扶正护脑胶囊对脑出血大鼠蓝斑和心肌组织去甲肾上腺素含量的影响论文

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1、扶正护脑胶囊对脑出血大鼠蓝斑和心肌组织去甲肾上腺素含量的影响论文.freelyocardialtissuesinratsorrhage.Methods72ratslydividedinto4groups:sham,model,FuzhenghunaoandAngongniuhuang.ThecontentofNEanceliquidphase-electrochemicalmethodat6h,24hand72hofpost-operation.ResultNEgroup,anddecrease

2、dintentgroups.ConclusionFuzhenghunaocapsulecouldbeusedtoinhibittheactivationoflocusceruleusnoradrenalinsystemandprotectmyocardialtissuesbyregulatingNEcontent.Key;rat去甲肾上腺素(noradrenaline,NE)是与心血管活动密切相关的重要的神经递质,蓝斑核是重要的植物神经调节中枢之一,主要由含去甲肾上腺素能的神经元组成,是NE合成

3、的主要部位,.freel,4.6mm×150mm);流动相为50mmol/L柠檬酸-乙酸钠缓冲液,pH3.5(0.6mmol/LB-8离子对试剂,1.0mmol/L二正丁胺,0.3mmol/LNa2EDTA,2%甲醇);台式高速离心机(军事医学科学院实验仪器厂)等。1.3主要药物与试剂NE、内标物3,4-二羟苄胺(DHBA)为美国Sigma公司产品;正丁胺为上海试剂公司进口分装产品;B-8离子对试剂为天津化学试剂公司产品;扶正护脑胶囊系北京中医药大学东直门医院重点实验室中药化学组提供,0.5g/

4、粒;安宫牛黄丸系北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂生产,3g/丸,批号6010103。甲醇(分析纯)为北京化工厂产品;其它试剂均为国产分析纯。2实验方法2.1分组及给药72只动物随机分为假手术组、模型组、扶正护脑组和安宫牛黄组,每组18只,分别于术后6、24、72h3个时相点取材,每个时相点6只动物。从术前11d开始灌胃,扶正护脑组剂量为1.35g/(kg?d),安宫牛黄组剂量为0.27g/(kg?d),假手术组和模型组分别予等量的生理盐水。第12日造模,手术前后疗程2周。2.2大鼠脑出血动物模

5、型的建立参照文献3方法,即选用胶原酶加肝素联合注射建立脑出血动物模型。大鼠术前8h禁食不禁水,用0.3%戊巴比妥钠(30mg/kg)腹腔注射麻醉,俯卧位固定于脑立体定位仪上。取头皮正中切口,骨膜剥离器剥离骨膜,暴露前囟及冠状缝,取前囟为原点,向右3mm、向后1mm、深度5mm为注射点即为右侧尾状核,牙科钻钻孔,微量注射器注射含胶原酶(1U/μL)和肝素(7U/μL)的生理盐水1μL。假手术组注射等量生理盐水。注药后留针5min,退针缝合头皮。手术动物苏醒后,根据Bederson等4的评定方法分为

6、3级。1级:将大鼠尾巴提起,瘫痪侧前肢回收后屈曲于腹下,正常侧前肢向地面伸展;2级:除1级体征外,向瘫痪侧推大鼠时阻力较对侧明显降低;3级:除以上体征外,大鼠有向瘫痪侧侧旋或倾倒的行为。符合以上症状和体征的显示造模成功。2.3组织样品的制备冰盘上取蓝斑组织和左室壁心肌组织,称重,加入冰冷的0.1mol高氯酸溶液(1mg组织加20μL)和25μLDHBA(2g/L),冰浴条件下超声匀浆,4℃、12000r/min离心20min,取上清液进行分析。2.4检测指标及方法采用高效液相色谱-电化学检测法(

7、HPLC-ECD)测定NE的含量。2.4.1测定条件色谱条件:Nova-PakC18色谱柱,4.6mm×150mm,5μm(大连色谱中心填装),流动相为50mmol/L,pH为3.5的柠檬酸-乙酸钠缓冲液(内含0.6mmol/LB-8离子对试剂,1.0mmol/L二正丁胺,0.3mmol/LNa2EDTA,2%甲醇),流速1.0mL/min,玻璃碳工作电极,检测池电压为0.75V;3,4-二羟苄胺DHBA为内标物,样品中各主要组分用内标法进行定量。2.4.2样品测定取20μL上清液,经0.5μm

8、滤膜过滤后上机检测,含量以ng/g组织湿重表示。2.5统计学方法所有数据均以x±s表示,用SPSS12.0统计分析软件处理。组间比较采用方差分析(One-B含量的动态变化,结果发现,术后二者均显著升高,术后24h达到高峰,术后48h开始下降,二者变化趋势基本一致。提示外周血NE的增加参与了脑出血后的心肌损伤。目前研究认为,血浆儿茶酚胺的升高更多来自心内神经末梢释放的增加而不是交感肾上腺活动的增强10-11。此外,外周血NE增加还与中枢神经元释放增加以及中枢神经系统单胺类递质神经元损伤、血脑屏障破

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