两种方法检测乙型肝炎病毒五项指标的结果对比

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1、两种方法检测乙型肝炎病毒五项指标的结果对比作者:龙青文,何建军,马家驹,何秀琳,肖金平【关键词】酶联;血清乳胶;定性分析  [关键词]酶联;血清乳胶;定性分析  乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、e抗原(HBsAg)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb)的检测在许多方面如诊断乙肝判断愈后、筛选献血员、乙肝的流行病学调查、判断人群对乙型肝炎的免疫水平,对食品、保育及饮水管理行业人员定期进行健康体检等起着重要的作用。故选择一种特异、敏感、稳定的实验室检测方法检测乙型肝炎病毒的五项指标显得尤为重要。现将56例检测者血清同时用酶联免疫法和血清乳胶层析

2、法对比检测结果报告如下。  1材料与方法  1.1 标本来源 56例受检者中,男29例,女27例,最大年龄72岁,最小年龄29岁,平均年龄46岁;来自健康体检人群15例,其中13例检测具有阳性结果,2例各项指标均为阴性、另41例为门诊检查结果有阳性的患者,均系血清标本。  1.2 方法 酶联免疫法用乙型肝炎病毒(HBsAg,HBsAb,HBeAg、HBeAb,HBcAb)诊断试剂盒,由上海华泰生物工程实业有限公司生产,48人份,批号20040503,按说明书操作。乙肝两对半血清/血浆乳胶层析法检测试剂板由ACONLaboratories.Inc.SanDiegoCA92121US

3、A提供,批号200407029,按说明书操作。  1.3 质量控制 酶联免疫法每项检测项目均设阴、阳性对照各2孔,每空加入阴性对照(或阳性对照)各1滴,并设有空白对照1孔。乳胶层析法各项检删项目均设质控区(C)。  1.4 检测结果 判定标准:酶联免疫法是根据颜色的变化,作定性分析。此法HBsAg、HBsAb、HBeAg呈黄色为阳性反应,无色为阴性反应,阳性对照为黄色,阴性对照为无色。HBeAb、HBcAb无色为阳性,黄色为阴性,阳性对照为无色,阴性对照为黄色。乳胶层析法HBsAG、HBsAb、HBeAg在测试区内(T)出现一条红色条带则是阳性结果,不出现红色条带则为阴性。HBe

4、Ab、HBcAb结果则相反,强阳性标本测试区内(T)将没有红色条带,弱阳性标本测试区内(T)将有一条非常弱的红色条带,阴性标本测试区(T)将会出现明显的红色条带。无论相应的待测物质是否存在于标本中,质控区(C)都会出现红色条带。两种检测方法结果对比分析用卡方检验两两比较进行统计学处理。  2 结果  根据上述的结果判定标准,用两种方法对56例检测者血清对比分析,结果见表1。  表1 两种方法检测乙肝病毒五项指标阳性结果对比(略)  从表1中看出,用两种方法检测的阳性结果HBeAg相同均为7例,HBsAg相差1例,HBsAb相差2例,HBeAB、HBcAb各相差3例,用四格表进行两

5、两对比分析,其结果见表2~表5。  表2 HBsAg两种方法的结果对比(略)  注:经χ2检验P>0.05。  表3 HBsAb两种方法的结果对比(略)  注:经χ2检验P>0.05。  表4 HBeAb两种方法的结果对比(略)  注:经χ2检验P>0.05。  表5 HBcAb两种方法的结果对比(略)  注:经χ2检验P>0.05。  表2~表5,每一项检测指标用两种方法检测,进行两两对比分析,经统计学处理,差异无显著性(P>0.05)。  3 讨论  3.1 关于检测结果的判定  3.1.1 酶联免疫法试剂盒采用EiA原理,是将抗原抗体的高度特异

6、性与酶对底物的高效催化作用有效结合起来,根据酶作用底物颜色变化,作定性分析。各项检测项目的阴、阳性对照,空白对照均与实验要求相一致,如出现异常结果,在任何情况下,应重新测试。  3.1.2 乳胶层析法HBAg、HBsAb、HBeAg检测试纸条有用双抗体(抗原)夹心法,试纸条含有被事先固定于膜上测试区(T)的多克隆抗体(抗原)和质控区(C)的相应抗体(抗原),如标本中含有相应的待测物质,在测试区内(T)出现一条红包条带,则是阳性结果,不出现红条第带则为阴性。HBeAb、HBcAb采用竞争抑制法,其强阳性标本测试区内(T)将没有红色条带,阴性标本测试区内(T)将会出现明显的红色条带。

7、而质控区(C)无论相应的抗体是否存在于标本中,都会出现一条红色色带,它是判断是否有足够标本,层析过程是否正常的标准,同时也做为试剂内控的标准,如果未出现红色条带,表明不正确的操作过程,或试纸条已变质损坏,在任何情况下,应重新测试。  3.2 通过本文56例检测者血清对两种方法的结果对比,经统计学处理,检测结果差异无显著性(P>0.05),两种方法均具有特异性强,灵敏度高,稳定性好等特点,但层析法相对操作便捷,15min可读取结果,酶联免疫法相对时间较长,需37℃水浴放置2次

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