于小鼠前肢腋窝皮下0.2ml/鼠。1.3靶细胞(L929)实验前一天换液,用0.25%胰酶消化后,用含10%小牛血清的RPMI-1640稀释成1×105/ml。1.4动物实验用体重18~20g的SPF级雄性昆明小鼠,动物合格证号:S

6、CXK京(2005-2006),均由中国药品生物制品检定所实验动物中心提供。饲养观察2天后使用。实验动物室为无菌空气二级过滤,人工日光灯12h自动照明,恒温、恒湿送风,温度22~24℃,相对湿度40%~45%。鼠笼具为塑料盒,不锈钢丝盖。1.5免疫缺陷型动物模型用18~20g的昆明小鼠称重后皮下注射环磷酰胺,剂量为80mg/kg,给药体积0.1ml/10g,5天后称重,将体重降低的小鼠随机分组用于实验。1.6剂量设置根据药效曲线结果设置剂量为高、中、低三个剂量组,小鼠给药剂量2.5、1.25、0.63mg/kg,给药体积为0.1ml/10g。阳性对照药胸腺肽,临用

7、前配成13mg/ml,小鼠皮下0.1ml/10g,剂量为130mg/kg。空白对照用NS,药液临用时根据动物个体体重调整给药体积。1.7给药方法分别取接种H22瘤株24h后的昆明小鼠,健康动物及免疫缺陷型动物各50只,均分为5组,分别按高、中、低3个剂量注射FTS,对照组注射NS,用胸腺肽做阳性对照,均皮下注射给药,每天给药1次,共给药14天。1.8小鼠脾NK细胞的制备将给药后的小鼠断颈放血,取脾置于无血清RPMI-1640培养液中去杂质,研磨成单个细胞后用100目筛及200目筛过滤,将滤液1000rpm,5min离心,去上清,除红细胞后,用无血清RPMI-164

8、0培养液洗

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